B-Raf~(V600E)选择性抑制剂的设计、合成及生物活性研究

【摘要】蛋白激酶又称蛋白质磷酸化酶，是一类能使蛋白质磷酸化的酶。它在细胞信号转导通路中具有重要的作用，参与调控细胞增殖、生长。促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路是细胞内最重要的信号通路之一，其中Ras-Raf-MEK-ERK信号级联因其在人类癌症形成中起到重要作用而受到广泛关注。B-Raf是Raf激酶家族成员之一，与A-Raf和C-Raf相比，B-Raf的基础激酶活性更高且更易激活。近来年的研究表明，多种人类肿瘤，如黑色素瘤、结肠癌、甲状腺癌等恶性肿瘤都与B-Raf的突变体有关。而最常见的B-Raf突变发生在其活性区域的600位氨基酸残基，即谷氨酸取代缬氨酸（B-RafV600E）。B-Raf激酶在肿瘤中突变率非常高，人类癌症中约有7%-8%会发生B-Raf突变。目前已确定B-Raf激活的体细胞在黑色素瘤的突变率约为66%、甲状腺癌中为35-70%、结肠癌中为5-20%、卵巢癌中为30%。并且B-RafV600E激酶活性要比野生型B-Raf高近500倍。因此，B-RafV600E已成为研究人类癌症重要靶标之一。本文通过对本课题组已有的小分子化合物进行活性筛选得到化合物7-（6-甲基-1-（4-甲基-3-三氟甲基-苯基氨基）异喹啉-5-乙炔基）-喹唑啉-2-胺（30），抑制体外激酶B-RafV600E的IC50值为0.352μM，经化学结构检索该分子骨架为新型化合物骨架，故将其作为先导化合物进行结构修饰，设计并合成一系列新型选择性B-RafV600E激酶抑制剂。本文从简单易得的原料出发，共合成全新化合物21个，揭示了该类分子的构效关系，并对优化得到的化合物进行了体外激酶抑制实验和体外细胞抑制增殖实验，初步地研究了该类化合物抗肿瘤的效果。优选出化合物（3-氯苯甲基）-（6-甲基-5-（1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-乙炔基）异喹啉-1-基）胺（40）对体外激酶B-RafV600E和肿瘤细胞COLO205和NCI-H460的IC50值分别为8.9nM、1.92μM、0.88μM。本文为今后进一步优化该类化合物奠定基础，并且为发现活性更高的B-RafV600E选择性抑制剂提供参考依据。
【作者】孔德新；
【导师】杨晓虹；
【作者基本信息】吉林大学，药物化学，2014，硕士
【关键词】B-RafV600E；抑制剂；设计；合成；

【参考文献】
[1]冯云.1066-1290期间英国血祭诽谤产生的原因[D].四川外国语大学,英语语言文学,2014,硕士.
[2]马达.可逆式水泵水轮机叶片包角对性能影响的研究[D].兰州理工大学,流体机械及工程,2013,硕士.
[3]李震.莆田农村商业银行品牌建设研究[D].华侨大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[4]朱乾娜.我国微课程论文内容分析研究[J].软件导刊,2014,03:197-199.
[5]张纹.基于纳米材料构建的生物传感器应用于多组分小分子检测的研究[D].西南大学,无机化学,2014,硕士.
[6]张保.工商银行G分行公司信贷业务风险管理研究[D].兰州大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[7]倪慧芳.中美企业组织结构特性比较研究[D].内蒙古财经大学,企业管理,2012,硕士.
[8]田劼.低碳经济背景下湖南农村消费研究[D].中南林业科技大学,农村与区域发展,2012,硕士.
[9]刘锋利.拉弯机液压系统故障诊断研究[D].西北工业大学,航空宇航制造工程,2004,硕士.
[10]赵兢兢.基于群智能算法的发酵控制及优化[D].江南大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[11]赵明华.模糊决策树产生过程中参数的敏感性分析[D].河北大学,计算机应用,2003,硕士.
[12]淦文燕,李家福,李德毅.高维聚类中的一种特征筛选方法[J].解放军理工大学学报(自然科学版),2003,06:1-5.
[13]张学君,钟建华,刘刚,郭万有.热轧卷板机成形辊压紧力的确定[J].一重技术.1999(01)
[14]宋岑.企业培训评估的全程评估方案设计[D].上海外国语大学,教育技术,2012,硕士.
[15]王常燕.基于erp的智能排产系统的研究与实现[D].燕山大学,计算机应用技术,2012,硕士.
[16]陈玲.清代龙袍所象征的精神世界[D].武汉纺织大学,美学,2014,硕士.
[17]李静静.类似必要共同诉讼研究[D].浙江大学,诉讼法学,2012,硕士.
[18]张齐.德彪西和他的音乐世界[D].河北大学,2002,硕士.
[19]刘剑历.洪河农场农业科技园区发展策略研究[D].黑龙江八一农垦大学,农村与区域发展,2014,硕士.
[20]樊荣.M/M/n模型的高负荷极限及仿真[D].长安大学,应用数学,2014,硕士.
[21]何晓云.砌体填充墙RC框架微观与宏观有限元模拟及抗震性能分析[D].哈尔滨工业大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[22]彭玉静.《花月痕》研究[D].鲁东大学,中国古典文献学,2013,硕士.
[23]张明生,陈梅.一个基于Web的数据挖掘集成应用系统的设计及实现[J].四川理工学院学报(自然科学版),2005,02:15-17.
[24]任丽娜.服务理念下的政府绩效评估研究[D].燕山大学,行政管理,2012,硕士.
[25]吴森.菏泽牡丹文化博物馆建筑改造及室内设计浅析[D].山东工艺美术学院,艺术设计,2014,硕士.
[26]王有禄.Android系统的智能手机木马攻防机制的分析[D].广东工业大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[27]杨丹.塑造我国商业银行的核心竞争力[D].广西大学,2004.
[28]高洁.金融诈骗罪若干问题的研究[D].华东政法大学,法律（专业学位）,2012,硕士.
[29]邹玉珠.家庭社会经济地位与大学生英语学习动机相关性调查研究[D].南京航空航天大学,课程与教学论,2013,硕士.
[30]石玉洪.钒酸钙真接合金化的研究[J].四川冶金.1989(01)
[31]夏秀明.网络教育信息资源动态发展的知识节点研究[D].华中师范大学,教育技术学,2013,硕士.
[32]胡志春.Sr_2CeO_4系列发光材料的水热法合成及其性能研究[D].河北大学,无机化学,2014,硕士.
[33]郭艳艳.新疆高校少数民族大学生中华文化认同教育的现状及其对策[D].新疆大学,马克思主义理论,2013,硕士.
[34]ManyallengLauraMacheli（劳拉）.莱索托国家大学生抑郁和焦虑方式的现状[D].东北师范大学,应用心理学,2012,硕士.
[35]张业锋.津市电网无功补偿与效益分析[D].湖南大学,电气工程,2014,硕士.
[36]梁波.沈阳市房产管理部门绩效考评制度改进对策研究[D].沈阳师范大学,公共管理,2013,硕士.
[37]李进.湖南省经建投公司员工行为及其管理对策研究[D].湖南大学,工商管理,2003,硕士.
[38]李雨新.Fe-Mn-Si记忆合金对纤维增强复合材料梁驱动效应研究[D].大连海事大学,机械电子工程,2013,硕士.
[39]潘涛.农民工社会保险权益缺失问题研究[D].上海工程技术大学,社会保障,2012,硕士.
[40]张彦.正交频率方的组合构造和新的下界表[D].苏州大学,应用数学,2003,硕士.
[41]罗健旭,张兆宁,邵惠鹤.应用基于粗集的模糊神经网络进行软测量建模的研究[J].化工自动化及仪表,2003,02:14-18.
[42]张鹏飞.离心压缩机喷水湿压缩的应用研究[D].东北大学,动力工程,2010,硕士.
[43]宫健.卟啉和混杂卟啉环内氢迁移过程及其与金属配位光谱性质的理论研究[D].大连大学,物理化学,2014,硕士.
[44]张臻.天成锦江苑工程施工组织研究[D].燕山大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[45]魏红军.稀土永磁同步电机电抗参数测试与研究[D].沈阳工业大学,测试计量技术及仪器,2003,硕士.
[46]孙洁丽.上海市基础教育“体教结合”后备体育人才培养模式的研究[D].华东师范大学,体育人文社会学,2013,硕士.
[47]罗惠予.毒品犯罪若干疑难问题研究[D].郑州大学,法律（专业学位）,2013,硕士.
[48]宋源镇.在华外资特许经营企业成功因素研究[D].复旦大学,企业管理,2011,博士.
[49]袁晓星.电解铝低碳生产综合成本效益分析模型研究[D].北方工业大学,会计学,2013,硕士.
[50]王平,郭继峰,史晓宁,崔乃刚.服务航天器近距离操作四维运动规划方法研究[J].控制与决策,2010,10:1519-1522.