半胱氨酰白三烯受体对BV2细胞吞噬功能的调节作用

半胱氨酰白三烯受体对BV2细胞吞噬功能的调节作用

作者:师大云端图书馆 时间:2018-01-03 分类:参考文献 喜欢:2193
师大云端图书馆

【摘要】目的:观察半胱氨酰白三烯(CysLT)受体(CysLT1R和CysLT2R)对小鼠BV2小胶质细胞吞噬功能的调节作用,并初步探讨CysLT受体两种亚型之间是否存在相互作用。方法:1.采用CysLT受体激动剂(LTD4和NMLTC4)和小胶质细胞激活剂(LPS和IFN-γ)作用一定时间,以免疫荧光法和流式细胞术检测BV2细胞吞噬功能的变化。2.CysLT1R选择性拮抗剂montelukast和CysLT2R选择性拮抗剂HAMI3379预处理30min后,检测对激动剂或激活剂引起的吞噬功能变化的作用。3.以Westernblotting法检测LPS和IFN-y引起的CysLT1R及CysLT2R表达的变化,以及montelukast和HAMI3379对LPS引起的表达变化的影响。4.以免疫荧光共染法检测(?)CysLT受体激动剂LTD4和NMLTC4以及LPS是否引起CysLT1R和CysLT2R分布的变化;在确定的作用时间点,用激光共聚焦显微镜进行初步验证。结果:1.免疫荧光法和流式细胞术都表明,CysLTs受体激动剂LTD4和NMLTC4以及小胶质细胞激活剂LPS和IFN-γ,均增强BV2细胞吞噬功能。2.Montelukast和HAMI3379能对抗BV2细胞吞噬功能的增强。Montelukast(0.1μmol/L)和HAMI3379(1μmol/L)均显著抑制LTD4诱导的吞噬增强;montelukast(0.1-1μmol/L)和HAMI3379(1μmol/L)均明显抑制NMLTC4诱导的吞噬增强,且montelukast作用强于HAMI3379.Montelukast和HAMI3379(1μmol/L)均显著抑制小胶质细胞激活剂LPS诱导的吞噬增强。3.LPS和IFN-γ均上调BV2细胞的CysLT1R和CysLT2I表达,其中,IFN-y使CysLT1I表达仅有增加趋势,而CysLT2I表达明显增加;LPS显著增加CysLT1R和CysLT2R的表达,且该作用能被montelukast和HAMI3379所拮抗。4.BV2细胞激活导致CysLT1R和CysLT2R分布的变化,CysLT1R与CysLT2I存在共定位,激活后发生内移的特点与时间基本一致。结论:1.CysLT1R和CysLT2R共同参与BV2细胞激活的调节,表现为细胞吞噬功能增强以及CysLT1R和CysLT2I滚达增加,特异性拮抗剂使用后上述现象被逆转。2.CysLT1R和CysLT2R之间可能存在的相互作用,但需进一步研究确定。
【作者】王晓蓉;
【导师】魏尔清;
【作者基本信息】浙江大学,药理学,2014,硕士
【关键词】半胱氨酰白三烯受体;BV2小胶质细胞;吞噬;脂多糖;IFN-γ;montelukast;HAMI3379;

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