低功率高能聚焦超声对胰腺癌移植瘤凋亡和基因表达影响的初步研究

低功率高能聚焦超声对胰腺癌移植瘤凋亡和基因表达影响的初步研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-06-28 分类:开题报告 喜欢:3691
师大云端图书馆

【摘要】研究目的评测低功率高强度聚焦超声(highintensityfocusedultra-sound,HIFU)治疗人胰腺癌YY-1移植瘤的疗效、安全性,探讨低功率HIFU对肿瘤细胞凋亡的影响及其机制,以期为临床应用提供理论依据。研究方法1.BALB/cnu裸小鼠30只,随机分为低功率组、高功率组、对照组,每组10只。建立人胰腺癌YY-1移植瘤裸鼠模型,并行HIFU辐照治疗,治疗期间观察肿瘤体积变化、肿瘤生长速率,记录不良反应;各组分别于第7天、第14天收集肿瘤标本,Westernblot方法分析Bax、Bcl-2表达情况,TUNEL法检测各组肿瘤细胞凋亡率。2.治疗第7天分别收集低剂量组及对照组肿瘤组织,通过Agilent人类基因表达谱芯片检测差异性基因表达。通过实时定量PCR(QuantitativeRealtimePCR)对筛选出的差异性基因进行验证。结果1.治疗后,低功率组、高功率组的肿瘤体积均小于对照组(P<0.05),两组间未见显著性差异(P>0.05);在第3天、第7天、第14天,低功率组、高功率组肿瘤生长速率明显低于对照组,具有统计学差异(P<0.001);两组之间比较无统计学差异(P>0.05)。与低功率组比较,高功率组不良反应增多,主要为皮肤烧伤和通道组织损伤(P<0.05);2.治疗后第7天,与对照组比较,低功率组、高功率组Bax均表达上调,Bcl-2表达均下调,有统计学差异(P<0.05);治疗后第14天,与对照组比较,低功率组、高功率组Bax表达均进一步上调,Bcl-2表达均进一步下调,差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL结果显示,治疗后第7天、第14天,低功率组和高功率组细胞凋亡率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组间细胞凋亡率无统计学差异(P>0.05)。3.表达谱芯片结果显示,与对照组比较,低功率HIFU辐照后发生差异表达50倍以上的基因共4767个,其中上调3958个,下调809个。GO分析(GeneOntology,GO)和pathway分析结果提示,HIFU通过上调Fas、Bid、IL1-R、Apaf-1、Caspase-8、Caspase-9等关键基因表达,直接促进凋亡,还通过影响p53信号通道、MAPK信号通道、PI3K-Akt信号通道等多个信号通道中的关键基因间接促进肿瘤凋亡。4.选取Caspase-8、Caspase-9、Fas、Bcl-xL行实时定量PCR验证,结果显示扩增良好,并与表达谱芯片结果一致。结论:1.低功率、高功率HIFU治疗胰腺癌移植瘤均有效,高功率组局部不良反应较多;低功率HIFU在疗效不差于高功率HIFU的基础上,安全性更好。2.HIFU可上调促凋亡基因Bax的表达,下调抗凋亡基因Bcl-2的表达,并具有时间和剂量依赖关系。3.低功率、高功率HIFU均可促进肿瘤细胞凋亡,两组间肿瘤细胞凋亡率未见统计学差异。4.低功率HIFU可通过内源性途径和外源性途径促进细胞凋亡,同时,还通过影响多种信号通道、多个环节直接或间接促进肿瘤组织凋亡,并可能存在着双向调控机制。
【作者】洪立立;
【导师】郭志;
【作者基本信息】天津医科大学,肿瘤学(专业学位),2014,博士
【关键词】胰腺癌;高强度聚焦超声;低功率;凋亡;表达谱芯片;信号通道;

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