特发性膜性肾病患者肾组织中SOD2的表达及意义

【摘要】目的：膜性肾病（membranousnephropathy,MN）是成年人肾病综合征(nephroticsyndrome,NS)最常见的病理类型之一。据统计，成年人中约75%的病例主要为特发性膜性肾病(idiopathicmembranousnephropathy,IMN)，而25%的病例则继发于各种各样的原因，包括肿瘤、感染、自身免疫疾病、代谢性疾病以及药物、毒物损害等。1/4-1/3IMN患者可完全或部分自发缓解，大量蛋白尿的患者,自发缓解率可占到20%左右，其余患者会缓慢进展至终末期肾脏病，或在5-16年后死于并发症及其他疾病。近年来，IMN的发病率呈逐年上升趋势，但其具体发病机制的研究仍不是很透彻，普遍认为是机体针对肾脏足细胞产生特异性IgG4抗体，形成上皮下免疫复合物而致病。因此明确IMN的发病机制有重要意义，将对疾病的诊断和治疗提供新的帮助。锰超氧化物歧化酶（manganesesuperoxidedismutase,SOD2）是广泛的抗氧化细胞保护系统的重要组成部分，是一种抗氧化金属酶，可将毒性的超氧化物阴离子转化为过氧化氢和双原子氧，在机体氧化与抗氧化平衡中起到至关重要的作用。当机体在遭受各种有害刺激时，体内高活性分子产生过多，氧化系统和抗氧化系统失衡，使机体处于氧化应激（oxidativestress,OS）状态。OS与很多疾病包括肾脏疾病的发生、发展密不可分。OS状态时，SOD2表达增加，这可以降低OS对组织造成的损伤。OS损伤的标志物多种多样，其中8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG）是DNA损害的敏感标志物。在疾病或某些外源性物质刺激下活性氧类(ReactiveOxygenSpecies,ROS)快速释放并在体内过度蓄积，致OS超出机体抗氧化能力而造成DNA的氧化损伤。另有研究发现，IMN患者肾组织中的SOD2可能作为足细胞的特异性抗原，参与IMN的发病过程，促进IMN的进展。因此研究SOD2在IMN患者肾组织中表达是很有必要的。本课题旨在研究SOD2在IMN患者肾组织内表达及意义，及其与IgG4表达部位的联系，并检测患者血、尿标本中8-OHdG的表达水平，探讨OS在IMN发病中的作用，进一步揭示IMN的发病机制，为指导临床治疗和观察预后提供依据。方法：病例来源于2013年6月至2013年12月河北医科大学第三医院肾内科病房诊治的41例IMN住院患者，所有患者均为首次经肾穿刺活检病理检查确诊者。收集首次经肾穿刺活检病理检查确诊的继发性膜性肾病（SecondaryMembranousNephropathy,SMN）住院患者13例和微小病变性肾病(minimalchangedisease,MCD)住院患者6例为对照组。应用免疫组织化学方法检测IMN组、SMN组和MCD组患者肾组织中SOD2及IgG4的表达部位，结果通过图像分析系统（Image-ProPlus,IPP）进行半定量分析。同时收集IMN组、SMN组和MCD组患者晨起的血液及尿液标本，应用ELISA定量方法检测血液及尿液标本中8-OHdG的表达水平，并探讨SOD2与8-OHdG表达的相关性。应用SPSS17.0统计学软件对实验数据进行统计学处理，P＜0.05时差异有统计学意义，计量资料用均数±标准差(x±s)表示，计数资料采用率或构成比表示。正态分布资料多组间均数比较采用方差分析，多重比较采用SNK-q检验。相关性检验采用直线相关分析。结果：SOD2在IMN组、SMN组和MCD组患者肾组织肾小管上皮细胞均有表达，表达无明显差异；SOD2在SMN组、MCD组患者肾组织肾小球中未见表达；SOD2在IMN组患者肾组织肾小球基底膜、足细胞和上皮下均有一定表达。IMN组患者肾组织肾小球内SOD2的表达较SMN组、MCD组均显著增强（P<0.01）。IgG4在SMN组、MCD组患者肾组织中未见表达；IgG4在大部分IMN组患者肾组织肾小球基底膜及上皮下有表达。IMN组与SMN组、MCD组比较，肾小球内IgG4表达明显增强（P<0.01）。IMN患者肾小球内SOD2的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关（r=-0.354，P=0.023，P<0.05）；IgG4的表达与24小时尿蛋白定量呈正相关（r=0.361，P=0.021，P<0.05）。IMN组、SMN组患者血、尿标本中8-OHdG表达水平较MCD组升高（P<0.05）；IMN组与SMN组相比差异无统计学意义（P>0.05）。结论：①8-OHdG在IMN患者血液及尿液标本中表达水平升高，证实IMN发病过程中存在DNA的氧化损伤，提示OS参与了IMN的发生和发展。②SOD2在IMN肾组织中表达增高，且与24小时尿蛋白定量呈负相关，提示SOD2作为抗氧化金属酶，在肾脏OS时对机体起保护作用，降低尿蛋白的产生。但SOD2与IgG4均在IMN肾小球上皮下沉积，推测SOD2可能作为足细胞致病抗原参与IMN的发病过程。③SOD2在IMN和SMN中表达不同，提示IMN与SMN的发病机制不同。
【作者】王斯；
【导师】刘茂东；
【作者基本信息】河北医科大学，内科学（专业学位），2014，硕士
【关键词】特发性膜性肾病；发病机制；免疫复合物；锰超氧化物歧化酶；8-羟基脱氧鸟苷；氧化应激；肾组织；抗原；

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