枯草芽孢杆菌21的分离及其抑菌能力研究

枯草芽孢杆菌21的分离及其抑菌能力研究

作者:师大云端图书馆 时间:2016-11-08 分类:硕士论文 喜欢:1323
师大云端图书馆

【摘要】土壤中存在大量有益微生物,本研究以防治植物病害为目的,从土壤中筛选出五株拮抗芽孢杆菌,以其中一株拮抗能力强的枯草芽孢杆菌21为研究材料,对其培养条件及抑菌能力进行进一步研究。利用平板拮抗试验,选择八种植物病原菌测定了分离菌株的抑菌谱,得出五个菌株均具有高效的抑菌能力;采用形态学与16SrDNA测序相结合的方法,鉴定出芽孢杆菌21为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。以牛肉膏蛋白胨为基础培养基,通过单因素试验和正交试验相结合的方法,研究了不同碳源、氮源、NaCl浓度三个营养元素及初始pH、接种量、转速、培养温度四个发酵参数对该菌产生抑菌物质的影响,得出:营养条件三个因子的最好组合方式为蛋白胨3.0g、可溶性淀粉10.0g、不添加NaCl;发酵参数的最好组合为接种量4%,温度35℃,转速180r/min,pH值为4。以玉米圆斑病菌为指示菌,研究了不同浓度的枯草芽孢杆菌21发酵液对病原菌分生孢子萌发和菌丝生长的影响,结果表明:经枯草芽孢杆菌21发酵液处理后的玉米圆斑病菌孢子萌发率降低,且经发酵液处理后的孢子和菌丝产生畸形,不能正常发育。通过测定枯草芽孢杆菌21发酵液稳定性发现:其发酵液对热、pH较稳定,对蛋白酶K和碱性蛋白酶具有耐受性,对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶敏感。利用硫酸铵沉淀的方法对枯草芽孢杆菌21发酵液中的抑菌活性物质进行初步分离,硫酸铵能够沉淀发酵液中的抑菌活性物质,初步被认为是蛋白质类,且硫酸铵饱和度为60%时,抑菌能力最强;以玉米为研究材料,测定了枯草芽孢杆菌21发酵液对植物种子萌发及种子萌发过程中酶活性的变化,结果发现:玉米种子经不同浓度枯草芽孢杆菌21发酵液处理后,其萌发率及种子酶活性均产生不同的变化。供试的枯草芽孢杆菌21发酵液对种子萌发及抗逆酶活性均具有促进作用,其中发酵液浓度为40%时,种子萌发率最高,可达80.3%,且SOD及POD酶活性均达到最高,分别为764U和76.8U,而CAT酶活性最高时的发酵液浓度为20%,酶活为3.54U。
【作者】郭春兰;
【导师】孙冬梅;
【作者基本信息】黑龙江八一农垦大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士
【关键词】枯草芽孢杆菌21;抑菌活性;发酵优化;种子抗逆生理;

【参考文献】
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