PCV2b病毒样颗粒疫苗的制备及检测

【摘要】为了研制病毒样颗粒（VLP）疫苗，我们以猪圆环病毒衣壳蛋白（PCV2b-CP）为模型搭建VLP疫苗制备和检测的技术平台。采用PCR搭接方法获得密码子优化的PCV2b-CP编码基因，并以PET28a为表达载体尝试在大肠杆菌内可溶性表达PCV2b-CP。采用多种方法对PCV2b-CP的纯化及组装进行摸索同时使用透射电子显微镜（TEM）和荧光光谱分析（FSA）两种方法对VLPs的组装状态进行检测，并对形成的VLPs的抗原性及免疫学活性进行了研究。结果显示：经大肠杆菌表达的可溶性PCV2b-CP可形成与天然病毒相似的VLPs且组装液成分影响VLPs的组装状态；PCV2bVLP能够有效诱导小鼠产生PCV2b特异性抗体，具有开发成PCV2b疫苗的潜能；FSA检测不同组装状态的VLPs发现：组装的PCV2bVLPs的发射光谱显示为在320nm处有最高值的非典型曲线，虽FSA不能取代TEM，但其可作为初步检测是否形成VLP的一种简便而快速的技术手段。
【作者】刁文真；
【导师】万敏；
【作者基本信息】吉林大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】病毒样颗粒；PCV2b；衣壳蛋白；疫苗；荧光质谱分析；检测；

【参考文献】
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