棉花组织诱导体系中大丽轮枝菌分泌蛋白分析及其致病性研究

棉花组织诱导体系中大丽轮枝菌分泌蛋白分析及其致病性研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-10-24 分类:参考文献 喜欢:2458
师大云端图书馆

【摘要】本研究将大丽轮枝菌在棉花组织诱导和非诱导(查比克基础培养)体系中分别进行培养,观察其生长表型,提取分泌蛋白并进行致病性研究。结果表明棉花组织诱导培养基更适合大丽轮枝菌的生长,能够促进它产生更多的分生孢子,向培养上清液中分泌更多的蛋白质,胞外蛋白接种棉花能够引起更加典型的黄萎病症。可见,棉花组织诱导体系可以诱导大丽轮枝菌分泌型致病蛋白的表达,通过其分泌蛋白谱差异分析,可以进行潜在致病因子的挖掘。离子交换富集法分别提取棉花组织诱导与非诱导体系中大丽轮枝菌分泌蛋白,利用iTRAQ标记和质谱检测技术进行分泌蛋白差异分析。结果表明,棉花组织诱导体系中有502个蛋白被上/下调表达,变化倍数在1.5倍以上,其中266个蛋白被注释为潜在致病因子,包括221个预测的分泌蛋白、107个细胞壁水解酶类蛋白、86个宿主-病原菌互作(PHI)蛋白、17个小的富含半胱氨酸蛋白、2个乙烯诱导坏死蛋白和1个赖氨酸模体(LysM)蛋白。另外,97个分泌型细胞壁水解酶类蛋白显著上调,它们主要参与果胶、纤维素和木质素的降解。实时定量PCR对显著上调的细胞壁水解酶进行体内表达水平检测,结果发现它们在大丽轮枝菌侵染棉花前和侵染后期基因低水平表达,在侵染的初期阶段均被显著诱导表达。可见,细胞壁水解酶在大丽轮枝菌侵染寄主过程中可能发挥着重要作用。比较基因组分析发现大丽轮枝菌参与果胶降解机制的酶类相比其它病原菌发生了明显扩增,尤其是GH28、GH43、PL1和PL3超家族成员。分泌蛋白谱鉴定结果中也发现了多个GH28、GH43、PL1和PL3超家族成员。其中,3个果胶裂解酶(PL3)超家族成员被显著上调,其上调倍数分别为15.02±0.26,13.17±0.92和7.01±0.8。构建PL3超家族进化树分析发现,VDAG3551位于一个独立的进化分支,其它PL3超家族成员位于另一个进化分支。将VDAG3551(VdPL3.1)编码基因敲除后,其突变体(ΔVdPL3.1)接种感病棉种的致病力明显下降,从野生型61%下降到29.3%。将VDAG9536(VdPL3.3)编码基因敲除后,其突变体(ΔVdPL3.3)接种感病棉种的致病力为54.5%,相比野生型几乎没有改变。综上所述,本研究利用离子交换法对大丽轮枝菌VdG1在诱导和非诱导条件下的分泌蛋白进行提取,通过iTRAQ标记和质谱鉴定技术对分泌蛋白组差异蛋白进行定量分析,挖掘差异蛋白中潜在致病因子,分析大丽轮枝菌对棉花细胞壁组织的降解机制,验证了细胞壁水解酶PL3家族在大丽轮枝菌致病过程中的关键作用。
【作者】肖红利;
【导师】戴小枫;
【作者基本信息】中国农业科学院,生化与分子生物学,2014,博士
【关键词】大丽轮枝菌;分泌蛋白;致病因子;细胞壁水解酶;PL3;

【参考文献】
[1]钱慧文.基于巴塞尔资本协议的商业银行逆周期调节机制研究[D].浙江大学,金融学,2013,硕士.
[2]田琳琳.长春市物流产业发展对策研究[D].吉林大学,管理科学与工程,2014,硕士.
[3]黄彦军.浅析新形势下企业统计学科体系发展的思考[J].统计教育,2005,06:27-28.
[4]李雪松.稻瘟病菌VAC14、VAC7以及IRA1基因的功能分析[D].浙江大学,植物保护,2013,硕士.
[5]石照耀,林虎,林家春,张白.大齿轮测量:现状与趋势[J].机械工程学报,2013,10:35-44.
[6]林荣.刑事诉讼中回避制度研究[D].安徽大学,法律,2014,硕士.
[7]刘运宏.KF公司员工激励机制研究[D].西北大学,工商管理(专业学位),2014,硕士.
[8]尹逊亮.经济型轿车电流变自动离合器集成设计研究[D].吉林大学,车辆工程,2014,硕士.
[9]刘亢.思想政治课中高中生法律意识的培养[D].首都师范大学,学科教学,2014,硕士.
[10]王静静.金属离子改性二氧化钛光催化性质的研究[D].浙江大学,化学,2011,硕士.
[11]石磊.上海长征医院信息管理系统设计与实现[D].电子科技大学,软件工程(专业学位),2012,硕士.
[12]范巍,杨承东.城市轨道交通自动售检票中央清分系统概论[J].铁路通信信号工程技术.2004(02)
[13]韩东旭.试论马克思的自然观及其当代意义[D].辽宁大学,马克思主义哲学,2012,硕士.
[14]雷小芬.注册而未使用商标的法律保护[D].西南政法大学,知识产权法学(专业学位),2012,硕士.
[15]高清多.橡胶隔膜密封[J].特种橡胶制品.1990(02)
[16]许丽慧.保险业FDI对中国保险服务贸易的影响研究[D].河北经贸大学,国际贸易学,2014,硕士.
[17]韩玮.游戏地图寻路及其真实性研究[D].西南大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[18]罗雪.农村经济能人形成的影响因素研究[D].西南交通大学,行政管理,2014,硕士.
[19]李冠甲.干旱胁迫下不同冬小麦品种形态及生理性状差异[D].河南农业大学,作物栽培学与耕作学,2012,硕士.
[20]马大江.基于图像内容的结构相似性质量评价研究[D].西安科技大学,计算机软件与理论,2013,硕士.
[21]姜常玖.无机胶植筋式后锚固连接的抗火性能研究[D].山东建筑大学,防灾减灾及防护工程,2013,硕士.
[22]代圣.基于B/S模式下的阿坝州公务员培训信息系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程(专业学位),2012,硕士.
[23]陈纯纯.机构投资者持股对公司绩效的影响研究[D].浙江理工大学,企业管理,2013,硕士.
[24]李晓晔.媒介发展与乡村变革:一种现代化进程[D].南京大学,传播学(专业学位),2013,硕士.
[25]王娟,倪健.植物种分布的模拟研究进展[J].植物生态学报,2006,06:1040-1053.
[26]许欢欢.关于“危险驾驶”罪的反思[D].复旦大学,法律,2012,硕士.
[27]冯爱.灰飞虱对吡虫啉抗性的生理生化及分子机制研究[D].南京农业大学,农业昆虫与害虫防治,2013,硕士.
[28]张媚.战后台湾天主教研究(1949—2000年)[D].福建师范大学,专门史,2004,硕士.
[29]于锡兵.基于实物期权的PPP项目提前移交定价研究[D].西南交通大学,工业工程,2014,硕士.
[30]沈怡.基于ARM的便携式电表表头信息提取的系统设计[D].南京理工大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[31]韩同伟,贺鹏飞,王健,吴艾辉.空位缺陷对单层石墨烯薄膜拉伸力学性能的影响[J].同济大学学报(自然科学版),2010,08:1210-1214.
[32]谢洪明,应郭丽,陈盈,程宣梅.知识流出——连接外部环境与企业管理创新的桥梁[J].科学学研究,2012,11:1698-1706.
[33]周林远.大鼠去卵巢对骨代谢的影响研究[D].华中科技大学,公共卫生,2013,硕士.
[34]李彩云.大豆脂质转运蛋白基因GmLTP3的特征分析[D].郑州大学,作物(专业学位),2013,硕士.
[35]任晓律.表观遗传调控对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和基因表达的影响[D].内蒙古大学,动物学,2013,硕士.
[36]张勇.φ700mm超高功率石墨电极接头的研制[D].天津大学,化学工艺,2004,硕士.
[37]薄祥洁.金属纳米粒子/介孔碳复合材料制备及电化学应用研究[D].东北师范大学,2013.
[38]冯世明.潍坊市高新区征地拆迁与房屋安置管理系统的设计与实现[D].山东大学,软件工程(专业学位),2013,硕士.
[39]严耀东.我国家庭农场发展研究[D].浙江海洋学院,农村与区域发展(专业学位),2014,硕士.
[40]吴勇,聂凯轩,任金礼,秦建勋,李爱军,王建柱,李艳新.拓频技术在砂体预测中的应用[J].石油地球物理勘探,2011,S1:80-83+163+170.
[41]徐立秋.蛋白质复合体的模块度函数与识别算法研究[D].哈尔滨工业大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[42]李晓宁.重组牛生长激素注射于泌乳水牛后潜在生物靶标的研究[D].广西大学,预防兽医学,2014,博士.
[43]邓璐.出口贸易结构与货币国际化[D].吉林大学,世界经济,2014,硕士.
[44]李冬.CCK8对吗啡依赖及戒断SH-SY5Y细胞Arc/Arg3.1表达的影响[D].河北医科大学,法医学,2013,硕士.
[45]马丽慧.遂宁机场高填方边坡稳定性分析[D].成都理工大学,地质工程,2013,硕士.
[46]陈晓.室内环境下基于SLAM的仿人机器人自主行走的研究[D].燕山大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[47]唱飞.北京教育电视台双轨制下的人才聘用问题研究[D].中国地质大学(北京),公共管理,2013,硕士.
[48]赵仕钗.火电厂输煤栈桥抗连续倒塌性能研究[D].哈尔滨工业大学,防灾减灾工程及防护工程,2013,硕士.
[49]张海霞.速冻玉米解冻工艺的研究[D].吉林农业大学,粮食、油脂及植物蛋白工程,2012,硕士.
[50]杨波.基于GIS&RS的宝鸡市城市扩展研究[D].湖北大学,人文地理学,2011,硕士.

相关推荐
更多