不同香烟烟雾暴露时间对大鼠肺组织树突状细胞数量的影响
【摘要】目的:吸烟是影响健康的一个重要因素,可显著增加呼吸、心血管系统疾病、肿瘤的发病率。根据我国流行病学调查数据显示:我国每年死于吸烟相关性疾病的人数近100万,给社会带来严重的经济负担。通过研究不同香烟烟雾暴露持续时间对大鼠肺组织CD11c和S100双标记阳性树突状细胞数量的影响,探讨树突状细胞在香烟烟雾暴露所致早期肺组织免疫反应中的变化,为呼吸系统吸烟相关性疾病发生、发展机制提供免疫学理论依据。方法:清洁级雄性Wistar大鼠50只(体重150±20g),购买于河北医科大学动物实验中心(动物合格证号1309071),饲养于河北省人民医院临床试验中心实验动物房,动物饲养环境符合中国实验动物清洁级动物饲养标准。将50雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、香烟烟雾暴露4周组、香烟烟雾暴露8周组、香烟烟雾暴露12周组、香烟烟雾暴露8周戒烟8周组,每组10只。参照许三林等自制实验性大鼠香烟烟雾暴露装置,香烟烟雾暴露装置为有机玻璃箱(70cm×60cm×40cm)。香烟烟雾暴露组每天香烟烟雾暴露2次(上、下午各一次,两次香烟烟雾暴露时间间隔至少6小时以上),每次吸烟15支,持续时间约2小时。香烟烟雾暴露组吸烟4、8、12周后给予3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,腹主动脉放血处死后取右肺中叶,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,病理观察并免疫组化法测定肺组织CD11c和S100双标记阳性树突状细胞表达的变化。结果:1一般情况改变:香烟烟雾暴露组大鼠香烟烟雾暴露2周后开始出现倦怠、毛发失去光泽、咳嗽、呼吸道分泌物增多;第4周时,大部分大鼠在香烟烟雾暴露时表现为烦燥,具体体现为乱跑、撞击箱子、大鼠间相互撕咬。2肺组织形态的变化:肺组织HE染色:空白对照组大鼠肺组织结构正常,肺组织未见炎性细胞浸润,肺泡壁结构完整。香烟烟雾暴露组及戒烟组大鼠肺组织存在不同程度的纤毛上皮脱落,管壁周围炎性细胞浸润,血管周围炎性细胞渗出明显。随着香烟烟雾暴露时间的延长,纤毛上皮脱落越严重,管壁周围炎性细胞浸润越明显,香烟烟雾暴露12周组大鼠部分肺组织呼吸性细支气管囊状扩张,肺泡壁变薄或断裂,肺泡相互融合成肺大泡等肺气肿特征性病理改变。香烟烟雾暴露8周戒烟8周组大鼠肺组织,管壁周围仍有炎性细胞浸润,但较香烟烟雾暴露8周组减少,周围血管未见明显炎性细胞渗出。3肺组织树突状细胞CD11c蛋白免疫组织化学结果比较:CD11c阳性树突状细胞在支气管管壁、炎症区域、血管周围分布明显。香烟烟雾暴露4周组CD11c阳性树突状细胞(10.12±0.82)、香烟烟雾暴露8周组CD11c蛋白阳性树突状细胞(13.51±0.97)、香烟烟雾暴露12周组CD11c蛋白阳性树突状细胞(14.63±1.09)、香烟烟雾暴露8周戒烟8周组CD11c蛋白阳性树突状细胞(12.03±1.39)均比空白对照组CD11c蛋白阳性树突状细胞(8.56±0.87)水平表达升高,香烟烟雾暴露12周组升高最明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。香烟烟雾暴露12周组CD11c蛋白阳性树突状细胞表达明显高于香烟烟雾暴露4周组,香烟烟雾暴露8周戒烟8周组与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。4肺组织树突状细胞S100蛋白免疫组织化学结果比较:S100阳性树突状细胞在支气管管壁、炎症区域血管周围分布明显。香烟烟雾暴露4周组S100蛋白阳性树突状细胞(10.32±1.08)、香烟烟雾暴露8周组S100蛋白阳性树突状细胞(12.54±1.25)、香烟烟雾暴露12周组S100蛋白阳性树突状细胞(14.23±1.65)、香烟烟雾暴露8周戒烟8周组S100蛋白阳性树突状细胞(13.01±2.09)与空白对照组S100蛋白阳性树突状细胞(8.38±0.84)水平相比,表达明显升高,香烟烟雾暴露12周组升高最明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。香烟烟雾暴露12周组S100蛋白阳性树突状细胞表达明显高于香烟烟雾暴露4周组,香烟烟雾暴露8周戒烟8周组与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1香烟烟雾暴露可以导致大鼠肺组织炎性改变,随着香烟烟雾暴露时间的延长,大鼠肺组织炎性改变越明显,逐渐出现肺气肿改变。2香烟烟雾暴露可以导致大鼠肺组织树突状细胞数量的增加。随着香烟烟雾暴露的延长,大鼠肺组织树突状细胞数量增多越明显,炎症区域可见大量树突状细胞聚集,炎症区域血管周围可见大量树突状细胞分布,提示树突状细胞可能从血液中募集而来。3戒烟后肺组织炎症细胞减少,树突状细胞数量有所减少。戒烟不能逆转大鼠肺组织慢性炎性改变,但可减缓炎性改变过程。
【作者】马铮;
【导师】平芬;
【作者基本信息】河北医科大学,内科学,2014,硕士
【关键词】香烟烟雾暴露;树突状细胞;炎性改变;肺组织;大鼠;
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