MicroRNA-10b在非小细胞肺癌中的表达及功能的研究

MicroRNA-10b在非小细胞肺癌中的表达及功能的研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-10-22 分类:期刊论文 喜欢:2518
师大云端图书馆

【摘要】目的:越来越多的研究结果显示,miRNA在肺癌的发生发展过程中起着重要的作用。在本研究中,我们利用实时定量realtimePCR技术检测非小细胞肺癌组织相对于癌旁正常组织中miR-10b的差异表达,并通观察在肺癌细胞株中过表达miR-10b对肺癌细胞生长、侵袭及转移的影响,以及miR-10b靶基因的预测及验证,初步探索miR-lOb在非小细胞肺癌的发生、发展中的作用及其机制。方法:1,采用RT-PCR法检测miR-lOb在非小细胞肺癌组织中的差异表达;2,采用RT-PCR法检测miR-10b在A549细胞株、95-C细胞株中的表达情况,将实验分为三个组:空白对照组,阴性对照组,miR-10b质粒转染组,构建miR-10b过表达质粒及阴性对照质粒,将miR-10b过表达质粒及阴性对照质粒采用脂质体法瞬转至A549及95-C细胞株中,转染后荧光显微镜下观察转染效率,RT-PCR法检测各组细胞中niR-10b勺相对表达量。通过细胞增殖实验(CCK8)观察转染后各组细胞的增殖能力的变化;通过流式细仪检测各组细胞的细胞周期及凋亡的变化,Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力的变化;3,使用生物信息学方法对miR-10b的靶基因进行预测,并采用荧光素酶报告基因实验、RT-PCR及Westblot进行初步验证。结果:1,在40例非小细胞肺癌组织及配对的癌旁组织中,miR-10b在肺癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),有淋巴结转移组niR-10b表达水平高于无淋巴结转移组(p<0.05)。2,miR-10b在A549细胞及95-C细胞中相对高表达(P<0.05),转染后miR-10b质粒转染组细胞增殖速度明显增快,细胞凋亡率降低,细胞侵袭及迁移能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。3,经生物信息软件预测,我们筛选出KLF4作为miR-10b的靶基因。我们构建两个KLF4的3’UTR片段的荧光素酶报告基因载体,共转染miR-lOb质粒和KLF4-3’UTR-wt报告基因载体时,荧光素酶活性降低35%;共转染miR-10b质粒和预测靶位点突变载体KLF4-3’UTR-mut时,荧光素酶活性未见明显改变。在A549细胞及95-C细胞株中miR-10b质粒转染组KLF4mRNA表达降低,但与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-10b质粒转染组KLF4蛋白表达降低,与空白对照组和阴性对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1,miR-10b在非小细胞肺癌组织中的表达高于癌旁正常组织中的表达,并且和淋巴结转移相关;2,miR-10b可促进肺癌细胞的增殖,抑制肺癌细胞的凋亡,增强肺癌细胞的侵袭及迁移能力;3,KLF4是miR-10b的直接靶基因,miR-10b可能过下调KLF4蛋白的表达促进非小细胞肺癌细胞的增殖及侵袭能力。
【作者】刘翼;
【导师】张国庆;
【作者基本信息】新疆医科大学,外科学(专业学位),2013,博士
【关键词】MicroRNA-10b;非小细胞肺癌;KLF4;细胞增殖;侵袭能力;

【参考文献】
[1]张凌之.小阻力扣件纵向阻力特性试验研究[D].西南交通大学,建筑与土木工程,2014,硕士.
[2]安辉.内混式双流体渣油雾化喷嘴的实验研究[D].大连理工大学,机械制造及其自动化,2003,硕士.
[3]孙燕.金莲花黄酮水解机制及抗氧化活性研究[D].苏州大学,药物化学,2013,硕士.
[4]赵奇杰.马尔可夫调制的跳扩散模型下的可转换债券定价[D].宁波大学,应用数学,2014,硕士.
[5]高春华.瘦素、内皮素、一氧化氮与糖尿病视网膜病变关系的临床分析[D].山西医科大学,内科内分泌,2003,硕士.
[6]王佳.我国矿产资源税费问题研究[D].东北财经大学,财政学,2012,硕士.
[7]刘伟佳,林振智,文福拴,薛禹胜,孙维真,王超.计及重要负荷优先恢复的局部电力系统恢复策略[J].电力系统自动化,2013,12:31-37.
[8]李昇平.不确定性离散时间系统非保守自适应鲁棒控制[J].控制与决策,2004,03:262-266.
[9]毕亚林.中国国际海洋事务的话语权问题研究[D].中国海洋大学,行政管理(专业学位),2014,硕士.
[10]禹润田,方跃法,郭盛.绳驱动并联踝关节康复机构设计及运动性能分析[J].机器人,2015,01:53-62+73.
[11]王星,胡立嵩,夏林,李键,陈仁婧.石墨资源概况与提纯方法研究[J].化工时刊,2015,02:19-22.
[12]赵贞.M公关公司发展战略分析[D].首都经济贸易大学,工商管理(专业学位),2014,硕士.
[13]卫飞云.甲基丙烯酸羟乙酯接枝改性天然胶乳的制备及其应用研究[D].中北大学,化学工程,2014,硕士.
[14]魏慧.知识管理视阈的城建档案管理问题研究[D].湖北大学,档案学,2012,硕士.
[15]刘春明.多元文化背景下高校思想政治教育实效性问题研究[D].东北石油大学,思想政治教育,2013,硕士.
[16]丛蓉,王秀坤,吴军,周岩.基于Web-LogMining寻找目标网页最优期望定位[J].计算机工程与应用,2004,34:151-153+178.
[17]刘梦珂.郑州市“城中村”问题研究[D].华中师范大学,农村与区域经济发展,2014,硕士.
[18]惠建农,凌皓平,张秉铎.400kN内河打捞工程船[J].江苏船舶.1990(03)
[19]何玉飞.基于外加剂的沥青混合料高低温性能研究[D].长安大学,交通运输工程(专业学位),2014,硕士.
[20]路建华.我国土地征收法律制度研究[D].对外经济贸易大学,法律,2004,硕士.
[21]王瑜.张艺谋电影中的色彩语言研究[D].东北师范大学,广播电视艺术,2012,硕士.
[22]刘玉玉.我国自然灾害预防管理审计问题研究[D].山东财经大学,会计学,2014,硕士.
[23]郭莉.两周金文副词初探[D].华南师范大学,汉语言文字学,2004,硕士.
[24]廖理.试析王维诗中的色彩词[D].湖北师范学院,汉语言文字学,2013,硕士.
[25]刘家希.英汉时间表达的跨文化对比研究[D].燕山大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[26]张轲.城市社区工作的资源整合与利用[D].华中师范大学,社会工作,2013,硕士.
[27]毛仁伟.大型多人在线游戏中负载均衡及相关技术的研究[D].首都师范大学,计算机技术与应用,2014,硕士.
[28]贾芳芳.六元氮杂芳环桥连1,2,4-膦杂吡唑多齿配体及其Cu~(Ⅰ,Ⅱ)、Fe~(Ⅱ)Ag~Ⅰ配合物的合成与结构研究[D].山西师范大学,化学,2013,硕士.
[29]李金山.北京佳禾昊业贸易有限公司营销策略研究[D].西北大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[30]陈红.基于精确定位的矿井铁路运输信集闭主站的研究[D].辽宁工程技术大学,电机与电器,2012,硕士.
[31]张茂添.Ge沟道肖特基源漏场效应晶体管的制备与特性分析[D].厦门大学,微电子学与固体电子学,2014,硕士.
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[38]房媛媛.河北省高校图书馆职工体育锻炼需求与行为的调查研究[D].河北师范大学,体育教育训练学,2012,硕士.
[39]崔圆圆.华南三明—赣州地区花岗岩类年代学、地球化学及岩石成因[D].中国地质大学(北京),矿物学、岩石学、矿床学,2014,硕士.
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[43]邹晓妹.北京市运动内衣市场发展现状及其前景研究[D].首都体育学院,体育人文社会学,2013,硕士.
[44]傅世善.充分重视通信信号和自动化系统在发展城市轨道交通中的作用[J].地铁与轻轨.1989(01)
[45]孙语.构建适应人口老龄化趋势的养老模式[D].渤海大学,科学社会主义与国际共产主义运动,2014,硕士.
[46]赵泾钧.北京奥林匹克森林公园南园人工湿地园区使用后评价(POE)[D].北京交通大学,2014.
[47]游静.以需求为导向的中轻度智障人士职业能力培训[D].西北大学,社会工作(专业学位),2014,硕士.
[48]姚彦梅.基于数字电视中间件技术的信息交互平台的研究与实现[D].成都理工大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[49]谢俊源.从功能派翻译理论视角看影片A Separation两个版本的字幕汉译[D].华中师范大学,英语语言文学,2014,硕士.
[50]刘谦.电力线通信技术浅析[J].电信网技术.2004(01)

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