益生菌L.plantarum P-8对肉鸡肠道菌群、肠道免疫和生长性能影响的研究

【摘要】乳酸杆菌是肠道具有生理意义的菌群,以乳酸杆菌作为益生菌剂是近年崛起的新型替代抗生素促生长剂绿色饲料添加剂。本论文以益生菌L.plantarumP-8为试验菌株,从鸡肠道菌群、肠道免疫和生产性能三个方面评价L.plantarumP-8替代抗生素的可行性。并深入剖析肠道菌群与肠道免疫和肠道菌群与生产性能间相互作用的内在规律,以期揭示益生乳酸菌调控肠道菌群发挥益生作用的机制。本试验以玉米、豆粕型日粮为基础日粮,采用单因子随机分组的试验设计方案,将270只刚孵出的健康Cobb500肉鸡称重后分为3组。1组为对照组(ControlG),饲喂不添加抗生素的基础日粮；2组为抗生素组(AntibioticG),饲喂添加金霉素和盐霉素的抗生素日粮；3组为Lp–8组(LP-8G),饲喂不添加抗生素的基础日粮,但饮水投喂L.plantarumP8(2.0×106cfu/mL)。试验期42天。首先,采用454焦磷酸测序技术比较肉鸡摄入L.plantarumP-8和抗生素后42日龄肉鸡肠道菌群群落结构发生的改变。结果发现,饲喂益生菌和抗生素鸡肠道细菌菌群群落结构均差异显著(p<0.05)。其次,采用荧光定量PCR技术,基于属和种的分类学层面,结合优势菌属、乳酸杆菌种和双歧杆菌种定量数据,精细解析肉鸡摄入L.plantarumP-8和抗生素后,7、28、42日龄肉鸡肠道菌群在分类学地位属及种的层面发生的细微变化。结果发现,摄入L.plantarumP-8后,可显著提高7、28、42日龄肉鸡肠道中总细菌、乳杆菌属和双歧杆菌属数量(P<0.01),并可显著提高28、42日龄肉鸡肠道梭杆菌属数量(尸<0.05),同时可显著降低7、28、42日龄肉鸡肠道中埃烯氏菌属数量(P<0.01)；而采食抗生素日粮,可显著降低28、42日龄肉鸡肠道中奇异菌属数量(P<0.01)。于试验第42天,摘取脾脏、胸腺和法氏囊,计算免疫器官指数：采用ELISA法检测14、42日龄肉鸡血清IgG和肠粘膜SIgA含量；采用荧光免疫组化法检测14、42日龄肉鸡小肠粘膜、派伊尔结和盲肠扁桃体CD3+、IgA+细胞数量了解其表达情况；利用流式细胞仪检测14、42日龄肉鸡脾脏、小肠上皮内、固有层和盲肠扁桃体CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞质量分数；采用荧光定量2-△cT法分析14、42日龄肉鸡肠道细胞因子IFN-γ、Bu-1、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12表达水平。结果发现,抗生素组和LP-8组42日龄肉鸡胸腺指数法、氏囊指数和脾脏指数均显著提高(P<0.05)；雏鸡摄入L.plantarumP-8后,可显著提高14、42日龄肉鸡血液IgG及肠液中SIgA含量(P<0.05)；饮水投喂L.plantarumP-8可显著提高肉鸡小肠粘膜、盲肠扁桃体CD3和IgA阳性细胞数以及派伊尔结IgA阳性细胞数(P<0.01)。抗生素的摄入显著降低了42日龄肉鸡小肠粘膜IgA、派伊尔结CD3和IgA以及盲肠扁桃体CD3阳性细胞数(P<0.01)摄入L.plantarumP-8可显著提高14日龄肉鸡小肠粘膜、固有层和盲肠扁桃体CD4+、CD8+及CD3+T细胞质量分数(P<0.01),42日龄肉鸡小肠粘膜、固有层CD4+T细胞质量分数和CD4+/CD3+·比值以及固有层和盲肠扁桃体CD3+T细胞质量分数(P<0.01)。而采食抗生素日粮,显著降低了42日龄肉鸡小肠固有层CD4+、CD3+T和盲肠扁桃体CD3+T细胞质量分数；摄入L.plantarumP-8使42日龄肉鸡肠道Bu-1和IL-12显著高于对照组(P<0.05)。采食抗生素日粮,肉鸡肠道IL-2、IL-4、IL-10显著低于对照组(P<0.05)。生长性能结果表明,LP-8组22～42日龄肉鸡日增重显著高于对照组(P<0.05)；抗生素组肉鸡在1-21、22～4.2日龄及全期日增重均显著高于对照组(P<0.05)。通过以上的实验结果,我们得出的总体结论是：具有益生特性的L.plantarumP-8能够存活于宿主肠道内,改善肠道菌群群落结构,减少有害菌的粘附、侵染、定植,促进有益菌生长,增强肠道防御功能；对肉鸡的体液免疫、细胞免疫和肠道相关淋巴组织免疫可产生有利于机体免疫功能状态的调节作用；能够显著提高肉鸡后期生长阶段生长性能。
【作者】王丽凤；
【导师】张和平；
【作者基本信息】内蒙古农业大学，农产品加工及贮藏工程，2014，博士
【关键词】益生菌；植物乳杆菌；抗生素；肠道菌群；肠道免疫；生长性能；肉鸡；

【参考文献】
[1]樊永生.建筑信息模型的空间拓扑关系提取和分类研究[D].西安建筑科技大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[2]沈勇.平衡低噪声放大器的分析与设计[D].南京邮电大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[3]张杰.自制自动冲洗器中药灌洗应用于断指再植术后静脉危象的临床研究[D].黑龙江中医药大学,中医学（专业学位）,2013,硕士.
[4]李小凤.任意频率水波越过正弦沙坝与潜堤复合地形的解析模拟[D].广西民族大学,计算数学,2013,硕士.
[5]沈雁.ATC与纺织品特殊保障措施法律问题研究[D].华东政法学院,法律,2004,硕士.
[6]苏婉雅.论灾难社会工作对防灾减灾的介入方法[D].华中师范大学,社会工作,2013,硕士.
[7]杨勇超.I3C介导的NF-kB沉默抑制人胰腺癌细胞uPA表达的实验研究[D].大连医科大学,外科学,2012,硕士.
[8]白云峰.中国石油呼和浩特销售分公司员工激励体系研究与改进[D].内蒙古大学,工商管理,2013,硕士.
[9]刘红琳.西方过程思想的演进及马克思过程观的当代价值研究[D].辽宁大学,马克思主义哲学,2014,博士.
[10]胡玮.网络拓扑自动发现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[11]刘阳,季宏伟,周德凤,朱晓飞,李朝辉.TiO_2/LaFeO_3微纳米纤维的可控制备及光催化性能[J].高等学校化学学报,2014,01:19-25.
[12]任友良.液压挖掘机工作装置结构性能分析[D].浙江大学,2010.
[13]原艳芬.硅材料的氮化处理及其吸附与催化性能研究[D].中南民族大学,物理化学,2013,硕士.
[14]边春生.德育教育在大学生创业教育中的研究[D].中北大学,思想政治教育,2013,硕士.
[15]李剑锋.乔篑成书画鉴藏考论[D].首都师范大学,美术学,2014,硕士.
[16]姚婧婧.废旧塑料浮选回收中气泡—颗粒粘附行为的研究[D].长安大学,环境工程,2014,硕士.
[17]张中辉.基于2D-NMFA的人脸识别研究与实现[D].吉林大学,软件工程,2012,硕士.
[18]王永宁,刘志义.城市轨道交通车辆也可采用耐候钢等普通钢材[J].城市轨道交通研究.2000(01)
[19]龚一杨.电磁调制单层石墨烯体系中的电子输运性质[D].清华大学,2010.
[20]侯云杰.孔孟犯罪预防思想研究[D].甘肃政法学院,法律,2012,硕士.
[21]陈辉.汽车安全气囊折袋机故障检测系统的研究[D].长春工业大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[22]徐皓.生态社区与生态居住建筑[D].天津大学,建筑设计及其理论,2004,硕士.
[23]潘玉军.我国上市公司股利政策研究[D].山东财经大学,金融学,2012,硕士.
[24]陈劲伟.D公司员工离职研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[25]杨新磊.浮石及其混凝土的性能与应用研究[D].河北工业大学,结构工程,2004,硕士.
[26]吕益忠.硬X射线位相衬度成像的实验研究[D].安徽医科大学,影像医学与核医学,2004,硕士.
[27]屠江.永安期货沈阳营业部竞争战略研究[D].大连理工大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[28]潘霁野.教师应对幼儿冲突的解决策略研究[J].科教文汇(中旬刊),2015,01:78-81.
[29]于蕊.赵冬苓影视剧作品研究[D].山东师范大学,广播电视艺术学,2013,硕士.
[30]宋淑敏.基于方法—目的链理论的消费者行为研究[D].吉林大学,企业管理,2004,硕士.
[31]曹伟娟.黄河头道拐断面冰封期PCBs和HCHs的分布特征研究[D].内蒙古农业大学,市政工程,2013,硕士.
[32]蒋武庆.民事纠纷的法院多元解决机制研究[D].华侨大学,法律,2013,硕士.
[33]闵晓庆.营口市公益性政府投资项目的管理模式研究[D].吉林大学,项目管理,2014,硕士.
[34]潘蕴石.泛亚铁路网对我国国际物流的作用[D].大连海事大学,物流工程,2012,硕士.
[35]陈景东,徐波,黄泰翼.基于Mellin变换的语音新特征与频率归正说话人自适应技术[J].自动化学报,2000,04:478-484.
[36]卢健伟.贵金属修饰介孔二氧化钛中空结构的制备及光催化活性[D].天津大学,工业催化,2013,硕士.
[37]武杰.不同钢纤维掺加范围的高强混凝土框架节点抗震性能[D].郑州大学,结构工程,2013,硕士.
[38]唐国明,章海忠.一种新型的高性能船用座椅[J].江苏船舶.1989(01)
[39]曾艳丽.产品外形个性化定制概念设计模型[D].西安电子科技大学,机械制造及自动化,2004,硕士.
[40]王泽镕.西维因及主要降解产物1-萘酚对雄性罗非鱼雌激素效应的研究[D].南京农业大学,水生生物学,2011,硕士.
[41]赵威.离心泵的流噪声数值计算及声优化[D].华中科技大学,船舶与海洋结构物设计制造,2013,硕士.
[42]周晓岭.异质生境下克隆植物羊草和光稃茅香的空间拓展策略[D].东北师范大学,草业科学,2012,硕士.
[43]徐秀明.世界背景下的中国心理小说[D].苏州大学,中国现当代文学,2003,硕士.
[44]白红妍.苯系物鉴定及溯源方法研究[D].上海海洋大学,水生生物学,2013,硕士.
[45]贾青,李致平.多侧音三点测距系统距离测量及其计算方法[J].空间电子技术.1997(04)
[46]翁宜慧,季小俊,孙志挥.基于小波分析的预测算法在智能商务中的应用[J].计算机工程,2003,10:77-78.
[47]柳利军.城乡规划行政执法问题研究[D].华东政法大学,法律（专业学位）,2012,硕士.
[48]吴君君.贝多芬钢琴奏鸣曲中的古典思想与浪漫情怀[D].云南艺术学院,西方音乐史,2014,硕士.
[49]许相莉.基于智能计算的图像检索算法研究[D].吉林大学,2011.
[50]王晨.基于混合蛙跳算法的微电网运行优化[D].兰州理工大学,电工理论与新技术,2014,硕士.