DNA条形码在寄生蜂鉴定中（昆虫纲：膜翅目）的应用研究

【摘要】寄生蜂(Hymenopteranparasitoid)是地球上物种多样性最为丰富的昆虫类群之一,它们在全球生物的营养关系网上扮演着重要的角色,其中许多种类对农林业经济害虫的自然控制起着重要的作用。物种的准确鉴定对寄生蜂的生物学研究以及进一步的生物防治的应用是至关重要的环节,然而,因寄生蜂种类繁多,体型微小、形态多种多样、以及受到寄主的种类、物种的地理分布位置、生长发育阶段的不同给分类学研究带来了巨大的挑战。即使对常见寄生蜂进行准确的鉴定也需要花费很长的时间,甚至还需要制作玻片对一些显微的形态特征进行比较。这就要求我们寻求一个新的方法来更加有效的寄生蜂进行快速的准确鉴定。因此,寄生蜂的分类急需结合分子学方法和手段以帮助分类学的发展。目前,利用线粒体基因细胞色素c氧化酶亚单位I(COI或COXI)作为标志物种的条形码(barcodes),利用种间差异大于种内差异实现对物种的分类鉴定。尽管DNA条形码也受到隐存种、近缘种、祖先多型现象、Wolbachia感染、基因深入等多个因素的制约,但大量的事实证明它的鉴定能力和效果是不容忽视的。同时,DNA条形码的应用极大地促进了昆虫分类的发展,并已在昆虫中多个类群的研究中得以应用,膜翅目是其中研究应用最多的类群之一。本文通过两个案例初步探究DNA条形码在寄生蜂的应用情况：1)利用DNA条形码技术在大豆蚜AphisglycinesMatsumura寄生蜂鉴定中的应用：大豆蚜是大豆的主要害虫之一,寄生大豆蚜的寄生蜂种类较多且传统的形态学手段难以鉴定。我们对在北京、河南、辽宁以及黑龙江等地大豆田中采集的大豆蚜中羽化的寄生蜂,进行了初步的形态分类,共鉴定出11个形态种。随后对从11个形态种样本中选取131头标本获取28S(D2区域)和COI序列进行ABGD分析、NJ树拓扑结构与遗传距离比较分析、与NCBI和BOLD数据库进行比对以及结合形态和相关信息进一步的推断,结果显示使用DNA条形码技术可以很好的将寄生蜂区分开来,种间的遗传距离要明显大于种内的遗传变异,共鉴定出有5个科的10个属15种寄生蜂。利用DNA条形码技术可以为生物防治中寄生蜂及其他天敌的作用和稳定性的评估提供可靠的信息。2)DNA条形码在阔柄跳小蜂属MetaphycusMercet中的应用研究：阔柄跳小蜂属是跳小蜂科中物种多样性最为丰富的一个属,是许多经济害虫的寄生性天敌,常用于生物防治中。属内的形态特征较为保守,用于分类的一些特征又难以测量和评估,难以准确鉴定。此外,随着DNA条形码技术的应用发展,单独使用COI基因可能会造成一些问题。本研究选取了37个形态种的303头标本获取28S和COI基因序列进行ABGD、GMYC以及系统发育分析,共鉴定出有57种阔柄跳小蜂。同时发现28S基因对近缘种和隐存种的分辨能力不够,但能很好的体现物种间的系统关系；COI基因则与之相反,具有很强的物种辨别能力,但不能准确的体现物种间的系统关系,然而基因的联合使用则具兼具二者的优点。
【作者】周青松；
【导师】张彦周；朱朝东；
【作者基本信息】安徽大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】寄生蜂；DNA条形码；物种鉴定；COI；28S；大豆蚜寄生蜂；阔柄跳小蜂属；

【参考文献】
[1]冯丽娜.情绪智力、组织公平对工作绩效的影响研究[D].河北经贸大学,劳动经济学,2013,硕士.
[2]罗涵予.抚顺东露天矿环境现状评价及生态恢复规划[D].吉林大学,第四纪地质学,2014,硕士.
[3]侯霞,胡寿松.一种新的细分加权小波[J].自动化学报,2004,06:1017-1020.
[4]王震.东周时期郑韩墓葬研究[D].吉林大学,考古学及博物馆学,2014,硕士.
[5]马慧慧.α-半乳糖苷酶对肉鸡作用效果及相关机理的研究[D].河南农业大学,动物营养与饲料科学,2012,硕士.
[6]罗德兴.太阳能视频监控系统的设计与实现[D].厦门大学,软件工程,2014,硕士.
[7]安峰.审计意见与公司治理绩效的相关性研究[D].浙江大学,2008.
[8]吕生华,丁怀东,孙婷,刘晶晶.萘系减水剂/氧化石墨烯复合材料对水泥石微观结构和性能的影响[J].陕西科技大学学报(自然科学版),2014,05:42-47.
[9]杨廷力,刘安心,罗玉峰,杭鲁滨,沈惠平,石志新.机器人机构结构综合方法的基本思想、特点及其发展趋势[J].机械工程学报,2010,09:1-11.
[10]武文艳.锂离子电池正极材料Li_3V_2(PO_4)_3/rGO的合成及其电化学性能的研究[D].华中师范大学,化学工程,2014,硕士.
[11]王梁梁.基于EON的卡车虚拟维修系统关键技术研究[D].西南交通大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[12]卢源,纪诚,金山.轨道交通综合体的模式演进与设计创新——以北京地铁车辆段综合开发实践为例[J].建筑学报,2015,04:92-97.
[13]马兆里.石墨烯纳米结构的自旋电子输运性质研究[D].复旦大学,2011.
[14]王利文.新时期我国城镇化进程中人口流动问题的对策分析[D].湖北大学,行政管理,2011,硕士.
[15]冯帆.论我国矿产资源法律制度的完善[D].石家庄经济学院,环境与资源保护法学,2012,硕士.
[16]谢姣皎.宽带双极化贴片天线及其阵列技术研究[D].西安电子科技大学,电磁场与微波技术,2014,博士.
[17]朱旦丹.固相反应法制备稀土掺杂YAG透明陶瓷及其性能研究[D].东北大学,材料学,2010,硕士.
[18]韩行吉,杨文采,吴永刚.地震与声测井资料的匹配[J].石油地球物理勘探,1995,S2:27-33+181.
[19]鲁小江.论正当的绿色壁垒[D].中国社会科学院研究生院,国际经济法（专业学位）,2014,硕士.
[20]潘晓哲.“就这样”的多角度考察[D].华中师范大学,汉语言文字学,2014,硕士.
[21]王文妹.生态批评视域下的《小世界》[D].鲁东大学,英语语言文学,2013,硕士.
[22]徐兰杰.中国残奥乒乓球队男子TT6～TT8级运动员体能训练方法及特征研究[D].山东师范大学,体育教育训练学,2013,硕士.
[23]赵丽,褚锦辉,于海涛.三峡顶轴锻件的热处理[J].一重技术.2006(05)
[24]张杨.全反式维甲酸联合传统化疗药物对肝癌的治疗及其作用机制的研究[D].第二军医大学,外科学（专业学位）,2013,硕士.
[25]李园园.白藜芦醇对SOD1-G93A小鼠腰髓和运动皮层LC3B的影响[D].河北医科大学,神经病学,2014,硕士.
[26]池卫卫.论我国食品安全监管制度的完善[D].江西财经大学,经济法,2013,硕士.
[27]杨爽.我国艺术体操初级训练阶段艺术训练内容体系的研究[D].河北师范大学,体育教学,2014,硕士.
[28]黄牧.基于RBAC模型的权限管理系统设计[D].吉林大学,软件工程,2013,硕士.
[29]金振华,吴树青.装配式检图法——一种保证图纸设计质量的检图方法[J].组合机床与自动化加工技术.1989(10)
[30]付宏程.长安轿车营销渠道模式优化研究[D].长安大学,企业管理,2014,硕士.
[31]张华.柚皮基活性炭制备及吸附应用机理研究[D].广西大学,制糖工程,2013,博士.
[32]王苏彧.悬臂式掘进机记忆截割及自动截割控制方法研究[D].中国矿业大学（北京）,机械电子工程,2014,博士.
[33]尤艳馨.我国国家生态补偿体系研究[D].河北工业大学,2007.
[34]刘涤非.我国开放式基金的流动性风险研究[D].对外经济贸易大学,金融学,2004,硕士.
[35]金洪成.宋、金时期魏蜀正闰观研究[D].宁夏大学,中国古代史,2014,硕士.
[36]何松原.CD44v6、整合素αvβ3、EGFR及E-钙粘素在A549和SK-OV-3细胞系的表达差异与远处转移关系的研究[D].川北医学院,肿瘤学,2014,硕士.
[37]苏兵.受火灾作用钢筋混凝土托梁转换结构的承载性能研究[D].山东建筑大学,结构工程,2013,硕士.
[38]任国建.基于三核镍簇微孔金属—有机框架的合成、表征及性质研究[D].东北师范大学,无机化学,2012,硕士.
[39]郑源遥.绕射引起速度异常问题[J].石油地球物理勘探,1977,03:24-26.
[40]乌仁塔娜.华北驼绒藜种群自组织更新研究[D].内蒙古农业大学,生态学,2013,硕士.
[41]贾丽丽.我国上市公司内部控制信息披露研究[D].山东财经大学,会计学,2013,硕士.
[42]卢利平.美科学家首次用“软模式”破解世界最坚硬材料[J].功能材料信息,2010,Z1:109.
[43]朱晓晓.残疾人福利供需影响因素及其预测分析[D].浙江大学,2009.
[44]王以超.北京将建首都信息呼叫中心[N].市场报,2001-07-18A02.
[45]黄思远.湖北省县域旅游发展空间差异研究[D].华中师范大学,人文地理学,2014,硕士.
[46]刘晶晶.权变理论视角下的社会组织生存策略研究[D].南京大学,社会学,2013,硕士.
[47]王龙飞.西方发达国家服装产业发展研究[D].郑州大学,西方经济学,2013,硕士.
[48]郝卫娟.《红楼梦》方言翻译研究[D].河北师范大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[49]汪迪生.包含无关项RM逻辑优化[D].宁波大学,电路与系统,2013,硕士.
[50]黄荣星.20T/5T桥式起重机主梁的有限元分析及优化设计[D].广西科技大学,机械设计及理论,2013,硕士.