3，4-二氯苯胺降解菌S1的降解特性及功能定位

【摘要】3,4-二氯苯胺(DCA)是一种氯代苯胺化合物,微溶于水,溶于多数有机溶剂,是多种农药、医药、染料、颜料、精细化工产品的主要中间体,同时也是敌稗、利谷隆、敌草隆等除草剂的代谢产物,比其母体化合物毒性更高,在环境中难被降解而进行积累。因此,消除环境中3,4-二氯苯胺的残留,成为迫切需要解决的问题。本研究分离筛选到1株能以3,4-二氯苯胺作为单一碳源和氮源生长代谢的高效降解菌,命名为S1。通过对其进行菌种鉴定、降解特性分析及降解功能初步定位,主要得出以下结论：1.通过菌种富集培养分离纯化,从采集的11种水土样品中分离获得30株能利用3,4-二氯苯胺作为单一碳源和氮源生长的菌株。其中菌株S1对DCA的降解率最高为63.82%,对其形态学特征、生理生化指标测定及16SrDNA进行分析,确定为恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)。2.通过单因子试验和正交试验对S1的降解特性进行分析。从考察温度、pH值、DCA初始浓度以及接菌量等因素的单因子试验中获知：温度、pH、接菌量和底物浓度对降解率影响均较大；S1的最佳降解温度为31。C左右,pH为7.0左右,DCA初始浓度为30mg/L,接菌量≥3mL时,降解率上升不明显,趋于稳定。3.本实验选定30mg/L为考察降解能力的DCA浓度,对降解率影响较大的温度、pH值及接菌量三个因素进行三因素三水平的正交试验,从中发现：pH值是对DCA降解率影响最大的因素,S1降解DCA的最佳降解条件组合为：温度31℃,pH值7.0和接菌量4mL,在此条件下,DCA降解率达到67.45%。4.通过质粒提取检测、SDS与反复升温法进行质粒消除及质粒转化等实验证明：S1含有一个大于10kb的质粒pSl,随着质粒的丢失,菌株利用DCA的能力丧失,当将质粒重新导入后重组菌株获得了降解DCA的能力。表明,菌株S1降解DCA的功能由质粒基因所控制。
【作者】宋彩霞；
【导师】邓新平；
【作者基本信息】西南大学，农药学，2014，硕士
【关键词】3,4-二氯苯胺；恶臭假单胞菌；降解特性；功能定位；

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