共生转录因子表达载体的构建及转基因水稻培育

共生转录因子表达载体的构建及转基因水稻培育

作者:师大云端图书馆 时间:2016-09-14 分类:硕士论文 喜欢:3250
师大云端图书馆

【摘要】菌根共生(AMsymbioses)和根瘤共生(rootnodulesymbiosis)是两种特殊的共生形态。随着共生作用机制的研究,人们对两者之间的进化关系取得了一些共识:根瘤共生很可能是菌根共生演化而来;根瘤共生信号通路的遗传位点和菌根共生的信号通路的遗传位点在植物的基因组中存在重叠。比如,水稻中部分调控菌根共生的基因对豆科植物的根瘤共生起作用,水稻中至少存在5个共生调控的基因对两类共生作用都发挥作用。这成为探索根瘤共生体系向非根瘤共生植物转移的重要依据。近年来,利用模式豆科植物(百脉根、苜蓿等)不同表型的共生突变体克隆到一系列共生基因。以此为基础,建立了根瘤菌共生信号转导途径的模式图。我们将这些关键的共生基因转入水稻中,尝试在水稻中建立共生信号转导途径。主要结果如下:1.构建组合表达载体:pCAMBIA1302-35sNSP1-35sNSP2-35sNIN,pCAMBIA-1302-35sNSP1-35sNSP2-35sNIN-35sLHK1。2.通过水稻愈伤将pCAMBIA1302,pCAMBIA1302-35sNSP1-35sNSP2,pCAMBIA1302-35sNSP1-35sNSP2-35sNIN和pCAMBIA1302-35sNSP1-35sNSP2-35sNIN-35sLHK1稳定转化到水稻日本晴中,得到大量转基因家系,实现这些基因的超量。3.不管是转基因水稻还是对照组,接种根瘤菌十天后都能普遍的观察到根瘤菌对表皮及根毛的侵入,形成类似侵入线的结构。并且几乎所有的这种侵入都出现在侧根发生的地方。4.根瘤菌的接种改变了水稻根尖部分的侧根发育。不论是转基因组还是对照组,在接种根瘤菌后,根尖部分侧根或侧根原基数量的相对于未接种显著增多。并且,转基因和对照组接种根瘤菌后侧根虽然都增多,但是转基因组侧根数量也是显著的多于对照组的。5.在接种根瘤菌后,转基因组共生同源基因表达水平变化较小。仅有受植物激素诱导的OsRR5的表达量增加了。
【作者】曹文刚;
【导师】张忠明;
【作者基本信息】华中农业大学,微生物学,2014,硕士
【关键词】菌根共生;水稻;根瘤共生;百脉根;表达载体;

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