多聚乳糖胺型N-聚糖与结肠癌细胞株SW620耐药性的关系探讨

多聚乳糖胺型N-聚糖与结肠癌细胞株SW620耐药性的关系探讨

作者:师大云端图书馆 时间:2018-04-23 分类:参考文献 喜欢:3782
师大云端图书馆

【摘要】目的5-氟尿嘧啶(5-FU)是临床治疗结肠癌的最常用药物之一。本文在5-FU处理结肠癌细胞SW620后,分析多聚乳糖胺链的表达水平变化;并检测合成多聚乳糖胺链的糖基转移酶β3GnT8基因和蛋白水平的表达变化。同时为了进一步阐明多聚乳糖胺链及糖基转移酶β3GnT8与结肠癌细胞5-FU耐药性的相关性,以耐药细胞株SW620/5-FU为研究对象,检测耐药细胞株中多聚乳糖胺链和糖基转移酶β3GnT8的表达水平,初步探讨多聚乳糖胺链及糖基转移酶β3GnT8与结肠癌细胞耐药性的关系。方法(1)MTT药物敏感实验来测定5-FU处理SW620细胞后细胞的半数致死率(IC50);Hochest33258试剂盒和流式细胞术检测5-FU处理SW620细胞后细胞凋亡程度变化;流式细胞术检测5-FU处理SW620细胞后细胞周期变化;流式细胞术和Lectin-blot分别检测5-FU处理SW620细胞后细胞表面及细胞内多聚乳糖胺链的表达变化;碱性磷酸酶试剂盒ALP/AKP检测5-FU处理SW620细胞后细胞分化指标碱性磷酸酶(ALP/AKP)的活性变化;Western-blot检测糖基转移酶β3GnT8和CD147在蛋白水平的表达情况。(2)利用逐步递增浓度间歇作用法筛选耐药细胞株SW620/5-FU;MTT药物敏感实验测定耐药细胞株SW620/5-FU的耐药指数;Real-timePCR检测耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)基因的mRNA水平表达;Western-blot检测耐药细胞株SW620/5-FU和SW620中肿瘤干细胞标志物CD133蛋白表达;Hoechst33258试剂盒和流式细胞术检测两株细胞的凋亡情况;Real-timePCR和Western-blot分别检测耐药细胞株SW620/5-FU及SW620中β3GnT8的mRNA和蛋白水平表达;流式细胞术和Lectin-blot分别检测两株细胞的细胞表面和细胞内多聚乳糖胺的表达。结果(1)5-FU处理SW620细胞后,细胞的凋亡程度升高,细胞周期主要抑制在S期,细胞表面及细胞内全部多聚乳糖胺链的表达均降低,且有时间依赖性,细胞分化程度升高;5-FU处理SW620细胞后,Western-blot检测β3GnT8和CD147的蛋白水平表达变化,结果表明两者表达均有显著增加。(2)筛选得到耐药细胞株SW620/5-FU,耐药指数RI为7.62。其P-gp基因mRNA表达水平明显高于SW620细胞;两种细胞中肿瘤干细胞标志物CD133蛋白水平表达变化不大,无统计学意义;SW620细胞凋亡水平高于SW620/5-FU细胞;以上结果均表明耐药细胞株筛选成功。β3GnT8的基因和蛋白水平表达在两株细胞中差异显著,其在SW620/5-FU细胞中表达明显高于SW620细胞;流式细胞术和Lectin-blot检测两种细胞中细胞表面和细胞内的多聚乳糖胺链的表达,结果显示多聚乳糖胺链在SW620/5-FU细胞中表达水平明显高于SW620细胞。结论(1)5-FU能够促进SW620细胞的凋亡,将细胞周期主要抑制在S期;5-FU能够抑制多聚乳糖胺链的表达,同时也抑制了糖基转移酶β3GnT8和细胞表面糖蛋白CD147的蛋白水平表达。推测5-FU处理SW620细胞后,因其抑制了β3GnT8的蛋白表达而影响多聚乳糖胺链的合成,细胞凋亡水平也进而增强,同时降低了CD147的表达。(2)筛选得到的5-FU耐药细胞株SW620/5-FU高表达P-gp,SW620/5-FU细胞表面及细胞内多聚乳糖胺链表达水平均高于SW620细胞,β3GnT8基因和蛋白水平表达也高于SW620细胞,而细胞凋亡水平低于后者。两细胞凋亡程度不同及多聚乳糖胺链表达差异的原因可能是由于合成多聚乳糖胺链的糖基转移酶β3GnT8的表达变化引起,进而推测β3GnT8可能促进肿瘤细胞产生耐药性。
【作者】高利平;
【导师】周迎会;
【作者基本信息】苏州大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士
【关键词】5-FU;多聚乳糖胺链;β3GnT8;结肠癌;耐药性;

【参考文献】
[1]乔振华,任亚飞.石墨烯中量子反常霍尔效应研究进展[J].深圳大学学报(理工版),2014,06:551-560.
[2]于明.惯性与图像传感器复合的测量系统设计[D].中北大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[3]李建平.对偶比较法的理论及应用研究[D].华东师范大学,普通心理学,1999,硕士.
[4]黄博.图数据库中多子图匹配查询算法研究[D].复旦大学,计算机软件与理论,2012,硕士.
[5]王雷荣.试论薛定谔的准实在论的实在观[D].山西大学,科学技术哲学,2004,硕士.
[6]于会影.论美国金融监管法律体制的变迁及对我国的启示[D].吉林大学,法律,2013,硕士.
[7]李丽.胎球蛋白A及其岩藻糖基化修饰改变在HBV相关肝病中的研究[D].第二军医大学,临床检验诊断学,2013,硕士.
[8]徐涛.高校大学生法制教育研究[D].江西农业大学,思想政治教育,2012,硕士.
[9]刘玉梅.先秦儒家的象征文艺观初探[D].安徽大学,文艺学,2004,硕士.
[10]刘超颖.PI/45钢复合材料热模压成型工艺研究[D].燕山大学,2014.
[11]陈伟志,魏振军,王春迎.多元统计分析在数据挖掘中的作用[J].信息工程大学学报,2003,04:22-25.
[12]廖欢.知识型政府视角下我国市区政府电子政务的建设研究[D].沈阳师范大学,行政管理,2014,硕士.
[13]方煜东.贵州:西南新丝绸之路经济带之重要通道[J].贵州大学学报(社会科学版),2014,04:39-42.
[14]罗孝洪.小型贸易加工企业战略管理研究[D].华东理工大学,工商管理(专业学位),2013,硕士.
[15]胡寅.乳白蚁和散白蚁的种群生态学研究[D].浙江大学,植物保护(专业学位),2012,硕士.
[16]于贺.社会工作介入城市老人社区照顾问题研究[D].广西师范大学,社会工作(专业学位),2013,硕士.
[17]郭强.低频电磁铸造7075铝合金热处理工艺研究[D].东北大学,材料加工工程,2010,硕士.
[18]阙斐.黄酒的抗氧化活性及其中的酚类物质[D].浙江大学,2006.
[19]卢正阳.校园数据处理中心管理系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[20]刘玉婷.日本初中理科《新科学》教材的分析研究[D].华中师范大学,学科教学,2013,硕士.
[21]班敏.考虑弯矩作用高强螺栓T型接头抗拉承载力研究[D].吉林大学,结构工程,2014,硕士.
[22]周旭坤.基于IEC 61850标准的AMI系统通信技术的研究[D].华侨大学,信息与通信工程,2014,硕士.
[23]张心智.金融资产管理公司商业化转型的问题与对策研究[D].南昌大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[24]苟文静.高级迭代重建技术在低剂量冠状动脉CT血管成像中的研究[D].第二军医大学,影像医学与核医学(专业学位),2013,硕士.
[25]宋亮.沙棘多糖的提取纯化及体内、体外功能研究[D].内蒙古农业大学,生物化学与分子生物学,2012,硕士.
[26]于新.移动Ad Hoc网络中基于能量的机会路由协议的研究[D].大连海事大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[27]何丰涛.事业单位改革研究[D].长安大学,行政管理,2013,硕士.
[28]陈琛.化妆品说明书汉英翻译错误分析及对策[D].浙江工商大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[29]王光耀.单根烟自动检测系统设计[D].西安电子科技大学,信号与信息处理,2010,硕士.
[30]贾尚帅,李明高,李强,丁千.干摩擦自激振动系统的滑模变结构控制[J].大连交通大学学报,2014,02:44-47.
[31]王涵.基于SEM的中国人身保险公司风险分析[D].天津财经大学,统计学,2012,硕士.
[32]齐建明.浅谈数字视觉包装对媒体品牌形象化作用[D].河北师范大学,美术学,2014,硕士.
[33]姜莉.《镜花缘》的性别与叙事[D].陕西理工学院,中国古代文学,2013,硕士.
[34]王珏.基于URL及上下文的并行分块处理主题爬虫研究[D].复旦大学,计算机应用技术,2012,硕士.
[35]郭治财.建筑业的“营改增”问题研究[D].山西财经大学,会计学,2014,硕士.
[36]韩旭.校本课程开发对思想政治课教师的挑战[D].东北师范大学,教育,2003,硕士.
[37]史友宽.全国排球联赛现场观众及主场经营状况的调查研究[D].河南大学,体育教育训练学,2004,硕士.
[38]张媛媛.美国中小学家长参与教育研究[D].河北师范大学,教育学原理,2013,硕士.
[39]朱丹.基于人机工程学的城市公共设施设计研究[D].哈尔滨理工大学,设计艺术学,2013,硕士.
[40]韦钰.新HSK四级考查语言点探析[D].华中师范大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[41]赵博文.山区风环境数值模拟与高墩刚构桥风致抖振时域分析[D].西南交通大学,桥梁与隧道工程,2014,硕士.
[42]任永祥.沥青路面预防性养护技术研究及应用[D].内蒙古农业大学,林业工程,2013,硕士.
[43]辛鹏程.添加剂对西藏青稞秸秆和多年生黑麦草混合青贮发酵品质及有氧稳定性的影响[D].南京农业大学,动物营养与饲料科学,2013,硕士.
[44]张小丽.“关系”抑或市场?[D].复旦大学,社会学,2012,硕士.
[45]樊陈,倪益民,沈健,何昭辉,谢黎,黄国方.IEEE1588在基于IEC61850-9-2标准的合并单元中的应用[J].电力系统自动化,2011,06:55-59.
[46]鞠文才.马克思主义信仰的科学解析与现实建构[D].东北师范大学,马克思主义理论与思想政治教育,2003,硕士.
[47]汪海燕.乙酸催化加氢制乙醇的研究[D].华东理工大学,化学工艺,2013,硕士.
[48]曲博通.船名和舷号绘制中反透视变形的研究及应用[D].西南交通大学,软件工程,2014,硕士.
[49]梁亚南.门户网站内容管理系统的设计与实现[D].南京大学,软件工程(专业学位),2013,硕士.
[50]王军梅.论我国刑事和解制度的完善[D].中国政法大学,比较法学,2014,硕士.

相关推荐
更多