基因枪和农杆菌介导耐盐基因EhHOG对小麦品种的遗传转化

【摘要】土壤盐碱化是影响世界上作物生产的重要环境胁迫因素,严重影响了我国小麦的生产,培育耐盐的小麦新品种对有效利用盐碱地,扩大小麦种植面积,提高小麦产量和经济效益具有重要意义。传统育种方法在改良作物耐盐碱性上存在诸多困难,使得小耐盐碱麦育种进展缓慢。而通过转基因技术将优良的外源耐盐基因导入到小麦品种之中,从而培育出耐盐的小麦新品种已有可能。源于以色列死海丝状真菌E.herbariorum的EhHOG为编码丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的基因,对盐有很强的耐性。本研究利用基因枪和农杆菌两种介导方法将EhHOG耐盐基因导入到不同的小麦品种中,以期获得耐盐性强的小麦种质,主要结果如下：(1)大肠杆菌和农杆菌EhHOG基因载体的获得：本研究分别对大肠杆菌感受态菌株E.coliDH5a和农杆菌感受态菌株AGL1进行了EhHOG基因质粒表达载体的转化,PCR和双酶切的验证结果表明转化取得了成功；(2)基因枪介导的小麦遗传转化：以普通小麦品种华麦2566、华麦2152、郑麦9023和硬粒小麦品种LDN这4个基因型的小麦品种为受体,采用基因枪法对耐盐基因EhHOG进行了遗传转化,最终获得24株小麦抗性植株,初步检测结果表明,其中有3株华2566和14株LDN呈现出EhHOG基因阳性；(3)小麦农杆菌转化体系的建立和EhHOG基因的遗传转化：在查阅相关资料和结合相关实验的基础上建立了小麦的农杆菌转化体系；在此基础上,以普通小麦品种华麦2668、陇春23、科农199和硬粒小麦品种LDN这4个基因型的小麦品种为受体,利用农杆菌法对耐盐基因EhHOG进行了遗传转化；最终获得13株小麦抗性植株,初步检测结果表明,其中仅有8株LDN呈现出EhHOG基因阳性,而普通小麦品种未获得转基因阳性植株。
【作者】刘亚；
【导师】孙东发；
【作者基本信息】华中农业大学，作物遗传育种，2014，硕士
【关键词】小麦；耐盐；EhHOG基因；基因枪；农杆菌；

【参考文献】
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