IgA肾病人腭扁桃体摘除前后外周血BAFF及IgA1低糖基化研究

【摘要】研究背景：IgA肾病以IgAl/低糖基化IgAl沉积于肾小球系膜区及毛细血管袢为病理特征,以血尿、蛋白尿、高血压及肾功能损害为主要临床表现,是世界范围内最常见的原发性肾小球疾病。大约20-40%的患者在诊断为IgA肾病的20年内进展至终末期肾功能衰竭,是导致终末期尿毒症的最常见原因。IgA肾病患者在黏膜组织,特别是上呼吸道和肠道黏膜感染后常出现阵发性肉眼血尿。既往也有研究IgA肾病患者在腭扁桃体摘除后出现一过性的尿检恶化,同时检测到血中IgAl一过性升高。即可以通过手术对腭扁桃体的牵拉、挤压等刺激,进行的腭扁桃体“激惹”试验。B淋巴细胞刺激因子(B-cell-activationfactor,BAFF),是肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)配体超家族的重要成员。BAFF通过对正常B细胞的成熟、增殖和分化的影响,对维持B淋巴细胞在体内的发展和体内的平衡起着重要的作用。但其临床应用还需要进一步的研究。IgA具有IgAl和IgA2两种亚型,近年的研究证实低糖基化IgAl是IgA肾病的关键致病因子。IgAl与IgA2的主要区别点在于IgAl存在铰链区。在IgAl铰链区,β1,3半乳糖转移酶(C1GALT1)在其特异性分子伴侣(COSMC)的辅助下,通过UDP-半乳糖载体将半乳糖转移至IgAl的p1,3位乙酰半乳糖胺残基上,完成IgAl的糖基化修饰,而ST6GalNAcⅡ则将唾液酸转至IgAl的α2,6位乙酰半乳糖胺残基上,阻止了IgAl糖基化的修饰。IgA肾病外周血B淋巴细胞C1GALT1及COSMC活性明显下降,并且与IgAl病理损伤严重程度呈正相关,但是其活性下降的具体机制尚未阐明。既往研究发现,外周血B淋巴细胞在无刺激时ST6GalNAcⅡmRNA的表达与正常对照组相比降低,另有研究发现IgAl分泌细胞在IL-4、IL-6的刺激下ST6GalNAcⅡmRNA显著升高。本课题中我们通过对IgA肾病患者以及对照组腭扁桃体摘除前后的研究,以腭扁桃体摘除术作为腭扁桃体“激惹”试验,观察腭扁桃体摘除前后外周血中的改变,分析其与外周血中B细胞活化、IgAl及其糖基化之间的关系,为IgA肾病的防治提供新的理论依据和治疗靶点。第一章IgA肾病患者腭扁桃体摘除前后外周血BAFF及IgAl比较目的：检测腭扁桃体摘除前后,外周血单个核细胞(PBMC)中BAFF以及血浆中IgAl表达,分析腭扁桃体与B细胞活化及IgAl之间的关系。方法：收集经临床和肾脏病理确诊为IgA肾病患者在腭扁桃体摘除术术前(24-48h)术后(36-60h)的外周血16例做为IgA肾病组(IgAN组),行腭扁桃体摘除术的非IgA肾病患者术前术后外周血作为非IgA肾病组(non-IgAN组),以及正常对照组(healthycontrol组)16例。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测BAFF在PBMC中mRNA的表达ELISA检测血浆中IgAl含量。结果：1.qRT-PCR结果提示IgA肾病患者术前BAFFmRNA表达水平高于正常对照组(P<0.01),IgA肾病患者术后BAFF表达较IgA肾病患者术前升高(P<0.01),并高于非IgA肾病患者术后(P<0.05)；2.IgA肾病患者术前外周血血浆中IgAl的含量高于正常对照组(P<0.05),IgA肾病患者术后血浆中IgAl的含量较术前升高(P<0.01),并高于非IgA肾病患者术后(P<0.05)；3.相关性分析提示PBMC中BAFFmRNA表达与外周血IgAl含量呈正相关(r=0.604,P<0.01)。结论：本章实验通过模拟腭扁桃体感染,观察到IgA肾病患者PBMC中BAFF基因表达增加,外周血血浆中IgAl含量升高与BAFF的关系密切,BAFF及其基因表达变化也有望成为一项评估患者IgA肾病病程变化的无创性检测指标。第二章ST6GaINAcⅡ、C1GALT1及COSMC在外周血单个核细胞表达及与IgAl低糖基化相关性分析目的：检测腭扁桃体摘除前后,PBMC中ST6GalNAcⅡ,C1GALT1及COSMC表达以及外周血血浆中IgAl的低糖基化水平,分析腭扁桃体对低糖基化IgAl影响及IgAl低糖基化的调控机制。方法：采用免疫组化方法检测IgA肾病患者与非IgA肾病患者腭扁桃体中ST6GalNAcⅡ的表达；采用qRT-PCR检测正常对照组、非IgA肾病组及IgA肾病组PBMCST6GalNAcⅡ、C1GALT1及COSMCmRNA的表达；VVL-ELISA检测外周血血浆中IgAl低糖基化水平。结果：1.免疫组化结果显示ST6GalNAcⅡ在IgA肾病患者腭扁桃体中表达量高于非IgA肾病患者；2.qRT-PCR结果提示IgA肾病患者术前ST6GalNAcⅡmRNA表达水平高于正常对照组(P<0.01),IgA肾病患者术后ST6GalNAcⅡmRNA水平均较IgA肾病患者术前升高(P<0.01),并高于非IgA肾病患者术后(P<0.05)。IgA肾病患者术后36-48小时间,ST6GalNAcⅡmRNA表达水平为术前的1.95倍(P<0.01)；术后48-60小时间,ST6GalNAcⅡmRNA表达水平为术前的1.38倍(P<0.01)。3.qRT-PCR结果提示IgA肾病患者术后C1GALT1、COSMCmRNA水平均较IgA肾病患者术前降低(P<0.05)；4.与正常对照组相比,IgA肾病组外周血血浆中的IgAl低糖基化程度明显增高；5.相关性分析提示PBMC中ST6GalNAcIImRNA表达与IgAl低糖基化水平呈正相关。结论：IgA肾病患者腭扁桃体摘除术后,PBMC中ST6GalNAcII基因表达增加,C1GALT1、COSMC基因表达减少,外周血血浆中Gd-IgAl含量升高,结合既往的研究,我们认为PBMC中ST6GalNAcII活性的增高及C1GALT1/COSMC活性的降低,导致了对外周血中低糖基化IgAl分泌的增多。
【作者】解莹馨；
【导师】彭佑铭；
【作者基本信息】中南大学，临床医学，2014，博士
【关键词】IgA肾病；腭扁桃体；BAFF；IgA1；低糖基化IgA1；ST6GalNAcⅡ；C1GALT1；COSMC；

【参考文献】
[1]雷强.自然灾害条件下列车运行径路调整优化[D].西南交通大学,交通运输规划与管理,2014,硕士.
[2]王磊.基于未确知测度的防空指挥自动化系统效能评估方法研究[D].电子科技大学,电子与通信工程（专业学位）,2012,硕士.
[3]张琦.基于Android的移动互联网终端安全态势感知技术研究[D].国防科学技术大学,计算机技术,2012,硕士.
[4]唐滢.碳关税对安徽省出口贸易的影响[D].安徽大学,国际商务,2014,硕士.
[5]冀元青.中国梦实现程度的评价体系与方法研究[D].中国社会科学院研究生院,数量经济学,2014,硕士.
[6]杨钟强.俄语词素义研究[D].辽宁大学,俄语语言文学,2012,硕士.
[7]张志彪.爆炸作用下钢板混凝土组合结构破坏规律研究[D].中国矿业大学,桥梁与隧道工程,2014,硕士.
[8]宋宜慧.先天性血管瘤激光治疗前后ICAM-1的表达及意义[D].桂林医学院,病理学与病理生理学,2012,硕士.
[9]崔炳堂.后危机时代新贸易保护主义对我国外贸的影响[D].山东财经大学,国际贸易学,2012,硕士.
[10]严欢,卢继平,覃俏云,张宜阳.基于多属性决策和支持向量机的风电功率非线性组合预测[J].电力系统自动化,2013,10:29-34.
[11]罗永峰.文本信息的空间化WebGIS应用研究[D].东北师范大学,2003.
[12]胡鸣颖.醌氧化还原酶-1的单核苷酸基因多态性与中国人冠心病的关联研究[D].浙江大学,内科学,2014,硕士.
[13]李响.中国就业性别差别待遇问题与对策研究[D].渤海大学,科学社会主义与国际共产主义运动,2013,硕士.
[14]石丽,王雪,吕莎莎,翁前锋.石墨烯修饰玻碳电极同时测定邻苯二酚和对苯二酚[J].广州化工,2013,10:97-99+106.
[15]唐菲菲.智能家居全景漫游界面可控点自动识别的研究[D].杭州电子科技大学,电路与系统,2013,硕士.
[16]孙银莉,刘永强.基于紧凑城市理念的城市边缘大型居住区规划[J].山西建筑,2014,34:24-25.
[17]赵明,倪天禄.利用系统试井资料求取异常高压油藏储层渗透率变化系数的方法[J].石油地球物理勘探,2006,S1:94-95+142+147-148.
[18]王坤峰,李镇江,汤淑明.基于多特征融合的视频交通数据采集方法[J].自动化学报,2011,03:322-330.
[19]BalageDonLakSrikantha.主动式真空蒸馏太阳能水净化装置设计与开发[D].重庆大学,机械工程（专业学位）,2014,硕士.
[20]刘洋.石家庄工商职业学院校园网安全设计[D].河北科技大学,计算机技术,2012,硕士.
[21]胡沛然,王宏志,李耀刚,张青红.静电纺制备ATO聚集状态可控的柔性导电材料及其性能研究[J].硅酸盐通报,2012,04:813-817+821.
[22]李晓晓.青春记忆的文化想象[D].山东师范大学,电影学,2013,硕士.
[23]金晓光.多中继协作OFDM系统子载波选择与功率分配算法研究[D].吉林大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[24]赵进军.组织蛋白酶S在类风湿关节炎中的作用[D].南方医科大学,内科学,2014,博士.
[25]王统.高中生英语阅读策略使用状况调查及训练[D].曲阜师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[26]金亦挺.基于双目视觉的角点检测与匹配研究及其在涂胶机器人中的应用[D].浙江工业大学,2012.
[27]黄维.人体肝脏温控射频消融仿真研究[D].重庆大学,生物医学工程,2014,硕士.
[28]高莺.《南方周末》2000-2012年性工作者媒介形象研究[D].苏州大学,新闻与传播（专业学位）,2013,硕士.
[29]江野军.基于新公共管理理论的义务教育发展研究[D].天津大学,公共管理,2004,硕士.
[30]刘坚.一个水稻花器官突变体的遗传分析与定位[D].杭州师范大学,遗传学,2007,硕士.
[31]曹淋淋.龟兹壁画菱形格图式研究[D].西南大学,美术学,2014,硕士.
[32]盘文豪.基于视频的明渠流量测量中目标捕获与跟踪的研究与实现[D].西安科技大学,计算机技术,2014,硕士.
[33]黄毅.融合人血清白蛋白的白介素1受体拮抗剂的药效学和药代动力学研究[D].湖北大学,微生物与生化药学,2012,硕士.
[34]李莹.对武野绍鸥的革新性的考察[D].北京外国语大学,日语语言文学,2013,硕士.
[35]齐璞.呼和浩特市推进城市一体化对策研究[D].内蒙古大学,公共管理,2014,硕士.
[36]李震.中学生交际策略训练报告[D].西北师范大学,教育,2003,硕士.
[37]丁国龙张颂赵大兴赵迪赵东雄.齿轮成形磨削砂轮廓形优化研究[J].中国机械工程,2015,06:.
[38]宋超.海上卫星动态定位精度检测技术研究[D].解放军信息工程大学,导航、制导与控制,2012,硕士.
[39]郑金虎.基于虚拟样机技术的汽车变速器结构设计方法研究[D].上海工程技术大学,车辆工程,2014,硕士.
[40]李玉玲.电子商务环境下顾客感知风险对关系质量的影响研究[D].中北大学,技术经济与管理,2014,硕士.
[41]祁慧.内蒙古地区“文革”歌曲之探究[D].内蒙古师范大学,音乐学,2012,硕士.
[42]陈凯,高明辉.自动控制系统可靠性仿真[J].冶金自动化,1991,05:29-33.
[43]李红雨.基于差量成本的铁路货车集结模式分析研究[D].北京交通大学,2014.
[44]严慧.拉美魔幻现实主义与新时期中国文学[D].苏州大学,比较文学与世界文学,2003,硕士.
[45]郑杰.BSG和CKIP-1基因多态性与中国汉族人群慢性充血性心力衰竭易感性的关联研究[D].中南大学,药学,2013,博士.
[46]王娟,石艳丽,姚立峰,王霞.地震勘探数据存储技术研究与应用[J].石油地球物理勘探,2008,S1:163-167+193+196+13.
[47]李明艳.基于教师需求的校本教研活动调查研究[D].宁波大学,教育管理（专业学位）,2013,硕士.
[48]陈翼.论数据仓库的设计与实现[J].计算机时代,2003,08:33-34.
[49]周锴玲.杂糅：共存之道[D].广东外语外贸大学,英语语言文学,2013,硕士.
[50]叶倩兰.“行”状量词“行”、“列”、“排”研究[D].广西师范大学,语言学及应用语言学,2014,硕士.