穿心莲内酯对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及Na+-K+-ATP酶活性的影响

【摘要】目的观察穿心莲内酯（Andrographolide,AD）对鼻咽癌CNE-2细胞系体外增殖、凋亡及Na+-K+-ATP酶活性的影响，初步探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法体外培养CNE-2低分化鼻咽癌细胞，并根据不同的实验目的分为4组：（1）空白对照组（仅给予0.1%DMSO）；（2）AD低剂量组（1μmol/LAD）；（3）中剂量组（3μmol/LAD）；（4）高剂量组（5μmol/LAD）。根据不同的研究目的孵育24~72h，WST-8法检测CNE-2细胞的增殖情况；流式细胞术检测细胞周期的改变以及凋亡；Westernblot检测不同浓度AD处理后CNE-2细胞内caspase-3以及Bcl-2的表达；无机磷法检测CNE-2细胞Na+-K+-ATP酶活性改变的情况。结果1.WST-8结果显示：AD对CNE-2细胞的体外生长呈时间-剂量依赖性。AD在同一时间点对CNE-2的抑制率随剂量增加而递增。而同一药物浓度随作用时间的延长其抑制率也明显增强。2.流式细胞术检测结果显示：CNE-2G0/G1期细胞比例随AD浓度增加而升高（P<0.05），而S期细胞和G2/M期比例有所下降；随着AD作用浓度的增加，细胞凋亡率明显增加，且呈一定的剂量-效应关系。其中5μmol/LAD作用后，细胞凋亡率达到41.6%，与对照组相比，差异有显著性意义（P<0.05）。3.Westernblot结果显示：CNE-2细胞经不同浓度AD处理24h后，细胞内caspase-3的活性亚基（17-kDa）较正常对照组明显增多；细胞内Bcl–2蛋白表达水平随AD作用浓度的增加而降低。4.不同浓度的AD能不同程度抑制CNE-2细胞Na+-K+-ATP酶的活性。其中AD浓度为1.0μmol/L时，能使Na+-K+-ATP酶活性降低至83%，而5.0μmol/LAD能使Na+-K+-ATP酶活性降低至42%。结论1．AD对鼻咽癌细胞的生长增殖具有抑制作用，并能诱导其凋亡；2．AD诱导CNE-2细胞凋亡可能通过抑制Bcl-2表达，降低胞内Na+-K+-ATP酶活性，最终激活caspase-3而实现。
【作者】王柏琦；
【导师】程爱兰；
【作者基本信息】南华大学，病理学与病理生理学，2012，硕士
【关键词】穿心莲内酯；鼻咽癌；凋亡；caspase-3；Bcl-2；Na+-K+-ATP酶；

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