阔叶十大功劳叶中生物碱的紫外诱导及相关蛋白质组学分析

阔叶十大功劳叶中生物碱的紫外诱导及相关蛋白质组学分析

作者:师大云端图书馆 时间:2018-06-21 分类:硕士论文 喜欢:2354
师大云端图书馆

【摘要】次生代谢在1891年首次被Kossel提出以区别于初生代谢,植物次生代谢在抵抗生物和非生物协迫时扮演着重要的角色,植物次生代谢物是药物、精细化学品和食品添加剂的主要来源。很多次生代谢物具有抗菌,抗病毒和抗真菌的作用,能保护植物免受病原体的侵害,但这些化合物的产量很低(通常小于植物干重的1%)。虽然化学合成和植物细胞培养可以生产这些代谢物,但由于多数次生代谢产物结构复杂,化学合成的收率较低,成本很高,植物细胞培养,虽然有一定的可行性,但成本控制仍是其发展的瓶颈。而利用非生物胁迫,提高在体或离体植物组织中次生代谢产物的含量,具有成本低,无污染,简单快速的优点,越来越受到产业界和学术界的重视,其中紫外光是一种重要的诱导因子。紫外光根据波长范围可分为三种:UV-A(320-400nm)、UV-B(290-320nm)和UV-C(200-290nm),作为一种非生物胁迫因子,它对地球生物产生了显著的影响。近年来,由于臭氧层持续减少,地球表面的UV-B辐射持续增加,为了适应这一变化,植物中具有吸收UV-B作用的次生代谢产物相应大幅度增加。到目前为止,从植物中已经报道了十万余个次生代谢化合物,其中,生物碱已成为第二大类化合物,它具有很好的UV-B吸收作用。但基于UV-B照射引起的次生代谢产物变化的分子机理研究较少。蛋白质组是指一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质。蛋白质是基因功能的实施者,因此对蛋白质结构、定位和蛋白质-蛋白质相互作用的研究将为阐明生命现象的本质提供直接的依据。差异蛋白质组学是蛋白质组学研究的重要内容,包含了特异蛋白的表达模式和功能模式,是研究植物生理、发育和遗传的重要工具,着重于筛选和鉴定不同种类或状态下各样本间蛋白质组的区别与变化,具有很好的可行性。应用差异蛋白质组学研究药用植物对外界刺激的应答和适应性,可以更好地了解药用植物应答外界刺激的蛋白和造成生物活性物质改变的合成途径。组合肽配体库是一种新生技术,能减少样品中蛋白浓度的动态变化,富集低丰度蛋白,通称为”ProteoMine”,已广泛应用于人和动物的蛋白质组研究,但是,在植物中的应用很少,只在拟南芥,南瓜和波菜中有简单应用。涉及到次生代谢产物的酶通常为低丰度蛋白,在植物中低丰度蛋白的检测经常受到高丰度蛋白,如占植物蛋白总量40%的Rubisco的影响,导致其很难被检测到。组合肽配体库是一种成本效益高,时效性强的低丰度蛋白富集工具,对于一些无法通过免疫沉淀等方法来富集的蛋白是一种好的选择,因此,它在植物蛋白质组学的研究方面具有潜在的应用价值。十大功劳是一种常绿灌木,属于小檗科十大功劳属,是一种重要的药物植物。现代药理学研究表明它具有很好的药理活性,如抑菌消炎、降血糖,抗氧化以及抗癌等多种生物活性。关于十大功劳活性成分研究,已很透彻。生物碱是其主要的生物活性物质,而含量较高的主要是小檗碱,药根碱,非洲防己碱和巴马汀等。传统上十大功劳以根入药,大量的采集,必然会引起植物资源的匮乏,也严重破坏生态环境。本课题应用UV-B诱导技术,对活体阔叶十大功劳叶进行了深入研究。通过对6小时UV-B照射,不同时间培养后的指纹图谱进行分析,发现阔叶十大功劳中次生代谢产物有显著的变化。与对照组相比,药根碱、非洲防己碱、巴马汀和小檗碱分别增加了919.6%,391.4%,192.4%和33.1%。为了揭示UV-B诱导阔叶十大功劳产生异喹啉生物碱的生物合成机理,本课题采用双向电泳,组合肽配体库和RT-PCR技术对其生物合成机制进行了研究,通过MALDI-TOF-MS鉴定,普通双向电泳得到了13个差异点,利用组合肽配体库技术后,检测到了91个新蛋白点,同时异喹啉生物碱合成的六个关键酶基因经UV-B诱导后也显著提高。
【作者】章燕珍;
【导师】张琳;田景奎;
【作者基本信息】浙江大学,生物医学工程,2014,硕士
【关键词】阔叶十大功劳;次生代谢;生物碱;双向电泳;组合肽配体库;RT-PCR;紫外诱导;

【参考文献】
[1]任卫青.昆明小鼠胚胎干细胞分离培养及其向原始生殖细胞诱导分化的研究[D].河南农业大学,临床兽医学,2012,硕士.
[2]杜宪.基于生命周期的民营企业成长路径及影响因素研究[D].河北经贸大学,企业管理,2014,硕士.
[3]李锐.西安都市圈空间结构优化研究[D].西安工业大学,区域经济学,2014,硕士.
[4]李蔚,张文雪.以人为本提高教学管理水平[J].中国高教研究,2001,09:74-75.
[5]樊鹏.现代企业绩效评估系统研究[D].西北工业大学,企业管理,2004,硕士.
[6]张维.公共利益与个人利益的平衡——司法的视角[D].苏州大学,法学理论,2003,硕士.
[7]刘丽娟.融媒时代广播发展策略研究[D].西北大学,新闻学,2013,硕士.
[8]马庆雯.山东高考语文卷语病题计量分析与教学策略研究[D].鲁东大学,学科教学(专业学位),2014,硕士.
[9]丁瑞琪.多器官功能不全伴急性肾损伤患者行血液净化治疗的预后分析[D].山东大学,临床医学(专业学位),2013,硕士.
[10]魏鹤琳.球栅阵列PBGA焊点界面反应及热疲劳可靠性研究[D].北京化工大学,机械设计及理论,2011,博士.
[11]高晓健.基于支持向量机的高光谱遥感图像分类方法研究[D].杭州电子科技大学,模式识别与智能系统,2013,硕士.
[12]梁东辉.基于价值流分析的水产品冷链物流研究[D].北京交通大学,2014.
[13]边树涛,董艳蕾,郑浚茂.地震波频谱衰减检测天然气技术应用研究[J].石油地球物理勘探,2007,03:296-300+240+362.
[14]若兰.莱索托的公共部门绩效管理[D].长安大学,企业管理,2013,硕士.
[15]程艳红,陈金媛,李何荣,赵美蓉.纳米材料的水生毒性研究进展[J].环境与健康杂志,2014,04:371-376.
[16]谷晓宁.A物业管理企业物业服务创新研究[D].吉林大学,工商管理,2014,硕士.
[17]李康.脐带血CD34+细胞来源的树突状细胞功能活性研究[D].河北医科大学,外科学,2014,硕士.
[18]陈思思.基于改进模糊综合的县级政府绩效评估研究[D].河北经贸大学,行政管理,2012,硕士.
[19]范昆仑.台达B系列变频器在空压机上的改造应用[J].冶金自动化,2013,01:86-87.
[20]李久平.中国铁路货运组织创新模式研究[D].西南交通大学,工商管理(专业学位),2013,硕士.
[21]王资璐.机械设备用油液多参数在线监测系统的研制[D].中国地质大学(北京),机械工程,2013,硕士.
[22]梁小芮.基于MDA和进化计算的无线传感器网络软件过程研究[D].南京邮电大学,计算机技术(专业学位),2013,硕士.
[23]周海荣.桥联席夫碱稀土配合物的合成及其催化丙交酯开环聚合性能[D].苏州大学,材料学,2014,硕士.
[24]李孝众.变电站操作票专家系统的研究与开发[D].华北电力大学(北京),电力系统及其自动化,2003,硕士.
[25]李雪.面向全局图像表达的尺度优化选择[D].哈尔滨工业大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[26]杨慧.兰州市1月~36月住院婴幼儿维生素D营养状况及其影响因素[D].兰州大学,儿科学,2013,硕士.
[27]殷小敏.面向SAR/GMTI目标检测的丛林区域散射特性建模分析[D].杭州电子科技大学,模式识别与智能系统,2013,硕士.
[28]曹雅婷,林清清,周亚囡.政府存款余额居高不下的原因分析及控制建议[J].现代物业(中旬刊),2014,07:68-69.
[29]王小旭,赵琳,潘泉,夏全喜,洪伟.基于最小均方误差估计的噪声相关UKF设计[J].控制与决策,2010,09:1393-1398.
[30]肖立红.8-溴-7-甲氧基白杨素对MHCC97-H细胞系肝癌干细胞特性和β-catenin表达的影响[D].湖南师范大学,生药学,2014,硕士.
[31]崔秀东.油画风景写生的写意性探究[D].东北师范大学,美术学,2012,硕士.
[32]陈景霖.基于语料库的两套小学英语教材文化因素评估[D].广东外语外贸大学,外语教学技术与评估,2013,硕士.
[33]孙越.鄂尔多斯盆地煤系地层致密砂岩气测井解释方法研究[D].东北石油大学,地球探测与信息技术,2013,硕士.
[34]庞维亮.天津荣程联合钢铁集团有限公司水生态循环利用工程设计及实践[D].天津大学,环境工程,2013,硕士.
[35]冯兴梧.75MHz高衰减小矩形系数晶体滤波器的设计制作[J].宇航计测技术.1992(05)
[36]倪程捷,房鑫炎,赵文恺,区伟健,赵彤彤.基于图论的移动应急电源孤岛划分及最优接入点搜索[J].电力系统自动化,2015,06:34-40.
[37]潘晓依.罗曼·波兰斯基电影中的精神分析元素[D].华东师范大学,电影学,2013,硕士.
[38]韩志荣.论网络媒介对文学传播的影响[D].扬州大学,文艺学,2012,硕士.
[39]吴方真.经络刮疗对活动期类风湿性关节炎的临床观察[D].福建中医药大学,针灸推拿学,2014,硕士.
[40]刘宁宇.完善我国房地产业政府调控政策研究[D].河北大学,行政管理,2014,硕士.
[41]钱玉趾.古蜀历史的精美画卷──读黄剑华新著《天门》[J].文史杂志.2002(02)
[42]孙博伟.小型游艇造型设计[D].吉林大学,艺术设计,2014,硕士.
[43]吉利成.高速公路扩建期交通流组织方式研究[D].长安大学,交通运输工程,2013,硕士.
[44]刘畅.基于GPP的LTE下行接收链路的设计与实现[D].北京邮电大学,电子与通信工程(专业学位),2013,硕士.
[45]张海婷,梁小龙,王俊锜.浅析我国对外文化贸易发展现状及发展对策[J].企业导报,2014,13:46+48.
[46]张利利.非酒精性脂肪肝大鼠Kupffer细胞表型及抗原提呈功能研究[D].扬州大学,内科学,2012,硕士.
[47]王欣.低出生体重影响因素研究[D].山西医科大学,流行病与卫生统计学,2013,硕士.
[48]周翠岭.基于曲线匹配的蛋白质结构比对方法[D].南昌航空大学,计算机技术,2013,硕士.
[49]袁秉衡.什么是全三维地震解释[J].石油地球物理勘探,1996,06:751-754+906.
[50]吴宽.中小股份制银行财务管理研究[D].内蒙古大学,高级管理人员工商管理,2013,硕士.

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