大西洋与南海深海沉积物真菌多样性分析及极地产低温酶菌种的筛选

【摘要】本文通过传统的平板培养法和现代分子生物学方法PCR-RFLP,对10个大西洋不同深度的沉积物样品和8个南海冷泉区采集的一个pushcore的分层样品中真菌多样性进行分析,一定程度上揭示了这18个位点沉积物中真菌种类和数量。通过纯培养方法,从大西洋样品中我们共得到14个真菌纯培养物,从南海样品中我们共得到8个真菌纯培养物,它们多数归属于曲霉、青霉和酵母,这三类都是海洋常见的真菌类型,均为子囊菌；通过分子生物学方法,我们从大西洋样品中得到66个真菌OTU(operationtaxonomicunit),其中属于子囊菌门和担子菌门的分别为61个和5个,通过分子生物学的方法得到的真菌OTU中,Penicilliumcitrinum、Penicilliumchrysogenum，Aspergillussp.MS-2011-F42TMS-2011都被分离得到。从南海样品中得到49个真菌OTU,其中属于子囊菌和担子菌的分别为47个和2个,通过分子生物学的方法得到的真菌OTU中,Aspergillusversicolor被分离得到。低温酶是在低温条件下具有较高催化效率的酶,因其在低温条件下催化效率高和对热敏感等特点,使其在工业应用和基础研究中都具有广泛的研究价值,低温酶有助于在保证催化效率的前提下降低反应温度和缩短反应时间,从而大幅度节约能源,低温酶的应用能够为人类社会的生产和生活提供很大的便利并且在定程度上缓解当今社会资源紧缺的问题。在10℃恒温培养条件下,从来白”雪龙号“第29次科学考察获得的南极沉积物样品中分离筛选到产蛋白酶细菌1株,编号为XP16-1,筛选到产蛋白酶真菌2株,编号分别为J18,P19-1,分别对其进行分子生物学鉴定,通过16srRNA及ITSrRNA扩增后进行同源性分析,比对后确定XP16-1属于交替假单胞菌(Pseudoalteromonassp),J18属于木拉克酵母属(Mrakiasp),p19-1属于地丝霉属(Geomycessp)。分离筛选出产脂肪酶细菌3株,编号分别为XZ5、XZ18、XZ20,筛选到产脂肪酶真菌1株,编号为XZ3,对其进行分子生物学鉴定,通过16srRNA及ITSrRNA扩增后进行同源性分析,比对后确定XZ5属于假交替单胞菌属(Pseudoalteromonasarctica)、XZ18属于芽孢杆菌属(Bacilluspumilus),XZ20属于Glaciecolasp、XZ3属于白冬孢酵母属(Leucosporidiumsp)通过测定各酶的最适反应温度,获得产低温脂肪酶芽孢杆菌XZ18,又从盐度和pH两个条件对该菌产酶条件进行研究,最终确定了该脂肪酶最适反应温度为30℃,该菌最适产酶盐度5%、最适产酶pH为5.0180rpm/min摇培48h,最高产酶量为4.65U/m1.通过PCR扩增,获得了该脂肪酶全长序列,对该序列进行系统发育分析,发现该脂肪酶基因处于较独立的分支。
【作者】郝文惠；
【导师】徐洵；汤熙翔；
【作者基本信息】厦门大学，微生物学，2014，硕士
【关键词】深海沉积物；真菌多样性；低温酶；

【参考文献】
[1]晏国祥.营销组合理论演变的动因分析及其对我国企业营销实践的启示[D].湘潭大学,产业经济学,2003,硕士.
[2]李励祖.银行技术转型面临三大抉择[J].金融电子化,2005,05:11.
[3]黄文媛.电磁超材料单元损耗和太赫兹吸波体的优化设计[D].西南交通大学,电磁场与微波技术,2013,硕士.
[4]房玲.基于下垂控制的三相逆变器并联技术研究[D].南京航空航天大学,电力系统及其自动化,2014,硕士.
[5]杨枫.微波快速合成石墨烯/纳米银及电化学传感应用[D].江南大学,2014.
[6]李敦浩.铝弹发射机的计数装置[J].冶金自动化,1983,02:52-53.
[7]乔寅飞.复方心痹汤对高脂饮食家兔血管内皮功能及炎症因子的影响[D].湖南中医药大学,中医内科学,2014,硕士.
[8]邹敏.重庆主城区绿地对城市热岛效应影响的多尺度研究[D].西南大学,园林植物与观赏园艺,2013,硕士.
[9]徐元锋.从属求偿原则初论[D].中国政法大学,法律,2004,硕士.
[10]徐同福.内质网蛋白IRE1α在胰岛β细胞中的功能与调控机制的研究[D].山东大学,细胞生物学,2014,博士.
[11]夏笠.灵芝三萜组分与紫杉醇联合用药对HER-2过表达的乳腺癌细胞增效作用研究[D].福建医科大学,肿瘤药理,2014,硕士.
[12]辛子牧.西部中小学英语教师能力建设共享平台的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[13]徐力超.映月荷花别样红：李少红的电影世界[D].西南大学,电影学,2014,硕士.
[14]刘昕.从秘鲁诉欧盟关于沙丁鱼商品名称案看TBT协定的适用[D].中国政法大学,法律,2004,硕士.
[15]苏再生.基于价值链的房产企业运营指标体系研究[D].重庆大学,技术经济及管理,2014,硕士.
[16]薛存波.廊坊市区中学阳光体育运动开展现状的调查与研究[D].河北师范大学,体育教育训练学,2012,硕士.
[17]王琳.河北省矿产资源开发管制研究[D].石家庄经济学院,人口、资源与环境经济学,2012,硕士.
[18]陈孟平.高速动力车转向架的橡胶件试制[J].铁道机车车辆.1996(04)
[19]万文亮.基于ARM的嵌入式多功能终端开发设计[D].北京邮电大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[20]周红华.从文化生态角度对比分析《西游记》中道家文化元素的翻译[D].湖北大学,英语语言文学,2011,硕士.
[21]卓海昕.全新世中国北方沙地人地关系初探[D].南京大学,自然地理学,2013,硕士.
[22]何荣军,周菲,赵月钧,孙培龙.灵芝总甾醇的闪式提取工艺优化及其抗氧化活性[J].食品与发酵工业,2013,09:200-204.
[23]倪卡卡.国际粮价波动特与影响因素分析[D].浙江工业大学,2012.
[24]冯曼.狂欢理论视角下的网络“屌丝”文化研究[D].河北大学,传播学,2014,硕士.
[25]张博.在线测径仪控制系统设计[D].河北大学,集成电路工程,2014,硕士.
[26]邱磊.球孢白僵菌组氨酸激酶家族、核激酶Weel和磷酸化酶Cdc25的功能解析[D].浙江大学,微生物学,2014,博士.
[27]常青,江国栋.氧化石墨烯/Fe_3O_4磁性纳米材料固定化酶及降解氯酚类物质的研究[A].中国环境科学学会、四川大学.2014中国环境科学学会学术年会论文集（第五章）[C].中国环境科学学会、四川大学:,2014:4.
[28]杨晓丽.不同分布两两NQD序列部分和之和的强大数定律及其应用[D].湖北大学,概率论与数理统计,2012,硕士.
[29]李序迎.红叶蔬菜有限公司发展战略研究[D].湖南大学,工商管理,2011,硕士.
[30]曾海.LED散热设计与全方向灯光学设计[D].华侨大学,物理学,2013,硕士.
[31]周斌.产业发展视角下江西河口古镇研究[D].武汉理工大学,建筑与土木工程,2012,硕士.
[32]皮道映,孙优贤.非线性时变系统开闭环P型迭代学习控制的收敛性[J].自动化学报,1999,03:67-70.
[33]张煜昌.3D-TiO_2-Ag复合材料对水体中碘离子的吸附性能研究[D].天津大学,化学工程,2013,硕士.
[34]李鹏飞.新疆伊斯兰麻扎建筑的价值评估体系研究[D].新疆大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[35]卢秀珍.韩国高中生习得汉语“不”和“没”否定结构的偏误分析和教学对策[D].山东大学,对外汉语,2013,硕士.
[36]吴平.表没食子儿茶素没食子酸酯的热稳定性研究[D].安徽农业大学,农产品加工与储藏,2011,硕士.
[37]王伟.盐碱地飞出金凤凰——科创慧谷为青岛高新区注入科技新力量[J].中关村,2015,05:56-57.
[38]庄严,战洪斌,王伟,王珂.基于加权颜色直方图和粒子滤波的彩色物体跟踪[J].控制与决策,2006,08:868-872+878.
[39]张叶叶.论勒克莱齐奥的“逃”与“寻”[D].西南交通大学,比较文学与世界文学,2014,硕士.
[40]汪洋.天然药物刺五加提取物缓释微球的研制[D].兰州大学,药剂学,2012,硕士.
[41]张杰.H.263甚低比特率视频软件解码器的原理与实现[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2004,硕士.
[42]胡师林.强激光场中线性分子电离动力学的理论研究[D].中国科学院研究生院（武汉物理与数学研究所）,原子与分子物理,2013,博士.
[43]孟吉伟.制造企业生产过程控制的可靠性研究[D].西南交通大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[44]喻建,喻家信.采用空港交通组织形式,构建多层立体交通枢纽——江北客站站前广场交通组织规划研究[J].重庆建筑.2004(03)
[45]廖良.高校青年教师师德现状及建设研究[D].华中师范大学,思想政治教育,2014,硕士.
[46]欧阳武,程浩忠,张秀彬,张节潭,辛洁晴,姚良忠.考虑分布式电源调峰的配电网规划[J].电力系统自动化,2008,22:12-15+40.
[47]吴光宇,唐加福,郝丽娜,徐心和.钢铁企业CIMS的核心技术——MIC[J].控制与决策,2004,01:89-91+95.
[48]季云.高层梯队互动过程（IPO）的有效性研究[D].上海理工大学,劳动经济学,2012,硕士.
[49]杨春丽.基于碳纳米材料传感器对环境污染物银离子和二酚异构体的研究[D].西南大学,无机化学,2013,硕士.
[50]郑艳.140例临床药物性肝损害的临床分析[D].大连医科大学,内科学,2012,硕士.