芥子中MITC体外抗白血病细胞的效应研究

【摘要】目的：自然界植物是一个巨大的资源宝库,从天然植物中寻找抗癌有效成分是发展战略重点之一。海南十字花科蔬菜芥菜里含有丰富的异硫氰酸酯,异硫氰酸酯的提取和活性研究一直被人关注。本文筛选芥菜种子中异硫氰酸酯对慢性骨髓性白血病细胞k562增殖抑制效果较好的成分,并研究其抑制慢性骨髓性白血病细胞k562增殖的作用机制。方法：从异硫氰酸酯3-(甲硫基)苯基异硫氰酸酯、3-氰基苯基异硫氰酸酯、4-氰基苯基异硫氰酸酯、甲代烯丙基异硫氰酸酯(methlallylisothiocyanate,MITC)中,采用MTT比色法筛选对慢性骨髓性白血病细胞k562增殖抑制效果较好的成分。MTT、细胞集落形成实验和细胞生长率评价MITC体外对慢性骨髓性白血病细胞k562增殖抑制效应,采用细胞形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、细胞凋亡率检测和细胞周期分析探究MITC作用慢性骨髓性白血病细胞k562机理。结果：筛选得到对慢性骨髓性白血病细胞k562增殖抑制效果较好的成分为MITC。MTT、细胞集落形成和细胞生长率测定实验综合判断MITC体外抑制白血病细胞增殖效果,MITC作用慢性骨髓性白血病细胞k56224h、48h、72h、96h、120h的半数有效抑制浓度(IC50)分别为250.0、100.5、39.0、54.7、88.7μM,72h时的IC50为39.0μM<100μM,最高的抑制率达83.8±0.5%。MITC对慢性骨髓性白血病细胞k562和人胚肾细胞293T的增殖抑制作用具有选择性,对人胚肾细胞293T的抑制率小于慢性骨髓性白血病细胞k562。瑞式-姬姆萨染色、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和罗丹明123染色观察显示MITC作用慢性骨髓性白血病细胞k562出现细胞皱缩,细胞核固缩凹陷,线粒体膜电位降低。琼脂糖凝胶电泳中慢性骨髓性白血病细胞k562的DNA未出现梯状条带。流式细胞术测凋亡率显示MITC未诱导慢性骨髓性白血病细胞k562凋亡,流式细胞术测细胞周期显示MITC将慢性骨髓性白血病细胞k562阻滞在G2期。结论：MITC对慢性骨髓性白血病细胞k562具有增殖抑制效果。根据琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术凋亡率检测,MITC未诱导慢性骨髓性白血病细胞k562凋亡。流式细胞仪检测细胞周期显示MITC诱导了慢性骨髓性白血病细胞k562G2期阻滞。
【作者】侯杰；
【导师】曹献英；
【作者基本信息】海南大学，生物化工，2014，硕士
【关键词】甲代烯丙基异硫氰酸酯；慢性骨髓性白血病细胞k562；芥菜种子；

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