外周血T细胞免疫功能与乙肝慢性化的相关性研究

【摘要】目的分析乙型肝炎病毒（HBV）感染患者不同时期外周血T细胞表面共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、Tim-3的表达量和T细胞相关细胞因子IL-4、IL-6、IFN-γ的水平，探讨其外周血T细胞免疫功能与乙肝慢性化的相关性。方法第一部分采用流式细胞术和定量PCR等技术测定42例慢性乙型肝炎（CHB）、30例乙型肝炎后肝硬化(LC)、30例肝癌(HCC)患者及30例健康对照(NC)外周血T细胞表面共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、Tim-3的表达量及T淋巴细胞亚群绝对值，并结合乙肝病毒DNA（HBVDNA）载量、乙型肝炎e抗原（HBeAg）和谷丙转氨酶（ALT）等检测结果作综合分析。第二部分采用ELISA检测42例CHB、30例LC、30例HCC患者及30例NC血清中IL-4、IL-6、IFN-γ的水平，并结合HBVDNA载量、HBeAg和ALT等检测结果作综合分析。结果第一部分CD4+CD28+组间表达量以NC组为最高[1213.95(994.95～1608.27)]，以LC组为最低[542.91(316.53～884.85)]，有统计学差异（H=34.358,P<0.001）；CD8+CD28+组间表达量以CHB组为最高[355.29(195.93～503.37)]，以LC组为最低[122.37(57.51～207.48)]，有统计学差异（H=37.229,P<0.001）；CD4+CTLA-4+组间表达量以NC组为最高[653.7(527.91～757.44)]，以LC组为最低[204.06(90.69～411.27)]，有统计学差异（H=23.765,P<0.001）；CD8+PD-1+组间表达量以CHB组为最高[18.06(4.14～36.21)]，以LC组为最低[4.47(2.16～10.68)]，有统计学差异（H=12.055,P=0.007）；CD4+Tim-3+组间表达量以CHB组为最高[380.64(123.48～723.75)]，以LC组为最低[145.95(78.33～272.73)]，有统计学差异（H=9.480,P=0.024）；CD8+Tim-3+组间表达量以CHB组为最高[145.95(78.33～272.73)]，以HCC组为最低[8.31(3.69～12.96)]，有统计学差异（H=33.647,P<0.001）。相关性分析显示：CD8+T细胞PD-1表达量与ALT浓度（r=0.690,P<0.01）、HBVDNA载量（r=0.730,P<0.01）均呈显著正相关；CD8+T细胞Tim-3的表达量与HBVDNA载量（r=0.578,P<0.01）呈显著正相关；CD8+T细胞PD-1与Tim-3的表达量也呈一定的正相关（r=0.363,P<0.01）。第二部分IL-4、IFN-γ、IL-6表达水平组间比较均有统计学差异（H值分别为：58.63、26.62、47.29,P值均<0.01）。经两两比较显示：三种分子的表达水平在CHB、LC和HCC组均显著高于NC组（P<0.05）；IL-4表达水平在CHB组显著高于LC、HCC两组（P<0.05）；IL-6表达水平在HCC组显著高于CHB、LC两组（P<0.05）；与NC组相比，IFN-γ/IL-4在CHB、LC和HCC组呈显著下降（H=9.63,P<0.05）。相关性分析显示：IL-4水平与HBVDNA载量呈显著正相关（r=0.757,P<0.001）；IFN-γ水平与HBVDNA载量、ALT浓度呈不同程度的负相关（r值分别为-0.786、-0.713,P值均<0.001）；三种细胞因子在乙肝慢性化患者血清中的浓度与HBeAg未见明显的相关性（P>0.05）。结论1.乙肝慢性化患者T细胞表面共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、Tim-3的表达量均出现了不同程度的改变，尤其是PD-1、Tim-3分子与HBVDNA载量和ALT浓度呈不同程度的相关性。提示在乙肝慢性化过程中伴随着CD28、CTLA-4、PD–1、Tim–3分子的表达量异常，尤其是对PD–1、Tim–3这两个分子表达量的监测能更好地反映乙肝慢性化患者的T细胞免疫功能。2.血清T细胞相关细胞因子IL-4、IL-6、IFN-γ水平的检测结果提示在乙肝慢性化患者体内存在Th2型细胞占优势的状态，这对疾病的治疗和疗效的观察提供了很好的依据。IL-6的水平在HCC组显著升高，这为接下来研究肝癌的发病机制提供了一定的线索。3.T细胞表面共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、Tim-3的表达量、血清T细胞相关细胞因子IL-4、IL-6、IFN-γ的水平，结合T细胞亚群绝对值分析可更好地反映乙肝慢性化患者T细胞免疫功能。HBVDNA载量和ALT可作为反映免疫功能的并行分析指标，以利于同时了解其HBV感染状态和肝功能状态。
【作者】王琳；
【导师】顾国浩；
【作者基本信息】苏州大学，临床检验诊断学，2014，硕士
【关键词】肝炎病毒；乙型；T淋巴细胞；免疫功能；

【参考文献】
[1]路天祥.7项临床常用指标预测卵巢储备功能价值的评估[D].广西医科大学,妇产科学（专业学位）,2013,硕士.
[2]张亚坤.战斗部热易损性影响因素的研究[D].中北大学,火炮、自动武器与弹药工程,2014,硕士.
[3]王勇.5164型载货汽车车架振动分析及减震研究[D].兰州理工大学,机械制造及自动化,2013,硕士.
[4]邵群涛.工业机器人中伺服驱动单元的选用[J].冶金自动化,1994,02:39.
[5]朱旭凯,刘文颖,杨以涵,汪隆臻.电网连锁故障演化机理与博弈预防[J].电力系统自动化,2008,05:29-33.
[6]武洪杰.我国民营上市公司股票期权激励现状与经营绩效分析[D].南京财经大学,企业管理,2012,硕士.
[7]张洪涛,宋强,刘钟淇,刘文华.±50Mvar链式STATCOM的实时数字仿真[J].电力系统自动化,2006,17:19-23.
[8]罗玉洁.基于高通量测序的中国甜柿microRNAs鉴定及分析[D].华中农业大学,园艺学,2014,硕士.
[9]孙嘉.现代造船电子海关系统的建模与实现[D].上海交通大学,软件工程,2013,硕士.
[10]袁柳.CRM中数据挖掘应用策略及其关键技术的研究[D].西安电子科技大学,2004.
[11]李多.目的论视角下《论语》两种译本的翻译策略与译法研究[D].吉林大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[12]王闫超.川滇菱形地块构造应力场数值模拟研究[D].长安大学,地质工程,2014,硕士.
[13]郑红.东北温带土地利用变化对土壤团聚体稳定性及有机碳组分的影响[D].东北林业大学,森林培育,2014,博士.
[14]田园.济南市地下水资源调查及开发应用研究[D].山东大学,水利工程（专业学位）,2013,硕士.
[15]孙正东.现代农业产业化联合体运营效益分析——一个经验框架与实证[J].华东经济管理,2015,05:108-112.
[16]白胜芳.国外绿色建筑对中国的启示[J].绿色中国.2005(10)
[17]徐海巍.开洞建筑风致内压响应的理论和试验研究[D].浙江大学,结构工程,2014,博士.
[18]胡文婷.明清之际西学汉籍书目研究初探[D].北京外国语大学,比较文学与世界文学,2013,硕士.
[19]宋泽明.基于VHDL语言的单片机设计[D].北京工业大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[20]谢龙燕.董事会结构及能力对创业板企业并购决策的影响[D].重庆大学,技术经济及管理,2014,硕士.
[21]胡磊.湖南烈士公园游憩景观生态适宜性评价研究[D].中南林业科技大学,园林植物与观赏园艺,2013,硕士.
[22]奥群拉毛.近代以来环青海湖地区的蒙语地名研究[D].西藏大学,中国少数民族史,2014,硕士.
[23]杨合民,路小俊,王军,刘敏军,张建华.一种适用于串联电网接线的远方备自投装置[J].电力系统自动化,2011,20:94-97.
[24]王宏琳.CYBER地震系统软件改进[J].石油地球物理勘探,1980,01:85-93.
[25]徐春鹏.基于当代中国贸易视角的话语权途径研究[D].安徽大学,国际商务,2014,硕士.
[26]汤稚音.南海北缘陆相盆地白垩系沉积学与地球化学特征研究[D].中国地质大学（北京）,海洋地质,2014,硕士.
[27]赵尤成.铜基石墨烯纳米复合材料的调控制备及性质研究[D].山东大学,无机化学,2013,硕士.
[28]姚尧.户外广告与城市环境设计的互融性研究[D].东北师范大学,新闻学,2012,硕士.
[29]徐勇,陈增强,袁著祉.Delta算子系统的全程滑模变结构控制[J].控制与决策,2005,06:686-688+693.
[30]马金艳.我国个税递延型养老保险运营的三大矛盾研究[D].首都经济贸易大学,保险（专业学位）,2014,硕士.
[31]王吉博.增强或减弱GJIC对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响[D].遵义医学院,骨外科学,2012,硕士.
[32]马丽.乙烯基吡咯烷酮均聚物与共聚物的制备新方法研究[D].合肥工业大学,材料学,2003,硕士.
[33]李思莹.论肌理表现在水彩绘画中的作用[D].沈阳师范大学,美术,2014,硕士.
[34]朱翠霞.青年创业者心理资本、创业环境与创业绩效的关系研究[D].鲁东大学,应用心理学,2014,硕士.
[35]王雪蕾.基于生命周期理论的佛山照明股利分配政策研究[D].内蒙古大学,会计,2014,硕士.
[36]赵勇,韩平,王洪涛,石光.利用IEC61850实现继电保护远程校验[J].电力系统自动化,2010,03:63-65+74.
[37]刘彦慈.中草药饲料添加剂对肉仔鸡生产性能及肉质风味的影响[D].河北农业大学,动物营养与饲料科学,2004,硕士.
[38]王彦卿.中国投资与经济增长关系的实证研究[D].天津财经学院,金融学,2004,硕士.
[39]陈亮.基于H.264无线视频传输的码率控制算法研究及实现[D].扬州大学,信号与信息处理,2012,硕士.
[40]王胜辉.变压器局部放电在线监测高速数据采集系统的研究[D].华北电力大学（河北）,高电压与绝缘技术,2004,硕士.
[41]夏庆.外国留学生习得复合趋向补语偏误分析[D].苏州大学,汉语国际教育（专业学位）,2013,硕士.
[42]彭伟.面向云计算安全的同态加密技术应用研究[D].重庆大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[43]胡勇,陈智君,王梁,姚建华.静态磁场对激光熔池传热及流动行为的调控作用数值模拟[J].应用激光,2014,06:508-512.
[44]王传琦.高氨氮工业废水处理中试研究[D].苏州科技学院,市政工程,2012,硕士.
[45]陈思宝,赵令,罗斌.基于局部保持的核稀疏表示字典学习[J].自动化学报,2014,10:2295-2305.
[46]张念.中国特有小型猪内源性反转录病毒检测及变异特征研究[D].吉林大学,预防兽医学,2013,硕士.
[47]苏伟.基于时空关联性的无线传感器网络网关异常检测研究[D].上海大学,控制理论与控制工程,2014,博士.
[48]杨焘.钻井液用耐高温改性淀粉的合成与应用研究[D].济南大学,高分子化学与物理,2012,硕士.
[49]王海树.我国图书馆RFID技术应用研究[D].安徽大学,图书情报,2014,硕士.
[50]许培俊,丛培良,高昭,杜敏,王志鹏.石墨烯-超支化聚硼酸酯改性苯并噁嗪树脂[A].中国化学会高分子学科委员会.2013年全国高分子学术论文报告会论文摘要集——主题L：高性能树脂[C].中国化学会高分子学科委员会:,2013:1.