Notch1信号转导通路对CD44+胃癌细胞生物学特性的影响

【摘要】目的:Notch信号转导通路在细胞的分化、增殖及凋亡等过程中起着至关重要的作用，但是Notch1通路在胃癌干细胞(Gastriccancerstemcells,GCSCs)中的具体作用机制尚不十分清楚。本课题主要着眼于Notch1信号转导通路在维持胃癌干细胞生物学特性及调控上皮-间叶转化（Epithelial-MesenchymalTransition，EMT）过程中的作用。方法:通过RT-PCR及Westernblot检测胃癌细胞MKN45、AGS，正常人胃粘膜细胞GES1及45例胃癌组织、25例癌旁正常胃黏膜组织中Notch1的表达水平。流式细胞仪分选出CD44标记阳性及阴性的MKN45胃癌细胞，通过体内成瘤实验及体外悬浮克隆细胞球形成实验检测肿瘤干细胞特性，MTT检测细胞对化疗药物5-Fu的敏感性，Westernblot检测Notch1及Hes1的表达水平。为进一步探讨Notch1信号转导通路对胃癌干细胞影响的作用机制，选用γ分泌酶抑制剂N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-1-alanyl]-S-phenylglycinet-butylester（DAPT）分别处理CD44+及CD44-MKN45细胞，并检测其Hes1及EMT相关指标表达水平、肿瘤干细胞相关特性、生长增殖及转移侵袭能力。结果：Notch1在胃癌细胞中的表达水平显著高于正常的胃粘膜细胞，在伴有淋巴结转移的胃癌组织中的表达水平显著高于无转移的胃癌组织及正常胃粘膜组织。CD44+MKN45具有明显的肿瘤干细胞相关生物学特性，其Notch1及Hes1的表达水平均显著高于CD44-MKN45细胞。经DAPT处理后，CD44+MKN45细胞中Notch1通路下游蛋白Hes1的表达显著降低，抑制EMT过程，同时影响CD44+MKN45的肿瘤干细胞相关生物学特性及削弱其侵袭、增殖能力，而DAPT处理CD44-MKN45细胞未见上述变化。经DAPT腹腔注射，可显著抑制异种移植瘤的生长。结论：CD44+MKN45细胞具有肿瘤干细胞的相关生物学特性，Notch1信号转导通路在维持肿瘤干细胞特性及调控EMT过程中起着至关重要的作用。
【作者】李禄椿；
【导师】吴小翎；
【作者基本信息】重庆医科大学，消化内科，2014，博士
【关键词】胃癌；肿瘤干细胞；CD44；Notch1；EMT；

【参考文献】
[1]陈光媚.异议股东股份回购请求权行使问题研究[D].吉林大学,法律,2013,硕士.
[2]王敏.分布式电源的概率建模及其对电力系统的影响[D].合肥工业大学,2010.
[3]李威.甘肃省经济发展方式转变研究[D].甘肃农业大学,区域经济学,2013,硕士.
[4]周祥元.调绘九寨沟[J].中国测绘.1995(03)
[5]赵艳芳.法人民事责任若干问题研究[D].吉林大学,法律,2004,硕士.
[6]李乾坤.马克思的“物化（Verdinglichung）”和“事物化（Versachlichung）”概念研究[D].南京大学,国外马克思主义研究,2013,硕士.
[7]TRANVANTHUY.Security Regarding Internet Banking[D].湖南大学,ComputerScience,2011,硕士.
[8]罗晨曲.基于加油站便利店消费者行为的购物模型与应用研究[D].清华大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[9]王江艳.火车站广场人流密集区应急疏散能力评价研究[D].西安科技大学,安全工程,2014,硕士.
[10]王冬梅.全景壁画的形式语言研究[D].西南大学,美术学,2014,硕士.
[11]张琼.翻译在中国西班牙语教学中的作用[D].西安外国语大学,西班牙语语言文学,2013,硕士.
[12]杨春实.优秀跳高运动员黄海强倒二步助跑、起跳及过杆技术的运动学分析[D].杭州师范大学,体育教育训练学,2012,硕士.
[13]冯星煜.皮带通廊输煤栈桥设计浅析[D].西安建筑科技大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[14]曹增招.井下铲运机湿式多盘制动器制动性能研究[D].兰州理工大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[15]刘盼盼.规整性碳纳米管条纹沟道铁电场效应晶体管的制备与表征[D].湘潭大学,2014.
[16]陈宁.机械压力和维拉帕米对骨关节炎软骨细胞表达MCP-1和MMP-1、-3、-13的影响[D].第二军医大学,内科学（专业学位）,2013,硕士.
[17]王杨丽.小学儿童的信任倾向和可信度对学校适应的影响[D].浙江理工大学,应用心理学,2013,硕士.
[18]杨业功.开放内容及其在我国数字图书馆资源管理中的应用[D].辽宁师范大学,图书馆学,2012,硕士.
[19]李方.模拟数字转换器中衬底耦合噪声的分析[D].哈尔滨工业大学,微电子学与固体电子学,2013,硕士.
[20]艾蕾.网络问政的有效性问题研究[D].苏州大学,政治学理论,2014,硕士.
[21]赵政,刘吉强.移动互联网音视频类协议识别技术研究与实现[J].信息网络安全,2014,12:61-64.
[22]刘忠梁.热膨胀误差对飞行器装配中互换协调的影响及其排除方法[J].航空制造技术.2001(01)
[23]郭雯雯.知青记忆的理解与重构[D].广东技术师范学院,中国现当代文学,2013,硕士.
[24]居相文,吴日民,周亚洲,马双彪,杨娟,程晓农.氧化石墨烯在水热法制备Sc2W3O12粉体中的应用[J].无机材料学报,2015,04:.
[25]王宁.气候变化影响下长江口滨海湿地脆弱性评估方法研究[D].华东师范大学,生态学,2013,硕士.
[26]黄玉坤.XML技术在网络购物平台信息处理中的应用[J].科技广场,2004,07:50-53.
[27]任玉伟.交错并联BCM Boost PFC变换器的研究[D].西南交通大学,电磁悬浮与超导工程,2014,硕士.
[28]郭志芳.圆锭电磁铸造中电磁场和液柱高度的数值模拟[D].大连理工大学,材料加工工程,2004,硕士.
[29]冶林琴.节能灯用BaMgAl_(10)O_(17):Eu~(2+),Mn~(2+)的合成及热稳定性研究[D].兰州大学,凝聚态物理,2014,硕士.
[30]傅晓旭.电子废弃物拆解区树皮中多溴联苯醚与树轮中重金属的生物富集研究[D].华东理工大学,环境科学与工程,2014,硕士.
[31]薛景瑄.广义点变换法用于研究非线性脉冲系统[J].自动化学报,1964,02:61-70.
[32]雷小青.信息化与道路运输规模经济关系研究[D].长安大学,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[33]郑珊珊.高校移动图书馆服务评价研究[D].安徽大学,情报学,2014,硕士.
[34]王娜.高中生英语学习动机减退因素的研究[D].河北师范大学,学科教学,2014,硕士.
[35]徐扬.以CLA-1为靶标的微生物来源抗动脉粥样硬化活性化合物的分离纯化、结构鉴定及分子机制研究[D].北京协和医学院,微生物与生化药学,2010,博士.
[36]吴作林.还原烷基化合成N-乙基-3，4-亚甲二氧基苯胺的研究[D].大连理工大学,应用化学,2004,硕士.
[37]赵再军.运用数据挖掘技术打造企业核心竞争力[J].特区经济,2005,03:140-141.
[38]徐泽芳.基于压缩感知的宽带频谱感知的研究[D].杭州电子科技大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[39]王征.民族识别与族群认同研究[D].中南民族大学,马克思主义民族理论与政策,2013,硕士.
[40]王磊.我国铁路货运改革战略定位研究[D].北京交通大学,2007.
[41]吕晓芹.论施蛰存心理小说的性本能[D].华南师范大学,中国现当代文学,2004,硕士.
[42]艾楚涵.21世纪初中国与中东能源合作研究[D].吉林大学,国际政治,2014,硕士.
[43]郑冑强.基于DSP+CPLD的横机伺服驱动器的研究[D].杭州电子科技大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[44]王飞,崔金强,陈本美,李崇兴.一套完整的基于视觉光流和激光扫描测距的室内无人机导航系统(英文)[J].自动化学报,2013,11:1889-1900.
[45]王艳秋.北青龙衣抗氧化活性谱效关系的研究[D].黑龙江大学,分析化学,2013,硕士.
[46]朱向男.微纳碳化硼粉末电极材料电化学性质及应用研究[D].燕山大学,2012.
[47]李国栋a,b,田国会b,周风余b,王洪君a.服务机器人智能空间中顶棚投影器建模与外参数标定[J].控制与决策.
[48]曾庆芳.降低OFDM系统峰均比算法的研究[D].湖南大学,信息与通信工程,2011,硕士.
[49]张李波.文明城市群创建的政策体系研究[D].苏州大学,行政管理,2013,硕士.
[50]吴婉弘.村镇建设标准体系中标准项目的设立研究[D].哈尔滨工业大学,管理科学与工程,2014,硕士.