竹笋多糖对免疫抑制中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）免疫调节作用的研究

【摘要】为探索中华绒螯蟹免疫抑制实验模型建立的条件和方法，以0、5、10、20mg/kg体质量的环磷酰胺和0、50、100、200mg/kg体质量的氢化可的松对中华绒螯蟹进行体腔注射，每5d注射1次，共注射3次。在第3次注射结束后的第1、4、7d采样测定相关免疫指标，并在第4d时用致病性嗜水气单胞菌CL99920菌株按1.2×107cfu/kg体质量的剂量对试验蟹进行体腔注射攻毒，记录7d后的累积死亡率。结果显示：(1)以5、10、20mg/kg体质量的环磷酰胺或50、100、200mg/kg体质量的氢化可的松注射中华绒螯蟹，均能显著降低其大多数免疫指标的活性并损伤其肝胰腺组织，相比之下，以10mg/kg体质量的环磷酰胺和100mg/kg体质量的氢化可的松的作用效果较好。(2)与对照组相比，注射10mg/kg体质量的环磷酰胺能显著降低中华绒螯蟹的血细胞总数(THC)、血细胞吞噬百分率(PP)和呼吸爆发活性(P<0.05)；显著降低血清酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(ALP)活性(P<0.05)；显著降低肝胰腺SOD、ACP及ALP活性(P<0.05)；显著提高肝胰腺丙二醛(MDA)含量(P<0.05)；对血细胞吞噬指数(PI)的影响不显著(P>0.05)；嗜水气单胞菌攻毒后，以10mg/kg组和20mg/kg组的累积死亡率最高。(3)与对照组相比，注射100mg/kg体质量的氢化可的松能显著降低中华绒螯蟹的THC、血细胞PP、PI和呼吸爆发活性(P<0.05)；显著降低血清PO、POD、LSZ、ACP及ALP活性(P<0.05)；显著降低肝胰腺SOD、ACP和ALP活性(P<0.05)；显著提高肝胰腺MDA含量(P<0.05)；对血清SOD的影响无明显的规律；嗜水气单胞菌攻毒后，以100mg/kg组的累积死亡率最高。由此表明，以10mg/kg体质量的环磷酰胺和100mg/kg体质量的氢化可的松对中华绒螯蟹进行体腔注射，每5d注射1次，共注射3次，均能成功地建立中华绒螯蟹免疫抑制模型。为考察竹笋多糖对环磷酰胺所致免疫抑制中华绒螯蟹免疫功能的调节效果，试验设对照组、自然恢复组和多糖恢复组3个处理组，对照组注射灭菌生理盐水，两个造模组以10mg/kg体质量的环磷酰胺进行体腔注射，每5d注射1次，共注射3次，造模期间所有处理组均投喂基础饲料；从试验开始后的第12d开始，多糖恢复组改投喂含2g/kg竹笋多糖的饲料12d。在多糖恢复组投喂含竹笋多糖的饲料的第0、3、6、12d采样测定相关免疫指标。结果显示：(1)第0d，自然恢复组和多糖恢复组的血细胞总数、呼吸爆发活性、血清一氧化氮合酶(NOS)、PO、POD、LSZ、SOD、ACP、ALP活性、肝胰腺SOD、ALP活性及T-AOC均显著低于对照组(P<0.05)，同时肝胰腺MDA含量显著高于对照组(P<0.05)，血清T-AOC和肝胰腺ACP活性也在第3d显著低于对照组(P<0.05)，表明免疫抑制中华绒螯蟹造模成功。(2)中华绒螯蟹血细胞呼吸爆发活性可在第3d、血清NOS活性可在第6d自然恢复至对照组水平；THC、血清POD、ALP活性可在第12d自然恢复至对照组水平；血清PO、LSZ、SOD、ACP活性和T-AOC，肝胰腺SOD、ACP、ALP活性、T-AOC及MDA含量不能在第12d自然恢复至对照组水平(P<0.05)。(3)投喂含2g/kg竹笋多糖的饲料12d，可完全恢复环磷酰胺诱导降低的中华绒螯蟹的THC、血细胞呼吸爆发活性，血清NOS、PO、POD、SOD、ACP、ALP活性、T-AOC，肝胰腺ACP活性及T-AOC，完全恢复肝胰腺MDA含量，其中，THC、血清NOS、POD、ACP、ALP活性及肝胰腺T-AOC显著高于对照组(P<0.05)，MDA含量显著低于对照组(P<0.05)；可部分恢复血清LSZ、肝胰腺SOD和ALP活性，即：12d时上述3个指标的活性显著高于自然恢复组，但仍显著低于对照组(P<0.05)。由此表明，饲料添加2g/kg的竹笋多糖对环磷酰胺所致免疫抑制中华绒螯蟹的免疫功能具有良好的调节效果。
【作者】王玉芬；
【导师】李义；
【作者基本信息】苏州大学，水产养殖，2014，硕士
【关键词】竹笋多糖；中华绒螯蟹；氢化可的松；环磷酰胺；免疫抑制；免疫调节；

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