玉米胚性愈伤发生相关基因ZmKHCP和ZmTypA的功能研究

【摘要】玉米是世界上最重要的粮食作物之一，具有粮食、工业原料、饲料等多种用途。随着玉米在人民生活中的地位越来越重要，常规育种方法对玉米品种的改良已经远远不能满足人们对高品质玉米的需求。转基因技术为玉米的遗传改良提供了一条新途径，它能利用优良基因弥补玉米某些遗传资源的不足，并丰富种质库。理想的受体系统是提高转基因效率的关键之一，玉米胚性愈伤组织是理想的受体材料。因此，深入研究胚性愈伤发生的分子机理，并探究胚性愈伤发生相关基因的功能，对良好受体系统的建立具有重要意义。ZmKHCP和ZmTypA是玉米自交系H99的胚性愈伤发生相关基因，本实验以pCAMBIA3301质粒为基础载体，构建了两个植物表达载体pCAMBIA3301-35S:ZmKHCP-Term和pCAMBIA3301-35S:ZmTypA-Term。通过农杆菌浸染拟南芥的方法，获得了转ZmKHCP基因和转ZmTypA基因的T2代植株。然后诱导转基因拟南芥的愈伤组织，结果表明，转ZmKHCP基因的拟南芥，在诱导20d后形成愈伤组织，比野生型拟南芥提早形成愈伤组织，说明ZmKHCP基因在一定程度上能促进愈伤组织的形成；转ZmTypA基因的拟南芥诱导愈伤组织过程与野生型相比无明显差异。成功克隆出ZmKHCP基因启动子，并构建植物表达载体PBI121-pZmKHCP；通过农杆菌浸染拟南芥的方法获得转基因植株。对转ZmKHCP基因启动子的植株做GUS组织学染色，结果表明GUS基因在植株的根、茎、叶部位都有表达。同时成功构建缺失启动子的植物表达载体pZmKHCP1185-3301，pZmKHCP705-3301，pZmKHCP354-3301，为进一步分析ZmKHCP基因启动子的核心区域奠定了基础。运用统计学方法观测拟南芥AtKHCP基因突变体和拟南芥AtTypA基因突变体与野生型的表型差异，结果表明：AtKHCP突变体的株高、叶片宽度同野生型相比有极显著差异；AtTypA突变体的叶片长度同野生型相比有显著差异。
【作者】贾晓菲；
【导师】韩俊友；
【作者基本信息】吉林大学，植物学，2014，硕士
【关键词】玉米；胚性愈伤组织；ZmKHCP；ZmTypA；转基因；

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