脊髓CCR2调控CX3CR1表达致大鼠骨癌痛的作用机制

【摘要】目的鞘内注射CCR2的特异性拮抗剂RS102895后，观测骨癌痛大鼠机械痛阈值、脊髓背角细胞炎性因子表达和小胶质细胞增殖活性变化。方法将Walker256乳腺癌细胞注入大鼠左侧胫骨的骨髓腔内，构建骨癌痛模型。健康雌性未交配SD大鼠60只，体重约150~180g，随机分为5组（n=12）：假手术组（I组）、假手术+RS102895（II组）、骨癌痛组（III组）、骨癌痛+DMSO组(IV组)、骨癌痛+RS102895组（V组）。术后10~12d，鞘内连续注射RS102895（3μg/μl）或10%DMSO，每天一次，每次10μl。观测大鼠基础痛阈值，以及造模后3、6、9、10、11、12d各组大鼠的机械痛阈值。免疫组织化学法，检测脊髓背角小胶质细胞标识物（ox-42）的表达来观察脊髓小胶质细胞增殖活性变化。各组另取6只大鼠L4-6脊髓组织，采用ELISA法检测其炎性因子IL1-β、IL-6及TNF-α的表达情况。结果与I组或II组相比较，骨癌痛组(III、IV、V组)大鼠机械痛阈明显下降，脊髓背角小胶质细胞增殖明显增高并呈激活状态，ox-42平均光密度显著增加；IL1-β、IL-6及TNF-α表达明显增多(P<0.01)。与III组和IV组相比，V组鞘内注射RS102895后骨癌痛大鼠的机械痛觉阈值明显地提高(P<0.01)，并且脊髓小胶质细胞的活化显著被抑制，MOD值也明显降低，脊髓IL1-β、IL-6及TNF-α的表达降低(P<0.01)。结论鞘内注射CCR2特异性拮抗剂RS102895后可部分缓解骨癌痛大鼠的痛觉超敏，CCR2可能通过激活脊髓小胶质细胞并促进其释放炎性细胞因子而参与大鼠骨癌痛。目的观察鞘内注射CCR2特异性拮抗剂RS102895后，对骨癌痛大鼠脊髓磷酸化JNK及CX3CR1表达的影响。方法将健康雌性未交配SD大鼠60只，体重150~180g，随机分为5组（n=12）：假手术组（I组）、假手术+RS102895组（II组）、骨癌痛组（III组）、骨癌痛+DMSO组(IV组)、骨癌痛+RS102895组（V组）。将Walker256乳腺癌细胞注入大鼠左侧胫骨的骨髓腔内，构建骨癌痛模型。术后10~12d，鞘内连续注射RS102895（3μg/μl）或10%DMSO，每天一次，每次10μl。于术后12d给药后，免疫组织化学法来检测脊髓CX3CR1的表达变化情况采用。Western-Blot法测定大鼠脊髓CX3CR1及磷酸化JNK表达。结果与I组和II组相比，骨癌痛(III、IV、V组)大鼠CX3CR1阳性细胞数和蛋白表达量明显上调(P<0.01)；磷酸化JNK表达增加(P<0.01)。V组大鼠鞘内注射RS102895后，明显减少了脊髓CX3CR1阳性细胞数，明显降低了CX3CR1和磷酸化JNK的表达(P<0.01)。结论脊髓CCR2受体可通过调控CX3CR1受体的表达参与大鼠骨癌痛且这种调控作用可能是通过pJNK通路介导参与的。目的观察鞘内注射JNK抑制剂SP600125后，骨癌痛大鼠机械痛觉超敏及脊髓背角CX3CR1和MCP-1的表达变化。方法将Walker256乳腺癌细胞注入大鼠左侧胫骨的骨髓腔内，构建骨癌痛模型。健康雌性未交配SD大鼠50只，体重150~180g，随机分为5组（n=10）：假手术组（I组）、假手术+SP600125（II组）、骨癌痛组（III组）、骨癌痛+DMSO组(IV组)、骨癌痛+SP600125组（V组）。术后10~12d，鞘内连续注射SP60012510μg/10μl，1次/d，IV组鞘内注射等体积30%DMSO。测定大鼠基础痛阈值，及造模后3、6、9、10、11、12d分别观测各组大鼠机械痛阈。脊髓背角CX3CR1和MCP-1阳性细胞数采用免疫组织化学法来检测。采用Western-Blot法测定CX3CR1和MCP-1的表达。结果与对照组相比，骨癌痛组大鼠机械痛阈值明显下降，CX3CR1和MCP-1阳性细胞数明显升高，CX3CR1和MCP-1表达上调(P<0.01)。与III组和IV组相比，V组鞘内注射JNK抑制剂后骨癌痛大鼠的机械痛觉阈值明显曾高(P<0.01)，脊髓CX3CR1和MCP-1阳性细胞数明显减少，CX3CR1和MCP-1的表达降低(P<0.01)。结论鞘内应用JNK抑制剂后可部分减轻骨癌痛大鼠的痛觉超敏，骨癌痛大鼠脊髓CX3CR1和MCP-1的表达降低，JNK信号途径可通过调节脊髓背角CX3CR1和MCP-1的表达参与骨癌痛。
【作者】徐振华；
【导师】杨建平；
【作者基本信息】苏州大学，麻醉学，2014，硕士
【关键词】骨癌痛；CCR2；小胶质细胞；脊髓；细胞因子；c-Jun氨基末端激酶（JNK）；

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