microRNA在猪多能干细胞成脂分化过程中的作用研究

【摘要】随着小鼠和人诱导性多能干细胞（iPSCs）细胞系的建立，已有多项研究表明利用这种新兴的体细胞重编程技术在许多物种都获得了成功。iPSCs技术相对容易操作，重复性好，且能够避免由胚胎干细胞（Embryonicstemcells，ES）带来的伦理道德问题，因而具有良好的研究前景和应用价值。作为哺乳动物，猪与人类在器官形态、大小、功能等方面均具有相似的生理指标。对于猪胚胎干细胞（pESCs）的研究已有二十年的历史，然而由于对谱系决定因子及猪早期胚胎发育的调控机制所知甚少，单纯的照搬啮齿类及灵长类动物的ES建立方法，并不完全适用于猪这个品系。因而目前，尚未建立起纯系的猪ES系。而大鼠iPSCs的成功获取，是在未成功建立ES细胞系之前利用iPSCs技术建立多能干细胞系的成功范例，这将干细胞领域的研究带到了一个崭新的时代。本研究选用猪胎儿成纤维细胞作为供体细胞，通过逆转录病毒介导鼠源Oct4，Sox2，Klf4及c-Myc（OSKM）四个调控因子，优化培养条件进行诱导重编程，成功建立猪诱导性多潜能干细胞（piPSCs）系，通过检测所得piPSCs不仅具有多潜能基因的表达，体外形成拟胚体的能力，且当注入裸鼠皮下，可形成包含三个胚层的畸胎瘤，证明其体内同样具有多向分化的潜能。MicroRNAs是一类长约22nt的非编码小RNA，通过与靶mRNA互补配对将其降解或抑制翻译而在转录后水平调控基因表达。miRNAs在癌症、心血管疾病及糖尿病研究中显示极为重要的生物学功能，在细胞的增殖、分化、分泌和凋亡等活动中起着重要调节作用。研究显示大量miRNAs也参与机体发育及脂肪细胞分化的调节，但对于猪多潜能干细胞成脂分化这一路径的研究鲜有报道。本研究以iPSCs及BMSC两种多能干细胞作为研究对象，通过在体外向脂肪方向分化，可为进一步模拟体内脂肪细胞的行程与修复，了解更多miRNA在脂肪细胞分化中的功能，加深对动物脂肪形成分子机制的理解提供理论依据。
【作者】马奎莹；
【导师】李子义；
【作者基本信息】吉林大学，动物学，2014，硕士
【关键词】microRNAs；iPSCs；BMSC；脂肪细胞；成脂分化；猪；

【参考文献】
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