白鲜碱对淋巴细胞诱导HaCaT细胞凋亡的影响
【摘要】目的:本研究在前期研究的基础上,探讨白鲜皮的活性成分白鲜碱对慢性湿疹患者外周血淋巴细胞诱导HaCaT细胞凋亡的干预作用,客观评价白鲜碱治疗湿疹的作用机制,为进一步研究白鲜皮及其活性成分提供理论基础和实验依据。方法:采用MTT法检测不同浓度、不同时间的白鲜碱对HaCaT细胞增殖的影响。用人淋巴细胞分离液经密度梯度离心法分离慢性湿疹患者外周血淋巴细胞,将淋巴细胞与HaCaT细胞以3:1的比例共培养72h建立共培养模型,AnnexinV/PI双染法检测HaCaT细胞的凋亡,白鲜碱在不影响HaCaT细胞活力的浓度下干预共培养模型,利用AnnexinV/PI双染法和TUNEL法检测HaCaT细胞的凋亡率。结果:MTT检测结果显示,与正常组相比白鲜碱在23μg/mL浓度时HaCaT细胞增殖被显著抑制,且随药物浓度的增大其作用明显增强,具有剂量依赖性;白鲜碱对HaCaT细胞的抑制作用72h时抑制作用最强。白鲜碱在11.5μg/mL及以下浓度时对HaCaT细胞生长无明显抑制作用,AnnexinV/PI双染法和TUNEL法检测结果显示,白鲜碱对淋巴细胞诱导HaCaT细胞凋亡均有抑制作用,且随着浓度的增加,其抑制率明显升高,提示其抑制作用与白鲜碱呈剂量依赖性。结论:慢性湿疹患者外周血淋巴细胞可以引起HaCaT细胞的凋亡。白鲜碱在不影响HaCaT细胞活力的浓度下,对淋巴细胞诱导HaCaT细胞凋亡具有抑制作用且与白鲜碱浓度呈剂量依赖性。
【作者】王建茹;
【导师】杨志波;
【作者基本信息】湖南中医药大学,中医外科学,2014,硕士
【关键词】白鲜皮;白鲜碱;细胞凋亡;慢性湿疹;实验研究;
【参考文献】
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