鼻腔交感神经或副交感神经抑制对鼠变应性鼻炎Th1/2平衡的影响

【摘要】目的：变应性鼻炎是临床常见疾病,在发展中国家发病率有逐年升高趋势,长沙10-17岁中小学生发病率约为17%。其发病机制仍未阐明,治疗对策还需进一步完善。本研究通过建立小鼠变应性鼻炎模型,分别使用交感神经抑制剂6-羟基多巴胺及副交感神经抑制剂异丙托溴铵处理变应性鼻炎小鼠,观察这些药物是否改变了鼻粘膜Th1、Th2,Treg等免疫细胞的细胞因子表达水平,进一步探素自主神经系统对鼻粘膜免疫及炎症反应的影响。方法：将24只6-8周Balb/c小鼠,随机分为四组：正常对照组(A),变应性鼻炎模型无处理组(B)、模型异丙托溴铵处理组(C)、模型6-羟基多巴胺处理组(D),每组6只。运用卵清蛋白腹腔注射联合鼻腔攻击的方法对B、C、D组小鼠进行处理,建立小鼠变应性鼻炎模型；采用标准的临床症状评分方法对小鼠变应性鼻炎症状进行评估;使用常规病理组织学方法对鼻粘膜形态及细胞类型进行检查；运用ELISA方法检测血清中OVA-sIgE的浓度；采用免疫组化技术观察鼻粘膜中IL-4、IFN-γ、FoxP3、VIP以及SP细胞数目的变化。结果：1、应用小鼠变应性鼻炎症状评分标准进行评估,其结果显示,经卵清蛋白抗原攻击后,B、C、D组的18只小鼠中,17只小鼠符合鼠变应性鼻炎的诊断,表明了鼠变应性鼻炎模型成功建立。B组中1只小鼠没有表现出变应性鼻炎的症状,被剔除进一步实验。其平均积分分别是：A组,0.8±0.75；B组,6.4±1.14；C组,6.8±1.17；D组,6.3±1.21。各组经相应处理14天后,积分分别是：A组,0.7±0.81；B组,6.2±1.09；C组,3.8±0.98；D组,7.0±1.09。C组经异丙托溴铵处理后积分显著下降(p<0.01)。2、血清ELISA检测结果显示,经卵清蛋白抗原攻击后的B、C、D组,血清中OVA-sIgE浓度分别为112.5±16.3ng/ml,123.5±16.6ng/ml,124.4±17.1ng/ml,都显著高于A组(22.1±z4.33ng/ml),差异具有统计学意义(p<0.01、)。而B、C、D组之间差异无统计学意义(p>0.05)。各组经相应处理14天后,其A、B、C、D各组OVA-sIgE的浓度分别为26.1±4.13ng/ml,120.3±16.1ng/ml,74.4±9.87ng/ml,130.7±16.1ng/ml。异丙托溴铵的处理显著降低了变应性鼻炎小鼠血清的OVA-sIgE浓度(p<0.01)。3、病理组织学检查结果显示,与对照组比较,变应性鼻炎组的鼻粘膜纤毛稀少,排列不规则,并且可见许多血管及腺体的增生和扩张,组织水肿,嗜酸性粒细胞及其他炎症细胞的浸润。异丙托溴铵的处理显著减少了嗜酸性粒细胞的浸润及腺体和血管的增生和扩张。而6-羟基多巴胺没有使鼠变应性鼻炎的病理组织学发生改变。4、变应性鼻炎模型及对照组经各种处理后,A、B、C、D各组中,鼻粘膜IL-4阳性细胞数分别为,8.2±1.45%,28.2±8.41%,12.4±3.12%,31.7±9.13%；INF-γ的阳性细胞数分别为6.1±0.35%,2.8±0.63%,3.9±0.42%,3.6±0.51%；FOxp3的阳性细胞数分别为9.5±1.81%,2.0±0.52%,7.8±0.98%,2.7±0.47%；变应性鼻炎小鼠模型组的鼻粘膜IL-4阳性细胞数显著高于对照组(p<0.01),经异丙托溴铵处理后变应性鼻炎小鼠鼻粘膜的IL-4阳性细胞数显著降低(p<0.01),而6-羟基多巴胺的处理没有改变IL-4的阳性细胞数(p>0.05)。另一方面,小鼠模型组的FOxp3阳性细胞数显著低于对照组(p<0.01),经异丙托溴铵处理后FOxp3的阳性细胞数显著升高(p<0.01),而6-羟基多巴胺处理没有改变FOxp3的表达。尽管变应性鼻炎小鼠的INF-γ阳性细胞数显著低于对照组,但异丙托溴铵及6-羟基多巴胺的处理没有改变其表达水平(p>0.05)。5、变应性鼻炎模型及对照组经各种处理后,ABCD各组鼻粘膜中VIP的阳性细胞及阳性纤维数分别为5.8±0.21%,26.6±6.34%,16.2±1.83%,33.5±5.51%;SP的阳性细胞及阳性纤维鼠分别为6.9±1.53%,23.5±6.02%,12.6±1.31%,25.6±8.32%。变应性鼻炎小鼠鼻粘膜的SP和VIP的表达水平均显著高于对照组(p<0.01),异丙托溴铵的处理显著降低了他们的表达水平,而8-羟基多巴胺没有改变他们的表达水平(p>0.05)。结论：1、运用卵清蛋白的腹腔注射联合鼻粘膜抗原攻击的方法建立小鼠变应性鼻炎模型的成功率高；2、胆碱能抑制剂不仅能有效的缓解变应性鼻炎小鼠的流涕,而且对喷嚏、鼻痒以及鼻塞也有一定疗效；3、胆碱能抑制剂不仅能够抑制副交感活性,而且能够调节鼠变应性鼻炎鼻粘膜Th2细胞优势免疫反应,增强变应性鼻炎Treg细胞因子的表达,从而发挥治疗变应性鼻炎的疗效；4、抗胆碱药没有改变Thl细胞介导的免疫反应；5、胆碱能抑制剂能显著抑制变应性鼻炎鼻粘膜神经肽SP和VIP的表达；6、交感神经抑制剂6-羟基多巴胺不能改变鼠变应性鼻炎的Th1/2细胞因子及神经肽的表达水平。
【作者】AhmedMohamedNabilIbrahimDaoud；
【导师】谭国林；
【作者基本信息】中南大学，外科学，2014，博士
【关键词】变应性鼻炎；T辅助细胞；T调节细胞；细胞因子；神经肽；交感神经；副交感神经；

【参考文献】
[1]吕海明.利用拉曼散射光谱研究芳香羧酸有机物在TiO_2的吸附机理[D].吉林大学,物理化学,2013,硕士.
[2]刘家桢.聚氯乙烯/氯化聚氯乙烯多孔膜的制备及改性研究[D].天津大学,化学工艺,2013,硕士.
[3]虞天一.行政约谈问题研究[D].苏州大学,法律（专业学位）,2014,硕士.
[4]魏有东.结核性脑膜炎的潜在体液生物标志物研究[D].重庆医科大学,神经病学,2014,博士.
[5]王蒙.上海开发区与城市的互动发展研究[D].华东师范大学,人文地理学,2013,硕士.
[6]宾婕.教材编写理念视角下的对外汉语写作教材比较研究[D].广东外语外贸大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[7]陈创天,刘丽娟,王晓洋.深紫外非线性光学晶体KBe_2BO_3F_2的研究进展[J].物理,2014,08:520-527.
[8]戴吉.初中生阅读元认知策略训练的实验研究[D].湖南师范大学,发展与教育心理学,2004,硕士.
[9]王萍.利培酮片的质量研究与技术标准制定[D].天津大学,制药工程,2003,硕士.
[10]曹英杰.创业板上市公司资本结构对经营绩效的影响[D].山东财经大学,金融（专业学位）,2013,硕士.
[11]吴炫凝.新媒体广告监管研究[D].华中科技大学,出版,2013,硕士.
[12]叶坤.基于SWOT分析的农业信息化战略选择实证分析[D].华中师范大学,农业推广,2014,硕士.
[13]黄宇.中国人乳β-酪蛋白的分离和鉴定研究[D].东北农业大学,食品工程（专业学位）,2013,硕士.
[14]解志斌.移动WiMAX和LTE/LTE-A无线网络节能研究[D].北京交通大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[15]李鹏,关勇,刘文举,徐波.一种改进的单声道混合语音分离方法[J].自动化学报,2009,08:1087-1093.
[16]侯广华.LaB_6基纳米材料和ZnO纳米材料的制备与特性研究[D].信阳师范学院,理论物理,2013,硕士.
[17]武智.基于声学探测结果的西江梧州江段鱼类资源保护策略研究[D].大连海洋大学,捕捞学,2014,硕士.
[18]张航.不同日粮模式及长链脂肪酸对奶牛乳腺乳脂合成的影响及其机理研究[D].内蒙古农业大学,动物营养与饲料科学,2014,博士.
[19]宋梦吟.涨跌幅限制效应的实证研究[D].天津大学,运筹学与控制论,2013,硕士.
[20]耿永政.图像语义标注技术中的高效区域分割方法研究[D].西南大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[21]王晓玎.《另眼看德国》试译研究报告[D].北京外国语大学,德语语言文学,2014,硕士.
[22]赵浛希.高端酒店预订和点菜服务平台移动端系统的设计与实现[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[23]段云所.构建高性能的信息网络安全领域[J].计算机安全,2002,01:61-62.
[24]汤慧卿.ERP的云计算模式选择研究[D].上海外国语大学,企业管理,2012,硕士.
[25]王慧.国际保理对国际贸易结算的影响和相关法律问题研究[D].中国政法大学,法律,2004,硕士.
[26]袁勇.双工件台宏微快速交接系统研究[D].哈尔滨工业大学,仪器科学与技术,2014,硕士.
[27]钟诚.我国油菜籽加工业与其主产区的空间布局协调研究[D].湖南科技大学,应用经济学,2013,硕士.
[28]张涛.海洋原位溶解氧检测仪设计与开发[D].浙江大学,生物医学工程,2013,硕士.
[29]李会杰.石家庄市民办高校女子防身术课程开设现状调查与研究[D].河北师范大学,体育教学,2012,硕士.
[30]朱士亮.“大跃进”时期的经济协作区研究[D].中共中央党校,中共党史,2013,硕士.
[31]郑亚琳.王立平影视声乐作品的演唱及研究[D].湖南师范大学,音乐学,2014,硕士.
[32]朱派波.中国航空集团维修企业优化布局研究[D].四川大学,工商管理,2003,硕士.
[33]唐慧.央企上市公司高管薪酬租金汲取问题研究[D].南京财经大学,企业管理,2012,硕士.
[34]高明明.澳大利亚中学汉语课堂管理研究[D].吉林大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[35]叶彩虹.Web挖掘在网上购物中的应用研究[J].安庆师范学院学报(自然科学版),2004,04:109-111.
[36]任磊.父亲和母亲教养方式影响网络成瘾发生机制的比较研究[D].华中师范大学,基础心理学,2014,硕士.
[37]陈妮.先秦两汉魏晋灾异诗赋研究[D].湖南师范大学,中国古代文学,2014,硕士.
[38]黄锡滋.超几何分布模型与软件可靠性[J].自动化学报,1987,03:203-206.
[39]罗礼全,谢将剑,王毅.永磁真空断路器预击穿特性实验研究[J].高电压技术,2012,04:899-904.
[40]尚进.白光LED用Sr_(3-y)Eu_ySiO_(5-6x)N_(4x)荧光粉的制备与发光性能[D].成都理工大学,材料学,2013,硕士.
[41]周迟.小额贷款公司的发展模式细分及效益评价[D].北京交通大学,2013.
[42]王伟华.中职德育课教学前策略研究[D].广东技术师范学院,职业技术教育学,2014,硕士.
[43]陈孟乔.高水压砂土地层中泥水盾构隧道开挖面失稳机理与风险评估研究[D].北京交通大学,2014.
[44]杨玲.用PLC和变频器实现铝电解铸造水泵的自动控制[J].冶金自动化,2005,06:54.
[45]严正权.荧光试剂N-9-吖啶基-α-氨基酸及其甲酯的合成、表征和应用[D].安徽师范大学,分析化学,2004,硕士.
[46]许建香.芸豆高效根瘤菌的筛选及分子标记[D].中国农业大学,微生物学,2004,硕士.
[47]熊雯.利用水蚯蚓进行污泥减量化的实验研究[D].西南交通大学,环境工程,2013,硕士.
[48]司玉景,肖业鸣,徐及,潘接林,颜永红.面向口语统计语言模型建模的自动语料生成算法[J].自动化学报,2014,12:2808-2814.
[49]佰伊拉.醋糟大豆皮日粮对山羊的饲用价值及羊粪农田利用研究[D].南京农业大学,动物营养与饲料科学,2013,硕士.
[50]赵昊.溶析结晶法及萃取法分离莱鲍迪甙A的工艺研究[D].江南大学,化学工程,2012,硕士.