人心果叶缩合单宁分离纯化及其结构与生物活性的鉴定

【摘要】人心果(ManilkarazapotavanRoyen)为常绿木本植物,营养丰富,有着丰富的药用历史,可做收敛剂,这些功效与其含有酚类物质息息相关。人心果叶四季常绿,茂盛量丰,且目前未得到充分的利用,本研究通过TP,ECT测定发现人心果叶片中具有丰富的总酚,可溶性缩合单宁含量,分别达到333.4±7.10mg/g和184.4±23.64mg/g。采用50%乙醇和70%丙酮两种不同溶剂对缩合单宁进行提取并对其结构、抑制酪氨酸酶活性、抗氧化活性进行研究,结果如下：经过13CNMR、MALDI-TOF质谱及反相HPLC-ESI-MS质谱联合对50%乙醇提取和70%丙酮提取缩合单宁的纯化物进行结构分析,发现两者在结构上,如基本结构单元、聚合度没有存在较大的差异,均含有原天竺葵定(propelargonidin,PP)、原花青素(procyanidin,PC)和原翠雀定(procyanidingallate,PD)。聚合度能够检测到十聚体,且存在的缩合单宁多为B型连接。通过测定人心果叶缩合单宁对酪氨酸酶单酚酶和双酚酶的活力发现其对酪氨酸酶活性具有着强烈的抑制作用。对单酚酶的抑制作用表现在迟滞时间的延长和稳态活力的下降。当70%丙酮提取缩合单宁纯化物到60μg/mL时酪氨酸酶单酚酶迟滞时间从123.4s延长到了395.4s,稳态活力则从100%下降到了60.9%；而对于50%乙醇提取缩合单宁纯化物而言到60μg/mL时迟滞时间从95.4s延长到331.0s,稳态活力则从100%下降到42.6%。而二者对于双酚酶也表现出了强烈的抑制效果IC50分别为20.97μg/mL和13.35μg/mL。进一步对人心果叶缩合单宁进行抗氧化活性的测定,同样显示出了较强的自由基清除活性,且优于或相当于Vc的自由基清除能力。70%丙酮提取缩合单宁纯化物对DPPH、ABTS自由基清除IC50为80.24±0.73μg/mL、149.93±3.97μg/mL,FRAP的Vc当量为2.60±0.13mmolAAE/g;50%乙醇提取缩合单宁纯化物对DPPH.ABTS自由基清除IC50为73.23±0.70μg/mL、84.90±2.84μg/mL,FRAP的Vc当量为3.24±0.41mmolAAE/g。
【作者】冯慧玲；
【导师】石艳；
【作者基本信息】厦门大学，植物学，2014，硕士
【关键词】人心果叶；缩合单宁；结构测定；抑酪氨酸酶；抗氧化；

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