趋化因子受体CXCR4和CXCR7在食管癌中的表达及其作用

趋化因子受体CXCR4和CXCR7在食管癌中的表达及其作用

作者:师大云端图书馆 时间:2015-12-02 分类:期刊论文 喜欢:4488
师大云端图书馆

【摘要】CXCR4和CXCR7对人食管癌细胞系生物学行为的影响目的:研究趋化因子受体CXCR4和CXCR7在人食管癌细胞系中的表达水平并探讨其在食管癌增殖、侵袭及凋亡中的作用及机制。方法:应用定量real-timePCR(qRT-PCR)、Westernblot和流式细胞检测技术等方法检测人食管癌Eca109细胞、CaEs-17细胞中CXCR4和CXCR7的表达水平,并使用永生化人食管上皮细胞(HEEC)作为对照;采用慢病毒介导的RNA干扰技术分别转染CXCR4和CXCR7表达水平相对较高的人食管癌Eca109细胞系,获得CXCR4和CXCR7表达下调的Eca109/shCXCR4和Eca109/shCXCR7细胞系;研究下调CXCR4和CXCR7的表达水平后对人食管癌Eca109细胞增殖、侵袭和凋亡等生物学特性的影响,并探讨其相关作用机制。结果:与HEEC细胞相比较,人食管癌Eca109细胞和CaEs-17细胞中均存在CXCR4和CXCR7表达上调现象且表达水平有差异;将CXCR4和CXCR7基因表达水平分别下调后,CCK-8实验结果显示,人食管癌Eca109细胞的增殖能力明显降低;Transwell小室实验结果显示,人食管癌Eca109细胞的侵袭能力显著下降;而使用流式细胞检测技术对Eca109细胞凋亡和细胞周期分布进行检测后发现,CXCR4和CXCR7基因表达水平的变化对细胞的凋亡和周期分布没有影响;Westernblot结果显示,下调CXCR4和CXCR7的表达水平可以抑制RhoA、Rac-1和Cdc42蛋白的表达,同时抑制Akt和ERK蛋白的磷酸化活化;使用CXCL12刺激人食管癌Eca109细胞并再次行Westernblot检测上述蛋白的表达水平,结果显示,下调CXCR4和CXCR7表达水平后可明显抑制上述蛋白的上调;用Akt和MEK信号通路抑制剂阻断相关信号通路后行Westernblot发现,RhoA、Rac-1和Cdc42蛋白的表达水平是随Akt蛋白磷酸化活化水平的增加而增加的。结论:CXCR4和CXCR7在人食管癌细胞系中存在表达上调现象。下调CXCR4和CXCR7基因可以抑制食管癌Eca109细胞的增殖和侵袭能力,而对细胞凋亡及细胞周期没有影响。下调CXCR4和CXCR7基因表达水平后,可明显抑制CXCL12对Eca109细胞的趋化反应,这种抑制作用可能是通过PI3K/Akt信号通路下调RhoA、Rac-1和Cdc42蛋白的表达水平而实现的。CXCR4和CXCR7基因沉默对人食管癌Eca109细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响目的:研究人食管癌Eca109细胞的CXCR4和CXCR7基因下调后,对其在裸鼠皮下接种移植瘤生长的影响。方法:应用慢病毒稳转法构建Eca109/shCXCR4细胞、Eca109/shCXCR7细胞和Eca109/shCtl细胞,建立人食管癌裸鼠皮下移植瘤模型;观察比较CXCR4和CXCR7基因下调对移植瘤生长曲线的影响;用免疫组织化学染色法(CD34)标记移植瘤内新生血管,计数MVD,比较下调CXCR4和CXCR7基因对移植瘤血管形成的影响;采用Westernblot法比较移植瘤内CXCL12水平的变化。结果:下调CXCR4和CXCR7基因后人食管癌Eca109细胞裸鼠皮下移植瘤的生长速度明显变慢,且体积明显变小;下调CXCR4和CXCR7基因后,移植瘤内MVD明显低于对照组及野生细胞组所成移植瘤内MVD;移植瘤中CXCL12的表达水平亦随CXCR4和CXCR7表达水平的下调而下调。结论:CXCR4和CXCR7基因沉默后能抑制食管癌的生长,其对肿瘤生长的抑制作用可能是通过抑制肿瘤血管形成和抑制CXCL12的分泌而实现的。CXCR7在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义目的:探讨CXCR7在人食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:选择154例胸段食管鳞状细胞癌标本,49例正常食管鳞状上皮组织标本:肿利用免疫组织化学染色方法检测食管癌组织及正常食管鳞形上皮组织中CXCR7蛋白的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果:正常食管鳞状上皮组织中的CXCR7蛋白阳性表达率为6.1%(4/49)肿瘤组织中的CXCR7阳性表达率为76.0%(116/154);T1期CXCR7的阳性表达率为50.0%(6/12),T2期为63.4%(26/41),T3期为82.1%(78/95),T4期为100.0%(6/6),差异有统计学意义(p=0.009);无淋巴结转移者CXCR7的阳性表达率为63.7%(58/91),淋巴结转移<3个者CXCR7的阳性表达率为90.9%(40/44),淋巴结转移数>3个者的阳性表达率为94.7%(18/19),差异有统计学意义(p<0.001);pTNM分期Ⅰ期者CXCR7阳性表达率为41.7%(7/12),Ⅱ期者69.8%(60/86),Ⅲ期者92.3%(48/52),Ⅳ期者75.0%(3/4)差异有统计学意义(p<0.001)。单因素分析显示,患者的性别(p=0.030)、年龄(p=0.049)、肿瘤的浸润深度(p<0.001)、淋巴结转移情况(p<0.001),患者的pTNM分期(p<0.001)及CXCR7的表达情况(p<0.001)与患者的预后相关;多因素分析显示肿瘤浸pTNM分期(p=0.017)和CXCR7表达情况(p=0.006)是食管鳞状细胞癌患者生存的独立预后因素。结论:CXCR7蛋白的表达水平与食管鳞状细胞癌患者的复发、转移及预后密切相关,推测CXCR7表达上调可能是食管鳞状细胞癌患者的潜在不良预后因素。
【作者】郭晶;
【导师】王春生;
【作者基本信息】复旦大学,心胸外科学(专业学位),2013,博士
【关键词】食管癌;趋化因子受体4;趋化因子受体7;RNA干扰;侵袭;裸鼠;CD34;皮下移植瘤;食管鳞状细胞癌;肿瘤转移;复发;预后;

【参考文献】
[1]吴晓娟.中国高速铁路建设筹资渠道研究[D].北京交通大学,2010.
[2]王黎明.四氧化三钴纳米材料的制备及其电化学性能研究[D].华中科技大学,光学工程,2013,硕士.
[3]王存涛.不同缓冲层对坡莫合金薄膜的各向异性磁电阻的影响[D].山东师范大学,光学,2013,硕士.
[4]孙强.LYSD公司人力资源绩效管理体系研究[D].西北大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[5]蒋开宇.不锈钢表面渗钨改性研究[D].大连海事大学,载运工具运用工程,2013,硕士.
[6]季士妍.流通型林业企业管理信息系统分析与设计[D].北京林业大学,2005.
[7]王顺萍.中职学生自我管理能力培养的研究[D].鲁东大学,教育管理(专业学位),2013,硕士.
[8]高云庆.创新型教师素质与成长研究[D].西北师范大学,教育,2003,硕士.
[9]袁克.政府完善微博问政的对策研究[D].吉林大学,行政管理,2013,硕士.
[10]龙再浩.甘氨酸位点NMDA受体拮抗剂MRZ2/576对吗啡诱导小鼠的奖赏效应和运动活性影响的研究[D].浙江大学,卫生毒理学,2004,硕士.
[11]沈新建,李智栽.突破高校后勤社会化改革窘境的博弈分析及走向[J].高校后勤研究.2007(05)
[12]莫甲凤.创新人才培养特区在中国大学的“合法化”进程——基于组织理论的新制度主义分析[J].高教探索,2014,05:12-16.
[13]孙艳艳.浅谈音乐表演者应具备的几个心理素养[D].南京艺术学院,2004,硕士.
[14]朱昌锋.铁路大型客运站到发线分配耦合优化及时域调整研究[D].兰州交通大学,交通运输规划与管理,2014,博士.
[15]尹伟.网络传播中马克思主义大众化问题研究[D].渤海大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[16]何蓓.皮层脑电图监测下外科治疗继发性癫痫[D].兰州大学,外科学,2014,硕士.
[17]田粉宁.新升本院校英语教师专业发展状况实证研究[D].西安外国语大学,课程与教学论,2013,硕士.
[18]梁快,隆克平,汪纪锋,陈前斌,李云.一种新IP寻呼机制[J].重庆邮电学院学报(自然科学版),2004,06:21-25.
[19]任平平.中国共产党抗灾救灾思想与实践研究[D].扬州大学,马克思主义中国化研究,2012,硕士.
[20]闭翠珍.一族两国背景下民族文化发展研究[D].贵州民族大学,民族学,2012,硕士.
[21]廖蓓.煤矿废弃地生态恢复与景观设计研究[D].上海大学,设计艺术学,2013,硕士.
[22]张海江.可逆性后部白质脑病综合征(RPLS)137例临床诊疗分析[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[23]周必彧,周礼.产业集群不同发展阶段的竞争力提升对策研究:以浙江为例[J].浙江工业大学学报(社会科学版),2014,02:159-164.
[24]孔珊珊.诱惑侦查的正当性保障机制研究[D].南京师范大学,法律,2012,硕士.
[25]胡璟.我国上市企业融资租赁影响因素研究[D].华中科技大学,资产评估,2013,硕士.
[26]武彦斌.模具CAPP中工艺数据管理和工艺生成方法的研究[D].大连理工大学,机械制造及其自动化,2004,硕士.
[27]孙丽莉.金融数据的极端风险度量及应用[D].重庆大学,概率论与数理统计,2014,硕士.
[28]梁超.中文类比检索方法研究[D].华东师范大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[29]孙一苇.隔代教养下农村留守儿童成长现状研究[D].长春工业大学,社会学,2013,硕士.
[30]陈德庚.基于数据挖掘的移动网络分析[D].清华大学,2004.
[31]樊春光.高速铣削铝合金7475加工表面形貌研究[D].哈尔滨理工大学,机械制造及其自动化,2012,硕士.
[32]李凌月.空气重介质流化床干燥与分选过程研究[D].中国矿业大学(北京),矿物加工工程,2014,博士.
[33]赵宏飞.计量装置动态监测及线损分析的研究[D].华北电力大学(河北),电气工程,2004,硕士.
[34]李佳桐1,刘忠奎2,杨晓冬1.房地产价格与区域经济的互动性研究[J].工程管理学报,2014,06:.
[35]王东明.粮食主产区农户耕地流转行为的影响因素研究[D].西南大学,区域经济学,2014,硕士.
[36]程鹏.基于人因工程学的医疗设备维修差错分析研究[D].华中科技大学,生物医学工程,2013,硕士.
[37]马改霞.我国上市商业银行市场风险的压力测试研究[D].山西财经大学,金融学,2013,硕士.
[38]丁生晨.重组灵芝免疫调节蛋白对帕金森病模型小鼠的作用及其机制研究[D].吉林大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[39]沈贵.中国木材工业的历史性转折[J].林产工业.2004(01)
[40]高娟娟.省际边缘区城镇化发展动力研究[D].东北师范大学,人文地理,2012,硕士.
[41]黄想弟.英语分词复合词中-ing分词和-ed分词选择的认知研究[D].湖南师范大学,英语语言文学,2014,硕士.
[42]朱志清.基于飞秒激光烧蚀硅表面形成的拉曼散射增强衬底研究[D].南京大学,光学,2013,硕士.
[43]殷毅.MAO-ZK60镁合金松质骨螺钉生物安全性和降解规律的体内实验研究[D].中国人民解放军医学院,外科学,2013,硕士.
[44]林俐.伦理型领导与员工建言行为影响研究[D].厦门大学,企业管理,2014,硕士.
[45]刘亚琼.济南市锦绣川河道治理项目实施阶段业主风险管理研究[D].山东大学,水利工程(专业学位),2013,硕士.
[46]龚嫚.船舶柴油机运行状态监控系统的开发与研究[D].江苏科技大学,船舶与海洋工程(专业学位),2014,硕士.
[47]杨石焕.基于支持向量机的手势识别研究[D].燕山大学,电路与系统,2014,硕士.
[48]高松,赵谡玲,徐征,杨一帆,刘志民,谢小漪.氧化锌纳米颗粒薄膜的近紫外电致发光特性研究[J].物理学报,2014,15:382-388.
[49]李生福.并行机抹带功能的实现[J].石油地球物理勘探,1991,03:281.
[50]邹品.基于微环的集成波导微波光子滤波器研究[D].大连理工大学,光学工程,2013,硕士.

相关推荐
更多