中药当归丙酮提取物抗菌活性及成分鉴定

【摘要】采用丙酮加热回流法对中药当归(Angelicasinensis(Oliv.)Diels)进行提取,并对丙酮提取物的抗菌机制进行了初步的探讨以及活性成分研究。采用微量肉汤稀释法对当归的丙酮提取物进行抗菌活性的测定,并通过电镜扫描法观察丙酮提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的形态变化及比色法观察丙酮提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌脱氢酶的活性变化来研究药物的抗菌机制,最后采用微量肉汤稀释法测定了极性部位的最低抑菌浓度(MIC)值。从实验结果可以看出,当归的丙酮提取物对测试菌具有抗菌作用,其中铜绿假单胞菌和大肠埃希菌的MIC值为2500μg·mL-1,其他测试菌株的MIC值均为1250μg·mL-1。由扫描电镜实验结果可以看出阴性对照组的测试菌细胞形态完整、均匀、表面光滑、无缺陷。而实验组明显可见测试菌变形,失去原有形态；大部分测试菌细胞壁和细胞膜破裂,内容物外溢。由脱氢酶实验可以看出该提取物对2种测试菌的脱氢酶均有明显的抑制作用,即随着药物浓度的增加,脱氢酶的活性逐渐减弱。大肠杆菌脱氢酶对药物更加敏感,脱氢酶活性下降程度明显大于金黄色葡萄球菌。从极性部位的抗菌结果可以看出石油醚萃取物抗菌作用最强,对6种测试菌的MIC值除无乳链球菌为1250μg·mL-1外,其余测试菌均为625μg·mL-1,乙酸乙酯萃取物除对铜绿假单胞菌无活性外,其余测试菌均为1250μg·mL-1.各测试菌对2500μg·mL-1的正丁醇和水萃取物都不具有活性。利用硅胶和SephadexLH-20柱层析,并结合薄层色谱检识,从当归石油醚萃取物的活性组分中分离出14个化合物,通过1H-NMR、13C-NMR和ESI-MS等现代波谱技术鉴定了其中的6个化合物的结构,分别是Z-6,7-二羟基藁本内酯(1)、β-谷甾醇(2)、胡萝卜苷(3)、十四烷酸(4)、(3S)-丁基苯酞(5)、阿魏酸松柏酯(6)。部分化合物的结构鉴定和所有单体化合物的活性测定将在后续工作中进行。
【作者】张金霞；
【导师】马建苹；
【作者基本信息】兰州理工大学，微生物与生化药学，2014，硕士
【关键词】当归；抗菌活性；作用机制；化学成分；

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