大豆源抗氧化肽活性组分优选与其生物学评价

大豆源抗氧化肽活性组分优选与其生物学评价

作者:师大云端图书馆 时间:2017-12-21 分类:参考文献 喜欢:1711
师大云端图书馆

【摘要】本课题隶属于国家“十二五”科技支撑计划《食源性功能肽生物制备技术研究》(2012BAD33B03),重点开展大豆源抗氧化肽活性组分优选与其生物学研究,研究结果如下:(1)在大豆源抗氧化酶解物可控酶解关键技术优化研究中,以蛋白质含量为43.94%的大豆蛋白粉(SPP)为实验原料,选用食品级碱性蛋白酶Alcalase2.4L作为水解酶,以水解度(DH)和DPPH自由基清除率为评价指标,利用单因素(OFAT)实验考察了酶解pH、酶解温度和酶与底物比对大豆源抗氧化酶解物(SAH)的DH和DPPH自由基清除率的影响。在此基础上,利用响应面(RSM)设计方法构建SAH可控酶解的三元二次回归模型,获得回归方程。对方程求偏导得到碱性蛋白酶的最佳酶解工艺参数为:pH值为10.32,温度为50oC,酶与底物比为12%,在最佳优化工艺下SAH的DPPH自由基清除率为67.16±2.95%,DH为35.00±1.08%。(2)在大豆源抗氧化肽活性组分优选与生物学评价研究中,以SAH为实验原料,选用分子截留量为1kDa、3kDa、10kDa和30kDa超滤膜对SAH进行分离,获得不同分子量的大豆源抗氧化肽(SAP)。MIR光谱的结果表明,除SAH,SAP-2—SAP-5各组分中含有α螺旋、β折叠和非周期性构象。体内和体外活性组分优选结果表明,SAP-4具有体内外良好活性。生物评价结果表明,SAP-4对小鼠无毒害作用。氨基酸分析结果表明,SAP-4的氨基酸含量为67.85g/100g,含有8种必需氨基酸。(3)在高活性大豆源抗氧化肽活性组分优选与结构鉴定的研究中,以具有体内外良好活性的SAP-4为原料,利用体积排阻色谱(SEC)对其进行纯化,获得6个洗脱峰,以DPPH自由基清除率为评价指标,优选出高活性组分SAP-4-III,并利用LC-MS/MSQTrap结合氨基酸分析结果和理论计算,获得SAP-4-III的一个氨基酸序列FHDHE。该序列肽经固相合成法进行合成,获得了纯度为98.82%的肽,肽的DPPH自由基清除率为22.64±1.02%。(4)基于高压脉冲电场技术提高SAP-3抗氧化活性的研究中,以SAP-3为原料,以DPPH自由基清除率为评价指标,利用PEF技术,考察了电场强度和电场频率对SAP-3DPPH自由基清除率的影响,在此基础上,利用RSM实验,构建了三元二次回归模型,对该方程求偏导得到PEF处理SAP-3最优工艺参数:肽液浓度为10mg/mL,电场强度为14.37kV/cm和电场频率为2000Hz,在此条件下,DPPH自由基清除率为85.00%。
【作者】王佳;
【导师】林松毅;
【作者基本信息】吉林大学,食品科学,2014,硕士
【关键词】大豆源抗氧化肽(SAP);活性组分;生物学评价;结构;高压脉冲电场(PEF);

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