糖皮质激素受体参与应激状态下脑内Ahi1蛋白水平的调节

【摘要】目的：观察地塞米松诱导的抑郁模型中Ahi1/Hap1复合体和糖皮质激素受体（glucocoticodreceptor，GR）的含量变化，从而探讨在应激状态下，GR对Ahi1蛋白水平的调节作用。方法：成年雄性ICR小鼠（体重25-30g）随机分为2组，对照组和实验组。对照组（Con组）予以生理盐水注射；实验组（DEX组）每天09:00-10:00皮下注射地塞米松注射液1mg/kg，连续21天，建立小鼠抑郁模型。3周后采用悬尾实验、强迫游泳实验等行为学检测验证动物模型诱导的成功。采用Westernblot法测定Ahi1、Hap1、GR蛋白表达水平的变化及RT-PCR方法测定Ahi1mRNA水平的表达水平变化。为进一步探讨GR对Ahi1蛋白表达的改变，应用地塞米松20mmol/l处理PC12细胞72小时，观察PC12细胞内Ahi1蛋白的表达，并采用核浆分离方法测定细胞浆和细胞核内GR蛋白表达水平的变化。结果：行为学结果表明与对照组相比，DEX组小鼠悬尾静止时间、游泳静止时间明显延长，糖水偏好实验糖水摄入量明显减少（P＜0.05），提示地塞米松诱导的抑郁模型建立成功。Westernblot结果证实：与Con组相比，DEX组GR表达水平均明显下调（P＜0.05）：进一步研究显示，与Con组相比，DEX组Ahi1表达水平与Hap1表达水平均明显下调（P＜0.05）；而RT-PCR结果表明Ahi1mRNA水平DEX组较对照组无明显改变（P＞0.05）。免疫共沉淀实验证实Ahi1能够与GR相互作用。为证实Ahi1的改变与地塞米松处理后GR的改变相关，在PC12细胞内也观察到地塞米松处理后GR表达和Ahi1表达的减少（P＜0.05）。地塞米松处理后GR从胞浆内向胞核转移，提示GR的核转移可能与胞浆内Ahi1的稳定性有关。结论：地塞米松处理可能通过下调GR表达水平，增加GR由胞浆到胞核的转移，减少GR与Ahi1的相互作用，可能导致胞浆中的Ahi1/Hap1复合体不稳定而降解，从而降低Ahi1蛋白的水平。
【作者】翟丽敬；
【导师】徐兴顺；
【作者基本信息】苏州大学，神经病学，2014，硕士
【关键词】糖皮质激素受体；应激；Ahi1蛋白；

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