花生壳木犀草素的提取分离及抗菌作用的研究

【摘要】花生壳中含有丰富的木犀草素，木犀草素是一种具有抗菌、抗炎、抗氧化等作用的黄酮类化合物。本文以开发花生壳提取物作为食品防腐剂为目的，旨在研究花生壳提取物中木犀草素提取率与提取物抗菌作用关系，并结合抗菌作用优化提取提取条件及分离条件，对提取物的抗菌作用进行具体研究。主要研究成果：1、确定了HPLC法测定花生壳提取物中木犀草素含量。在选定色谱条件下，木犀草素与其它成分在30min内达到了基线分离，在550μg/mL浓度范围内，木犀草素浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9990），平均加标回收率为100.3%，RSD=1.43%（n=6）。表明该法对木犀草素的检测分析精密度高、重现性好、准确度高。2、提取物中木犀草素的绝对含量与提取溶剂及辅助提取方法有关。对于同种溶剂或同种辅助方法的提取物而言，提取物在同一浓度下的抗菌效果不一样，而随着提取物浓度的增加，抗菌率增加，抗菌作用越显著。通过相关性分析，表明对金黄色葡萄球菌的抗菌率与提取物中木犀草素的绝对含量呈正显著相关。其中，提取溶剂为丙酮时效果最好，辅助方法为水浴回流时效果最好，因此，选择乙醇为提取溶剂结合回流法进行单因素及正交实验，得到的最佳提取工艺为：85℃水浴回流，70%乙醇，料液比1:20，提取2次，每次提取1.5h，木犀草素的提取量达到7.41mg/g。3、选用D101大孔吸附树脂对花生壳提取物进行分离纯化，通过对静态吸附及解析，以及动态解析各方面的研究，得出其工艺参数为上样木犀草素浓度0.07mg/mL，上样乙醇体积分数20%，上样pH值6、解吸pH值9、乙醇解析浓度70%、洗脱终点4BV，此时D101大孔树脂的分离纯化效果最好。4、通过滤纸片法及平板计数法测定花生壳提取物抗菌活性的菌种差异，表明在同一浓度下，提取物对不同菌种的抗菌作用存在明显差异，按微生物类别来分，对细菌的抗菌作用强于霉菌和酵母菌，对革兰氏阳性菌的抗菌效果强于革兰氏阴性菌。对枯草芽孢杆菌的抗菌作用最为显著，对金黄色葡萄球菌的抗菌作用次之。并测定了花生壳提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及大肠杆菌的MIC和MBC，进一步说明了花生壳提取物抗菌活性存在菌种差异。通过测定OD540值以及相对应的菌落总数，表明花生壳提取物对金黄色葡萄球菌的作用方式是抑菌作用。
【作者】林姣；
【导师】周建新；
【作者基本信息】南京财经大学，农产品加工及贮藏工程，2013，硕士
【关键词】花生壳；木犀草素；HPLC；D101大孔树脂；抗菌作用；

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