我国核盘菌对菌核净抗药性的研究

【摘要】核盘菌[Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary]是一种世界性的病原真菌,由其引起的油菜菌核病在我国所有油菜产区均有发生,严重影响了油菜的产量和质量,目前对其控制仍以化学药剂防治为主。本研究采用MIC法和EC5o法检测了2011-2012年采自湖南省等6个省份2904株核盘菌菌株对菌核净的敏感性,并建立了核盘菌对菌核净的相对敏感性基线。检测结果表明：首次于2012年在湖南省、2011和2012年在陕西省和黑龙江省分别检测到了核盘菌对菌核净的抗性菌株。其中,2012年在湖南省检测到了3株抗性菌株,其抗性倍数为4.56～105.53倍,抗性频率为1.12%；2011和2012年分别在陕西省检测到了2株和13株抗性菌株,其抗性倍数分别为10.06～23.32和24.37～99.80倍,抗性频率分别为1.02%和3.78%；2011和2012年分别在黑龙江省检测到了8株和11株抗性菌株,抗性倍数分别为5.56～85.49和3.21-9.69倍,抗性频率分别为3.29%和2.69%,其它省份未检测到抗性菌株。建立了核盘菌对菌核净的相对敏感性基线为0.2963±O.1505(SD)μg/mL(O.0138～0.6778μg/mL)。与敏感菌株相比,菌核净田间抗性菌株菌丝生长速率降低、致病力减弱且发病率降低、产菌核时间延迟,且对渗透压更为敏感,表明抗性菌株的适合度下降。交互抗性测定结果表明：菌核净田间抗性菌株在菌核净与同类杀菌剂异菌脲和腐霉利,以及氨基甲酸酯类杀菌剂乙霉威之间具有正交互抗性；对杀菌剂多菌灵、戊唑醇、醚菌酯、福美双和啶酰菌胺无交互抗性；供试菌株中仅有1株抗性菌株(HLJ4)对杀菌剂菌核净和咯菌腈具有正交互抗性。抗性菌株的超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均高于敏感菌株(P<0.01),而两类菌株体内谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活性无显著性差异(P>0.05)。对双组分组氨酸蛋白激酶(HK)基因研究发现,在5株菌核净田间抗性菌株中,有且只有抗性菌株HLJ4在HK基因的694位碱基(T-C)和1245位碱基(G-A)发生碱基突变,但仅在第一个突变位点(即第694位碱基(T-C))引起了第231位编码氨基酸的改变(异亮氨酸转变成为了苏氨酸),但是此突变位点是否为菌株HLJ4对菌核净产生抗药性的原因,还有待进一步研究,而第二个突变位点没有引起编码氨基酸的改变,为无义突变。50%戊·菌WP(戊唑醇：菌核净=12：11)无论在室内还是在田间对油菜菌核病菌均具有较高的活性,当用量为20.0～25.0g(a.i.)/667m2时对油菜菌核病具有较好的防治效果,且对油菜安全。
【作者】周锋；
【导师】朱福兴；
【作者基本信息】华中农业大学，农药学，2014，硕士
【关键词】核盘菌；菌核净；敏感性检测；抗性机制；HK基因；

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