ODN MTO1对Pg感染小鼠单核/巨噬细胞内炎性相关因子mRNA表达的影响

【摘要】牙周病所致的牙槽骨吸收是成人缺失牙的首要原因，也是人类最为常见的骨破坏性疾病之一。其危害不仅影响咀嚼，发音等基本功能，而且也使患者的生活质量受到严重影响。积极提高牙周疾病预防和诊治水平是当前口腔专业人士面临的艰巨任务和历史使命。近年研究发现，牙周病作为一种慢性感染性疾病，其牙周致病菌激发的牙周固有免疫应答可造成牙周组织破坏，引发骨吸收。研究证实，炎性小体NLRP3作为天然免疫的重要组成部分与牙周病的发生发展有密切关系。因此研究牙周病骨吸收机制，针对其发病机理，将寻找抑制牙槽骨吸收，促进牙槽骨形成作为研究靶点，进而调控该靶点的微环境对于牙周病的防治具有重要意义。ODN（oligodcoxynudeotides）是含20—50个核苷酸单体的多核苷酸链。在DNA或RNA的降解产物中存在有以ODN形式的核苷酸链,其无需另行构建载体，即可通过受体介导的方式被细胞摄取进而发挥作用。由于ODN可以人工设计合成并进行修饰，化学性质稳定，人工合成的ODN与细菌DNA相似，可快速进入免疫细胞，激活体内免疫系统，从而诱导快速的抗感染免疫应答。经磷酸硫代化修饰的ODN可抵抗核酸酶的消化作用，可在保持体内稳定性的同时增加细胞内摄取率。基于ODN具有高效低毒﹑易于合成且化学性质稳定的特性，因此成为近年来免疫学等基础医学领域的研究热点。方法：选取小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7为目的细胞，RAW264.7细胞，复苏，常规培养，传代，以一定数量接种于6孔板中。待12小时细胞完全贴壁后，换无血清的培养液饥饿24小时。分别与Pg，MT01，Pg+MT01，PBS（按细菌100:1的感染复数，MT01的工作浓度1μg/ml分别制成不同的混合液）分别培养6个小时。Real-timePCR检测NLRP3﹑IL-18﹑IL-1β﹑Caspase-1mRNA的表达。结果：与PBS组相比较，NLRP3mRNA的表达在MT01组最低(P＜0.05)，Pg组最高(P＜0.01)，Pg+MT01组高于PBS组，但低于Pg组(P＜0.01)。而其他相关炎性因子：IL-18﹑IL-1β﹑Caspase-1mRNA的表达在Pg+MT01组显著低于PBS对照组(P＜0.01)。结论：MT01可抑制Pg感染导致的NLRP3等相关炎性因子mRNA的表达。
【作者】郭恪；
【导师】林崇韬；
【作者基本信息】吉林大学，口腔临床医学，2014，硕士
【关键词】ODNMT01；炎性小体；牙龈卟啉单胞菌；小鼠单核/巨噬细胞；

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