两种化学制剂结合热处理脱除梨病毒及梨离体植株的生根与移栽研究

【摘要】梨树普遍带有3种潜隐病毒,即：苹果褪绿叶斑病毒(Applechloroticleafspotvirus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(Applestemgroovingvirus,ASGV)和苹果茎痘病毒(Applestempittingvirus,ASPV),这些病毒要是通过无性繁殖材料嫁接传播,尚未发现这三种病毒的自然传播介体。因此,培育和栽培无病毒种苗是防治梨病毒病害的有效途径。为建立适合我国不同梨种质的病毒脱除技术体系,本研究以带有病毒的梨离体植株为试验材料,通过采用含栎皮黄酮和病毒醚的MS培养基结合恒温热处理的方法脱除梨病毒,同时筛选了适合离体植株生根与移栽基质选,比较分析了无病毒与带病毒梨离体植株的生根和移栽存活特点。结果如下：1.以西洋梨‘红蓓蕾莎’和‘红茄梨’离体植株为材料,采用栎皮黄酮浸泡预处理梨离体植株,然后在含栎皮黄酮的MS培养基上室温培养及接种于含栎皮黄酮的MS培养基在350C条件下恒温热处理或32/38℃条件下变温热处理,切取取0.5mm茎尖再培养,经2次继代培养后,采用RT-PCR结果发现,单一栎皮黄酮处理或与相对较低温度的热处理结合对梨离体植株的ASPV和ASGV没有脱除效果。2.以西洋梨‘红蓓蕾莎’离体植株为材料,采用含病毒醚和栎皮黄酮的MS培养基结合35℃热处理。结果表明,采用含有病毒醚和栎皮黄酮的两种制剂的培养基结合热处理除对植株的生长有一定抑制作用外,其它各处理对梨离体植株生长的影响无明显影响。待处理30d、40d和50d后取0.5mm茎尖再培养,经2次继代培养后,采用RT-PCR方法检测ASGV和ASPV,结果显示同时采用含病毒醚和栎皮黄酮的MS培养基结合热处理可明显提高病毒脱除效果,采用含病毒醚20μg/ml和栎皮黄酮10μg/ml的MS培养基经热处理40d后的茎尖再生植株的ASPV和ASGV的脱除率均达到100%。进一步采用该方法对10个梨品种的离体植株进行了处理,发现该处理除对不同品种的梨离体植株株高和增殖系数有一定降低作用外,对生长影响不明显,病毒检测结果表明,采用该处理方法对这些离体植株的ASPV脱除率均为100%；除‘雪花梨’和‘康佛伦斯’的ASGV的脱除率为87.5%以及‘锦香’的ASGV的脱除率为75%外,其它品种的ASGV的脱除率为100%。3.通过调节生根培养基中激素的浓度,筛选出适合梨‘金水2号’和‘红贝蕾莎’离体植株生根的培养基：1/2MS+2.5mg/1IBA+1.5mg/1NAA和1/2MS+0.5mg/1IBA+2.0mg/LNAA。以砂梨‘金水2号’生根后的离体植株为材料,筛选出较适合的离体植株移栽基质：草炭/蛭石/营养土/黏土=1/1/1/1,离体植株移栽20d存活率达到50%。多个梨品种的离体植株采用移栽基质：蛭石/营养土/黏土=1/1/1/移栽,移栽成活率在20%左右。4.以梨品种‘金水2号’、‘红蓓蕾莎’和‘康佛伦斯’的带病毒和无病毒离体植株为材料,比较分析病毒对梨离体植株生根的影响,结果表明病毒对梨离体植株生根的影响因梨品种而异,带病毒‘金水2号’的离体植株不能生根,带病毒‘红蓓蕾莎’的生根率、平均根长和生根量均较无病毒植株明显降低,而病毒对‘康佛伦斯’离体植株的生根无明显影响。
【作者】汤慧慧；
【导师】洪霓；王国平；
【作者基本信息】华中农业大学，植物病理学，2014，硕士
【关键词】梨；病毒；离体植株；栎皮黄酮；病毒醚；乙二醇单乙醚；热处理；生根；移栽；

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