脂氧素A_4对尿酸诱导的人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响

【摘要】目的：探讨脂氧素A4（LXA4）对尿酸诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）炎症相关因子的影响，并初步探讨其可能存在的机制。方法：实验分为对照组、尿酸（UA）单独刺激组和不同浓度LXA4（5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL）预处理组。ELISA法检测细胞培养上清中白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测HUVECsTNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达水平；蛋白免疫印迹（WesternBlot）方法检测细胞总蛋白p38MAPK和NF-κB/p65水平以及其磷酸化水平。结果：12mg/dL的UA刺激HUVECs细胞24h，细胞培养上清中的TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高(P<0.01)；25ng/mLLXA4和50ng/mLLXA4能够抑制UA诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6产生（P<0.01）；5ng/mLLXA4对炎症相关介质的产生无明显影响（P>0.05）。与对照组相比，12mg/dL的UA刺激HUVECs细胞24h，IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平均显著升高（P<0.01）。与UA刺激组相比，5-50ng/mlLXA4预处理组的TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA表达水平明显下调（P<0.05）。WesternBlot实验证实12mg/dL的UA可诱导HUVECs细胞p38MAPK和NF-κB/p65蛋白磷酸化水平增加（P<0.05），作用30min时磷酸化最显著，而50ng/mLLXA4预处理后能够明显降低HUVECs的p38MAPK和NF-κB/p65磷酸化水平（P<0.01）。结论：LXA4可通过抑制p38MAPK和NF-κB/p65蛋白磷酸化水平而抑制尿酸诱导的血管内皮细胞炎症相关因子的表达，发挥抗炎作用。
【作者】易婷婷；
【导师】蒋兴亮；
【作者基本信息】川北医学院，临床检验诊断学，2014，硕士
【关键词】脂氧素；A4；LXA4；尿酸；人脐静脉血管内皮细胞；p38；MAPK；NF-κB/p65；

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