棉花黄萎病菌Vd08284弱毒相关病毒研究

【摘要】棉花黄萎病是世界性土传维管束萎蔫病害,是棉花生产的限制因子之一。我国棉花黄萎病的病原菌为大丽轮枝菌(VerticilliumdahliaeKleb.),研究黄萎病菌是否含有弱毒相关真菌病毒,对黄萎病的生物防治具有较大的潜在意义。本文对我国棉花主产区12个省162个黄萎病菌株进行致病力测定,筛选出51个弱毒菌株,并对其进行dsRNA检测和分析,发现弱毒菌株Vd08284的dsRNA提取液中存在2条dsRNA条带。采用改进的利用随机引物扩增RNA病毒的cDNA全长序列方法获得2条dsRNA的cDNA全长。DNA测序结果得到2条序列信息,根据片段大小依次命名为dsRNA1(1769bp)和dsRNA2(1603bp)。dsRNA1和dsRNA2序列信息已经在NCBI数据库中登记,登记号分别为KC422244.1和KC422243.1。编码蛋白序列经Blast-P检索结果显示,dsRNAl和dsRNA2编码蛋白分别与Partitivirus属病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRP)、外壳蛋白(CP)有较高同源性。将该病毒暂命名为Verticilliumdahliaepartitivirus1(VdPV1),VdPV1的RdRP和CP的氨基酸序列与Chrysoviridae、Totiviridae和Partitiviridae3个科19种病毒的RdRP和CP分别建立进化树,VdPV1均与Partitiviridae中双分病毒属的病毒聚在一枝,进一步说明从菌株Vd08284中分离到的病毒VdPV1属于双分病毒属中的新成员。通过含病毒VdPV1菌株Vd08284与潮霉素标记的黄萎病菌突变体菌株T692对峙培养,成功获得30个传毒菌株,可判定病毒VdPV1在棉花黄萎病菌中能够在不同菌株间传播。通过对其生物学特性研究,发现菌株T692被病毒VdPV1侵染后,能够导致致病力、菌丝生长速率和粗毒素分泌量显著降低,可初步推断病毒VdPV1对棉花黄萎病菌具有一定的弱毒影响。根据病毒VdPV1具有的传播能力和弱毒特性,推断该病毒具有一定的生防潜能。在今后的工作中,如何将病毒VdPV1用于生物防治,有待进一步研究。
【作者】冯自力；
【导师】姜道宏；
【作者基本信息】华中农业大学，植物病理学，2013，硕士
【关键词】棉花黄萎病菌；dsRNA病毒；双分病毒；VdPV1；弱毒现象；

【参考文献】
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