ABA对木薯块根淀粉累积影响机制初探
【摘要】木薯是全球重要的粮食作物,也是工业淀粉生产和燃料乙醇的原料,木薯具有高生物量、抗旱耐贫瘠和优良的淀粉品质等生物学特性,因而木薯的高淀粉和抗逆性强等特点使其成为应对粮食与能源危机的一个重要作物。目前对木薯的这些重要生物学特性的分子机制研究尚十分有限。已有研究表明木薯ABA在其高淀粉产量和抗旱中具有重要的作用,但是相关研究基本是空白。深入了解ABA的合成与分解,以及ABA信号如何调控木薯光合产物积累的生物学过程对于挖掘木薯高生物量机制,并进而推动木薯产量与品质的遗传改良,具有十分重要的作用。本研究选择木薯高产栽培品种SC124和产量中等而淀粉率较高的Arg7为试验材料,在盆栽条件下以ABA和ABA抑制剂钨酸钠处理处于块根形成期(60D)的木薯植株,先后处理3次,在第一次处理后2-48h采集了叶片样品,测定了其内源ABA和其它三类激素含量,并提取RNA样品,用于跟踪主要相关基因的表达水平变化,同时采集了对照品种的叶片样品;在间隔10天,处理3次后,收获了处理和对照的植株,调查了其地上部重量、块根种以及块根数量与径粗度,最后监测了ABA合成与钝化、ABA受体以及淀粉合成途径相关基因的表达水平变化。获得的主要结果如下:1、在预实验中确定了施用ABA和ABA抑制剂钨酸钠的浓度上限分别为10mg/L和2000mg/L,及超过该浓度,选择的指标基因表达将受到抑制;在试验中发现,外源ABA的施用导致了ABA合成以及受体基因PYL等的关联表达,并且淀粉合成上游基因如SUSY随着ABA浓度的变化呈正相关。2、外源ABA处理影响木薯的生长发育及生物积累效果:通过ABA和ABA抑制剂处理的盆栽表型试验,初步证明干扰木薯ABA水平对植株生长发育产生了不同程度的影响,总的趋势是有可能增加块根和地上部生物量,但是还需要进一步在控制条件下增加试验证据。3、木薯体内的内源ABA的变化具有光信号调控的昼夜节律:从非处理条件下SC124与Arg7两个品种叶片内源激素变化的一致趋势证明,植株ABA水平受到光周期的明显调节,以中午以前较高,午后至夜晚低,次日遵循相同的规律。4、木薯体内自身存在一种维持ABA稳态水平的调节机制根据ABA和ABA抑制剂钨酸钠处理后木薯植株内源ABA含量变化,以及相关激素和ABA合成与钝化基因表达的变化,初步揭示木薯植株内部存在一种灵活的ABA调节机制,以促使ABA保持一个稳定的水平。表现在:①施用外源ABA以及钨酸钠之后,发现仅在2h,内源ABA含量降低,浓度低于对照,并且在4h-12h,ABA的含量总体趋势都是处于下降的状态。说明在2h以前,被吸收的外源ABA就已经开始降解,来维护植物内稳态。②与ABA含量变化的同时,其余与ABA具有拮抗作用的内源激素IAA与GA呈现相反的变化趋势。IAA和GA与ABA的拮抗作用之前已有报道,推测IAA与GA的拮抗作用可能也是木薯内源ABA平衡的一种方式。③在施用外源ABA或者ABA抑制剂钨酸钠后,ABA合成的主要基因ZEP、ALDO表达明显减低,而ABA钝化相关基因UTG则相应有所增强,虽然只在午夜12时ABA水平最低时较为明显,说明该基因受ABA反馈和光信号的双重调节。5、ABA积累与淀粉合成的关系现有试验尚不明确通过对非处理条件下和ABA处理下ABA信号受体基因及主要淀粉代谢基因的在叶片中的定量表达分析,没有证据表明存在一定的促进或者抑制方式。主要问题可能是木薯内部维持一个ABA平衡态,其作用强度不能够简单的用正效和负效应解说;此外我们的表达分析只用了叶片,而非淀粉积累器官,缺乏块根的基因表达信息和ABA等激素水平数据,需要进一步完善后方能够做出结论。
【作者】王淑娟;
【导师】王文泉;
【作者基本信息】海南大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士
【关键词】木薯;ABA;ABA抑制剂;基因表达;淀粉积累;
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