细菌群体感应信号分子合成酶AmbB的结构生物学研究

【摘要】随着临床上抗生素的广泛使用,细菌已出现耐药性,因此寻找新的抗感染途径已成为当今研究的热点。群体感应(quorumsensing,QS)作为细菌间传递信号的重要方式,可释放自诱导物分子来调控多种毒力因子的释放以及细菌的致病性。如今,QS已经成为新型、抗耐药菌药物设计的重要靶标,因该药物不影响细菌生长只抑制QS调控的致病行为,理论上不会引起细菌的耐药性。铜绿假单胞菌是一种可引起呼吸道感染、肺炎等疾病的条件致病菌,其存在三种基于信号分子的QS系统：las、rhl和pqs系统。其中,las系统处于核心地位,它可以调控rhl和pqs的基因表达。但是,随着对铜绿假单胞菌QS系统的深入研究发现,las在群体感应调节中的核心地位并不是绝对的。研究显示非核糖体肽合成酶AmbB参与合成一种新型QS信号分子IQS,它在环境压力下(如低磷环境)取代las进而对rhl、pqs系统进行调控。本论文拟通过生物化学的方法,结合X射线晶体学的研究手段对AmbB蛋白的C端结构域进行研究,以期从结构生物学角度阐释群体感应信号分子IQS的产生机制,亦或为今后群体感应抑制剂的研发提供理论基础。本研究结果包括：1.成功构建表达载体,并利用原核系统表达蛋白,已获得大量高纯度AmbBc蛋白；2.筛选到10种AmbBc晶体生长条件,经优化成功得到用于衍射的单晶；3.收集到分辨率高达2.5A的数据；4.成功制备重金属衍生物及硒代甲硫氨酸晶体；5.通过定点突变引入甲硫氨酸增强反常散射信号解决相位问题,目前蛋白结构已成功解析。
【作者】王怡雯；
【导师】宋海卫；
【作者基本信息】浙江大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】群体感应；非核糖体肽合成酶；AmbB；缩合结构域；晶体结构；

【参考文献】
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