柑橘和果汁中链格孢霉毒素检测技术研究

【摘要】真菌毒素是由多种丝状真菌产生的一类次级代谢产物,主要发生在果蔬和粮食产品中,影响农产品的品质和经济价值,并且具有致癌性、诱变性等多种毒性作用,危害人体健康。柑橘是世界第一大水果,在世界水果产业中占有重要的地位。我国是世界柑橘的主要起源中心,种植面积和产量均居世界首位。宽皮柑橘、橙类、柚类等柑橘类水果以及橙汁、苹果汁、葡萄汁等果汁产品是居民日常饮食的重要组成部分,因此测定柑橘类水果和果汁中的真菌毒素含量具有重要的意义。本文综述了果蔬中链格孢霉毒素种类及危害、样品前处理技术和检测方法,重点介绍了高效液相色谱(HPLC).液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)和QuEChERS、分散液液微萃取在链格孢霉毒素检测中的应用。结合QuEChERS和分散液液微蒂取两种前处理方法,本文建立了三种测定柑橘类水果和果汁产品中链格孢霉毒素的分析方法,结果令人满意,并用于大量实际样品的检测。具体研究内容和结果如下：(1)建立了同时检测柑橘中链格孢酚甲基乙醚、链格孢酚、腾毒素和桔青霉素等4种真菌毒素的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。待测样品经乙腈提取,无水MgSO4和NaCl脱水盐析,C18键合相分散萃取净化,以ACQUITYUPLCBEHC18液相色谱柱为分离柱,以0.1%甲酸水溶液和乙腈作为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源电离、多反应监测(MRM)模式下进行测定,外标法定量。该方法在5.0～200μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.9927,检出限为0.2～0.7μg/kg.3个不同加标水平的平均回收率为78.0%-103.3%,相对标准偏差为2.6%-10.6%。实验结果表明,该方法快速、准确、灵敏,适用于柑橘中4种真菌毒素残留的快速确证检测。(2)建立了同时检测不同果汁(橙汁、苹果汁、梨汁、葡萄汁、桃汁)中3种链格孢霉毒素(链格孢酚、链格孢酚甲基乙醚、腾毒素)的分散液液微苯取-超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)分析方法。对影响分散液液微萃取萃取效率的分散剂和萃取剂类型及用量、萃取时间、盐浓度等多种因素进行了优化。在最佳条件下,其理论富集倍数为50倍。在一定浓度范围内线性关系良好,其相关系数(R2)均大于0.9943,检出限(S/N=3)为1.0-3.0μg/kg.2个不同加标水平的平均回收率为69.8%～110.5%,相对标准偏差为2.7%-9.4%。实验结果表明,该方法简单、快速、廉价,适用于果汁样品中3种链格孢霉毒素快速确证检测。(3)建立了同时检测不同果汁(橙汁、苹果汁、梨汁、葡萄汁、桃汁)中3种链格孢霉毒素的QuEChERS-分散液液微萃取-超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)分析方法。待测样品经乙腈提取,无水MgSO4和NaCl脱水盐析,C18键合相分散萃取净化。将QuEChERS前处理方法得到的萃取液作为DLLME分散剂,氯仿作为萃取剂。在最佳条件下,其理论富集倍数为10倍。在一定浓度范围内线性关系良好,·其相关系数(R2)均大于0.9969,检出限(S/N=3)为3.0-10.0μg/kg,两个不同加标水平的平均回收率为78.4%-106.0%,相对标准偏差为1.9%-9.2%。实验结果表明,该方法净化效果好,13min内即可完成果汁中3种链格孢霉毒素的检测分析。
【作者】史文景；
【导师】焦必宁；
【作者基本信息】西南大学，果树学，2014，硕士
【关键词】QuEChERS；分散液液微萃取；柑橘；果汁；真菌毒素；链格孢霉毒素；超高效液相色谱-串联质谱；二极管阵列检测器；

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