高压氧对P53和Caspase-3在SAH后早期脑损伤中表达影响的研究

【摘要】背景与目的：蛛网膜下腔出血（subarachnoidhemorrhage，SAH）是高病死率和高致残率的脑血管疾病之一，分为自发性和外伤性两类。由颅内动脉瘤破裂所致的SAH占所有自发性SAH的比例高达80%左右，又称动脉瘤性蛛网膜下腔出血，其致死率和致残率极高，出血后3天内死亡率可达45%。学者认为出血后的早期脑损伤（earlybraininjury，EBI）是其高死亡率和致残率的主要因素之一。高压氧治疗（hyperbaricoxygentherapy，HBOT）是在高于一个大气压的环境里吸入100%的氧，目前已广泛应用于多种疾病的治疗，由于SAH患者病情变化快且风险大，高压氧应用于SAH的早期治疗研究极少。本研究采用颈内动脉血管内穿刺法建立大鼠SAH动物模型，观察大鼠脑皮质中P53和Caspase-3的表达情况，以及高压氧干预后大鼠神经行为学、死亡率和脑皮质中P53和Caspase-3的表达变化。方法：选取体重为280-320g的健康成年雄性SD大鼠100只，随机分为正常空白对照组10只、假手术组（sham组）30只、蛛网膜下腔出血组（SAH组）30只、高压氧干预的SAH组（HBOT+SAH组）30只；除空白对照组外，其余各组按实验动物处死取标本时间再分为24h、48h、72h三个亚组，各亚组10只。空白对照组不做任何特殊处理，常规饲养3天后麻醉、灌注、取脑组织标本保存；SAH组和HBOT+SAH组均用颈内动脉血管内穿刺法建模，建模成功后除HBOT+SAH组大鼠待麻醉苏醒后行高压氧治疗外，其余饲养环境和术后护理均一样；sham组建模过程与SAH组相同，但不刺破血管。sham组、SAH组和HBOT+SAH组分别于建模成功后24h、48h、72h记录各亚组大鼠神经行为学评分和死亡率，然后麻醉、灌注、取各亚组大鼠脑组织保存。采用免疫组织化学法检测大鼠脑皮质中P53和Caspase-3的表达情况。使用MoticImageAdvance3.2图像分析系统对免疫组织切片进行分析，计算其阳性细胞百分比，Microsoftofficeexcel2003软件录入数据，正态分布计量资料以S表示。采用spss19.0软件进行数据分析，比较前进行正态性和方差齐性检验，两组间比较采用t检验，各亚组间两两比较采用SNK法（q检验），P＜0.05认为有统计学意义。结果：1.死亡率：空白对照组和假手术组大鼠死亡率均为0，两组比较无统计学意义；SAH组和HBOT+SAH组总死亡率分别为40%和16.67%，两组死亡率比较有统计学意义（P＜0.05）；SAH组和HBOT+SAH组在24h内死亡率分别为23.33%和13.33%，24h内两组死亡率比较无统计学差异（P＞0.05）。2.神经行为学评分：SAH组与HBOT+SAH组在24h、48h两个亚组比较无差异（P＞0.05）；但HBOT+SAH组中72h亚组的评分明显低于SAH组中72h亚组，差异有统计学意义（P＜0.05）；SAH组中三个亚组间两两比较无明显差异（P＞0.05）；HBOT+SAH组中三亚组间两两比较：24h亚组与48h亚组间比较无统计学意义（P＞0.05）；24h亚组与72h亚组、48h亚组与72h亚组比较均有统计学意义（P＜0.05）。3.P53在大脑皮质中阳性表达为细胞核呈棕褐色或棕黄色颗粒，并伴有少量胞质表达。空白对照组和假手术组均有少量表达，但两组比较无统计学意义（P＞0.05）；SAH三亚组间两两比较，仅24h与48h亚组P53阳性表达细胞百分比无差异；SAH各亚组比对应sham各亚组阳性表达明显增多，有统计学意义（P＜0.05）；HBOT+SAH组三亚组间两两比较均有统计学意义；P53在HBOT+SAH组48h、72h亚组表达低于相对应的SAH两亚组，差异有统计学意义（P＜0.01）；HBOT+SAH-24h组与SAH-24h组比较无差异（P＞0.05）。4.Caspase-3在胞质上表达，阳性表达为棕黄色颗粒。空白对照组和假手术组均处于正常低水平表达，差异无统计学意义（P＞0.05）；SAH各亚组比对应sham各亚组阳性表达明显增多，有统计学意义（P＜0.05）；SAH组各时间亚组间两两比较均有差异；HBOT+SAH各亚组间两两比较差异有统计学意义。Caspase-3在SAH组与HBOT+SAH组比较：在24h、48h、72h亚组中均有统计学意义（P＜0.05）结论：1.大鼠SAH后早期脑损伤与脑皮质中P53和Caspase-3的表达增加有关。2.高压氧治疗能降低大鼠SAH后早期（72小时内）的总死亡率，并在一定程度上改善神经功能，对治疗EBI有一定作用，但对降低24h内大鼠死亡率效果不明显。3.高压氧可能通过降低P53和Caspase-3的表达，从而对SAH后早期脑损伤起保护作用。
【作者】周东；
【导师】唐晓平；
【作者基本信息】川北医学院，外科学，2014，硕士
【关键词】蛛网膜下腔出血；早期脑损伤；细胞凋亡；高压氧；P53；Caspase-3；

【参考文献】
[1]刘浩强.目标运动归因对表征动量的影响[D].首都师范大学,发展与教育心理学,2014,博士.
[2]魏翠萍,高志海,郭婷婷.一个基于三角函数的直觉模糊熵公式[J].控制与决策,2012,04:571-574.
[3]王俊.水热法制备纳米氧化锌及其光催化性质的研究[D].曲阜师范大学,无机化学,2013,硕士.
[4]赵向荣.湖南XYJ连锁超市员工职业生涯管理研究[D].长沙理工大学,人力资源管理（专业学位）,2012,硕士.
[5]范阳.新《森林法》主要法规对巴西粮食生产和出口潜在影响分析[D].南京农业大学,国际商务,2013,硕士.
[6]李景洋,欧湘贵.宝钢1580除鳞系统变频器软特性功能优化[J].冶金自动化,2011,01:50.
[7]孙挺.金融危机后宁波赛格进出口有限公司战略转型研究[D].宁波大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[8]何颖.政府责任视角下我国政府农业投资效益评价研究[D].东北农业大学,会计学,2013,硕士.
[9]黄晓萌.英汉政治语篇隐喻架构的比较分析[D].南京师范大学,英语语言文学,2012,硕士.
[10]张丽君.我国检察机关量刑建议制度研究[D].兰州大学,刑法学,2012,硕士.
[11]冯元勇.智能搜索器的概念库设计及其文档评价策略[D].中南大学,2002.
[12]任丽丹.京津冀大气污染联防联控路径研究[D].河北大学,世界经济,2014,硕士.
[13]张念.铜离子织物烂花工艺研究[D].东华大学,纺织工程（专业学位）,2014,硕士.
[14]王中.地方音乐文化传承的中学音乐教育研究[D].华中师范大学,音乐学,2013,硕士.
[15]田芳.还脑益聪方对快速老化小鼠氧化应激和炎症反应的影响[D].北京中医药大学,中医学,2013,硕士.
[16]曾铭宇.金融控股公司关联交易的法律规制[D].湖南师范大学,经济法学,2013,硕士.
[17]张岩岩.中药艾迪对人喉癌细胞Hep-2体外生长作用的研究[D].辽宁医学院,耳鼻咽喉科学,2012,硕士.
[18]韩文英.超声造影与增强CT在肾肿瘤鉴别诊断中的对比研究[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[19]刘婷.一项关于武汉市Y镇广场舞舞蹈队的质性研究[D].华中师范大学,传播学,2014,硕士.
[20]赵华丽.泼辣：女性美的一种类型[D].南京师范大学,文艺学,2012,硕士.
[21]杨慧芳.降解烟梗果胶质微生物筛选及产果胶酶的研究[D].江南大学,生物化工,2012,硕士.
[22]姚志刚.Q市邮政局营销体系构建研究[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[23]李领.论少数民族题材写意人物画的研究[D].吉林艺术学院,美术学,2012,硕士.
[24]李文俊.布劳的社会分化理论与我国道德困境[D].华中师范大学,伦理学,2013,硕士.
[25]孙胜杰.20世纪中国文学中的鲧禹原型阐释[J].聊城大学学报(社会科学版),2014,03:50-56.
[26]颜洪.药品包装的安全性设计研究[D].湖南工业大学,设计艺术学,2012,硕士.
[27]王晨.结构数据挖掘与处理的若干问题的研究[D].复旦大学,2005.
[28]周璇.潍坊市流脑监测信息管理系统的设计与实现[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[29]肖琳.HGF、c-Met、PCNA、MVD在子宫内膜癌组织中的表达及其意义[D].重庆医科大学,妇产科学,2004,硕士.
[30]景瑞芳.埃洛石纳米管及高岭土纳米管脱硫性能的研究[D].天津大学,工业催化,2013,硕士.
[31]姜怡悦.农户集中居住意愿及其影响因素研究[D].西安工业大学,区域经济学,2014,硕士.
[32]徐桂红,万成,曾省.一种灵活可扩展的基础能源管理平台(续完)[J].冶金自动化,2015,01:19-23.
[33]陈淼.基于KPI的企业经营业绩分析系统的开发与研究[D].大连铁道学院,2003.
[34]岳媛媛.直线共轭内啮合齿轮泵的齿形分析[D].兰州理工大学,机械电子工程,2013,硕士.
[35]李东双.不同刈割时期对吉林省西部紫花苜蓿种子和牧草生产的影响[D].东北师范大学,生态学,2012,硕士.
[36]燕斐.无密钥泄露的在线/离线签密技术研究[D].西安电子科技大学,信息安全,2012,硕士.
[37]张振杰.共表达不同外源基因的重组弱毒Ⅰ型马立克氏病毒的构建和生物学特性比较[D].山东农业大学,预防兽医学,2014,博士.
[38]魏亚飞.冷链物流企业绩效评价研究[D].河北经贸大学,产业经济学,2012,硕士.
[39]李娟娟.秦岭川金丝猴（Rhinopithecus roxellana）OMU间联署关系的研究[D].西北大学,动物学,2014,硕士.
[40]刘洋.ATRA调控BMP9诱导3T3-L1前脂肪细胞成骨和成脂分化的作用及机制研究[D].重庆医科大学,外科学,2014,博士.
[41]栗树材.并网风电场无功控制与电压稳定研究[D].上海电力学院,电力系统及其自动化,2014,硕士.
[42]徐文辉.现代医院建筑人性化设计的初步研究[D].浙江大学,2004.
[43]邹青松.人力资源实践知觉对员工工作家庭冲突和促进的影响：组织支持感的中介作用[D].浙江大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[44]胡晶晶.ACF@OMC阴极与DSA阳极的制备及其在电-Fenton降解有机物中的应用[D].中南民族大学,分析化学,2013,硕士.
[45]李中秋.我国医药企业研发模式改革研究[D].东北师范大学,企业管理,2012,硕士.
[46]庄雪鹏.基于小波的时间序列中异常点的检测[D].南京大学,基础数学,2013,硕士.
[47]王茹.2012年中国国产电影市场分析报告[D].首都经济贸易大学,应用统计（专业学位）,2013,硕士.
[48]郝哲敏.鄂尔多斯盆地古隆起东缘马家沟组中组合成岩相及储层特征[D].成都理工大学,地质学,2013,硕士.
[49]李莹,周德云,俞吉.基于自适应变结构信息滤波的目标跟踪算法[J].计算机工程与应用.
[50]万耀梅.政治可持续发展视阈下的邓小平权力制约观[D].太原科技大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.