茶叶提取物及纳米EGCG对人乳腺癌MCF-7细胞生长增殖的影响

【摘要】本实验通过对茶叶提取物：茶多酚、EGCG.茶氨酸、咖啡碱、茶黄素、茶色素等对人乳腺癌MCF-7细胞的体外影响实验,进行筛选,选取EGCG进一步研究,制备EGCG纳米粒子。将所制备的几种纳米粒子再对MCF-7细胞进行实验,对其细胞毒性、细胞增殖率等为依据做出判断。取得如下结果：1、茶多酚、EGCG.咖啡碱、茶色素在一定范围内(20、50、100、200、300.400.500μg/mL)未发现细胞毒性。茶黄素在400μg/mL以下均未出现细胞毒性；茶氨酸浓度在高达2400μg/mL时都没有出现细胞毒性。茶氨酸对MCF-7细胞的抑制作用不明显；茶多酚、EGCG.咖啡碱、茶黄素、茶色素均可以明显抑制MCF-7细胞的增殖生长,并呈现剂量效应。其中同等剂量下,抑制率呈现以下顺序：茶黄素>EGCG>咖啡碱>茶多酚>茶色素>茶氨酸。茶氨酸在低浓度对MCF-7细胞有促进作用,较高浓度(1600μg/mL)才表现出较弱的抑制作用。EGCG(500μg/mL)和茶黄素(400μg/mL)的效果最为明显,均超过60%。2、选用EGCG进一步实验中,将EGCG用叶酸、PEG进行修饰和制备纳米粒子,并开展制备纳米粒子的靶向性研究。利用激光共聚焦显微镜拍摄罗丹明B标记下的纳米粒子的进入细胞的情况确定其靶向性。其中效果最好的是叶酸EGCG纳米粒子；有叶酸修饰的纳米粒子的靶向性高于未修饰粒子。3、纳米粒子在实验浓度范围内(20.40.80.160.240.320.400μg/mL)均未出现细胞毒性。纳米粒子在400μg/mL时,各纳米粒子对MCF-7的抑制效果最为明显,抑制效果最好的为叶酸、PEG共同修饰的纳米粒子。4.EGCG及其纳米粒子(FA+PEG)-EGCG-NPs-1.(FA+PEG)-EGCG-NPs对PI3K-Akt信号通路的作用,能显著下调p-PDK1.p-Akt.CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达,但对总Akt蛋白的表达无明显影响；并能提高PTEN.p21.Bax蛋白的表达,达到抑制乳腺癌的效果。
【作者】温旭烨；
【导师】曾亮；
【作者基本信息】西南大学，茶学，2014，硕士
【关键词】茶叶提取物；EGCG；乳腺癌；纳米粒子；PI3K-Akt；

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