PRRSV分离、序列分析及Annexin A2与Hsp27蛋白影响PRRSV感染的初步研究

【摘要】猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种世界范围的传染性猪病，其对全世界的养猪产业造成了巨大的经济损失。本研究对实验室保存的PRRS病料进行了分离纯化以及初步鉴定，确证获得了纯化的PRRSV毒株。同时，对2007~2012年在GenBank记录的89株爆发于中国地区的RPPSV进行了统计及分析，并将89株病毒的Nsp2和ORF5氨基酸序列与6株有代表性的疫苗株与病毒株序列进行遗传变异比对分析。结果表明，Nsp2蛋白中具有30个不连续氨基酸缺失特征的病毒株是HP-PRRSV主要的病毒类型。由于广泛的应用几种代表性疫苗，疫苗毒株与野毒株间的基因重组时有发生，重组分析显示，HH08、DY、YN-2010三株病毒与疫苗株有很高的相关性。而YN-2011和DY两株病毒均为SP及CH-1R的重组进化产物。这些研究结果对PRRSV流行病学的研究有一定意义，同时也为疫苗安全性的研究提供了依据。在PRRSV侵染Marc145过程中，HSP27和AnnexinA2蛋白可参与病毒粒子的组装过程，且PPRSV可能通过提高HSP27表达量，抑制病毒侵染早期的细胞凋亡，延长病毒复制时间增加子代病毒产量。本研究分别构建了HSP27和AnnexinA2蛋白下调表达的Marc145细胞系，经PRRSV感染后发现，与空白对照相比，2种细胞中产生的子代病毒TCID50有明显下降。这一结果为研究PRRSV侵染过程及HSP27和AnnexinA2调控机制奠定了基础，也为疫苗的研制提供了新的思路。
【作者】曹宇航；
【导师】张明军；
【作者基本信息】吉林大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】PRRSV；序列分析；Nsp2；GP5；AnnexinA2；HSP27；

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