有机磷对血管内皮细胞的损伤作用的实验研究

【摘要】目的：探讨有机磷对大鼠血管内皮细胞的损伤作用，初步观察卡托普利对有机磷血管内皮细胞损伤作用的保护作用以及作用机制。方法：一、离体血管环实验。采用文献上的方法制备大鼠胸主动脉的血管环，将所制得的血管环根据实验的需要分成不同的组别：不同浓度敌百虫组（3.63×10－4~36.3μmol/L）、敌百虫（3.63μmol/L）+过氧化氢酶组、敌百虫（3.63μmol/L）+左旋精氨酸组、敌百虫（3.63μmol/L）+阿托品组。孵育0.5h，分别检测乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应以及硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应以及血管组织的NO、MDA、SOD等生化指标的变化。为了研究卡托普利对有机磷引起的毒性作用的保护作用，将血管环分别与敌百虫（3.63μmol/L）、卡托普利（10μmol/L）、卡托普利（0.1、1、10μmol/L）+敌百虫（3.63μmol/L）、敌百虫（3.63μmol/L）+超氧化物歧化酶、敌百虫（3.63μmol/L）+过氧化氢酶、敌百虫（3.63μmol/L）+依那普利拉、敌百虫（3.63μmol/L）+卡托普利（10μmol/L）+巯基蛋白酶抑制剂共孵育0.5h，分别检测乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应以及硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应以及血管组织的NO、MDA、SOD等生化指标的变化。二、体外培养的细胞实验。体外培养HVUEVC-304细胞，为了研究有机磷对血管内皮细胞的损伤作用机制，将培养的人脐静脉内皮细胞分成不同组别：不同浓度敌百虫（3.63×10－4~36.3μmol/L）组、组胺组、敌百虫（3.63μmol/L）+过氧化氢酶组，共孵育0.5h后，用白蛋白标记法检测培养的人脐静脉内皮细胞的单层通透性，用噻唑蓝比色法检测内皮细胞活性，用试剂盒测定细胞培养液中NO、MDA、SOD等生化指标的变化。为了研究卡托普利对有机磷引起的毒性作用的保护作用，HVUEVC-304分别与敌百虫（3.63μmol/L）、卡托普利（10μmol/L）、卡托普利（0.1、1、10μmol/L）+敌百虫（3.63μmol/L）、组胺、敌百虫（3.63μmol/L）+超氧化物歧化酶、敌百虫（3.63μmol/L）+过氧化氢酶、敌百虫（3.63μmol/L）+依那普利拉、敌百虫（3.63μmol/L）+卡托普利（10μmol/L）+巯基蛋白酶抑制剂（PHMB）共孵育0.5h，分别检测HVUEVC-304人脐静脉内皮细胞的单层通透性、内皮细胞活性以及细胞培养液中NO、MDA、SOD等生化指标的变化。结果：敌百虫（3.63×10－2~36.3μmol/L）与血管环共孵育0.5h，敌百虫能够显著性抑制ACh诱导的EDR反应，且抑制效应呈现出剂量依赖性；敌百虫不能够抑制SNP引起的非内皮依赖性舒张反应。敌百虫会导致血管组织中NO含量下降、MDA含量上升以及SOD活性下降。卡托普利（0.1~10μmol/L）能够对敌百虫引起的EDR反应产生保护作用，且表现出浓度依赖性，而对SNP诱导的非内皮依赖性舒张反应没有影响。卡托普利同时能够对敌百虫引起的NO含量下降、MDA含量上升以及SOD活性下降产生保护作用。敌百虫（3.63×10－2~36.3μmol/L）与HVUEVC-304细胞共孵育0.5h，显著性增加了单层内皮细胞的通透性，降低了内皮细胞活性，细胞培养液中NO含量下降、MDA含量上升以及SOD活性下降。卡托普利（0.1~10μmol/L）能够减轻敌百虫引起的单层内皮细胞通透性增高，内皮细胞活性降低，细胞培养液中NO含量下降、MDA含量上升以及SOD活性下降，且该作用呈现剂量依赖性。超氧化物歧化酶、过氧化氢酶能与拉托普利产生类似的保护作用，而依那普利拉（不含巯基）则不能产生类似的保护作用，巯基蛋白酶抑制剂能显著性抑制卡托普利产生的保护作用。结论：敌百虫能够直接对血管内皮细胞产生损伤，该损伤原理可能与敌百虫诱发的氧化应激而引起的脂质过氧化反应有关。卡托普利对敌百虫引起的血管内皮细胞损伤表现出显著的保护作用，其作用机制可能是通过其巯基的抗氧化反应产生的，与其抑制血管紧张素转换酶的作用无关。
【作者】李震；
【导师】黄红林；
【作者基本信息】南华大学，药理学，2012，硕士
【关键词】敌百虫；离体血管环；内皮细胞；卡托普利；

【参考文献】
[1]孟博,井元伟,刘晓平.基于奇异摄动理论的非仿射系统的输出调节问题[J].控制与决策,2009,02:259-263.
[2]李善本,徐毓良.机器人图形仿真软件[J].自动化学报,1990,04:380-382.
[3]郐红芳.建构主义指导下的大学英语阅读教学[D].山东师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[4]胡侃.大跨度多塔斜拉桥临时支架受力分析[D].西南交通大学,建筑与土木工程,2014,硕士.
[5]徐彪.羊膜上皮细胞和羊膜间充质干细胞构建组织工程皮肤的实验研究[D].苏州大学,免疫学,2013,硕士.
[6]余卓群,陈维予.论建筑文化品位[J].华中建筑.2007(01)
[7]王旭珍,刘宁,胡涵,王新平,邱介山.3D二硫化钼/石墨烯组装体的制备及其催化脱硫性能[J].新型炭材料,2014,02:81-88.
[8]赵晨曦.DNA甲基化相关的lncRNAs在原发性肝癌发生过程中的功能及机制研究[D].第二军医大学,遗传学,2013,硕士.
[9]范昕炜,杜树新,吴铁军.粗SVM分类方法及其在污水处理过程中的应用[J].控制与决策,2004,05:573-576.
[10]张宏伟,葛志强,袁小锋,宋执环,叶凌箭.基于机器视觉的再生铜铜含量快速估计系统(英文)[J].TransactionsofNonferrousMetalsSocietyofChina,2014,08:2665-2676.
[11]韩文博.两类随机系统的最优控制问题研究[D].内蒙古大学,数学,2014,硕士.
[12]徐皓东.MJ舒适家居设备代理商市场营销策略研究[D].电子科技大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[13]房研.中国省域文化创意产业投入产出效率研究[D].北京交通大学,2014.
[14]欧军柱.SDXC公司企业文化深植方案研究[D].湘潭大学,MBA,2011,硕士.
[15]李鹏程.一种抽油机无线示功仪的设计与实现[D].新疆大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[16]苏倩.基于ZigBee的多智能机器人无线通信系统的硬件平台研究[D].西安电子科技大学,工学,2012,硕士.
[17]王明明.法律经济学视野下我国酌定减轻量刑程序之报请方式[J].经济研究导刊,2014,26:295-296.
[18]陈以侃.Irony in Martin Amis’s London Fields and Money[D].复旦大学,英语语言文学,2012,硕士.
[19]周密.武汉市乡村养老地的开发研究[D].华中师范大学,农村与区域发展,2014,硕士.
[20]李先毅.LVS集群管理系统[D].大连理工大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[21]王忠兴.Ag/TiO_2复合材料的制备及其在磁场中光催化降解有机染料的研究[D].辽宁大学,2012.
[22]柳溪.萝北某鳞片石墨矿选别高碳石墨新工艺研究[D].武汉理工大学,2014.
[23]程莉莎.CFRP加固钢筋混凝土梁极限承载力的试验研究和理论分析[D].浙江大学,桥梁与隧道工程,2004,硕士.
[24]何常胜,董鸿魁,翟鹏,苏杭,王新乐,丁永胜.水电机组一次调频与AGC典型控制策略的工程分析及优化[J].电力系统自动化,2015,03:146-151.
[25]彭彦.NIOS及FPGA在惯组测试中的应用研究[D].西安工业大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[26]王跃.基于汉语协同发音模型的文本驱动三维口型动画合成研究[D].山东财经大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[27]赵华山.株洲百货公司服务营销策略研究[D].湖南工业大学,工商管理,2012,硕士.
[28]朱华.不确定参数下混沌系统的控制与同步[D].浙江工业大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[29]单雪韩.知识共享的影响因素分析与实现对策研究[D].浙江大学,2003.
[30]杨保杰.胸腺基质淋巴细胞生成素对巨噬细胞泡沫化的影响[D].华中科技大学,内科学,2013,硕士.
[31]孙同文.含油气盆地输导体系特征及其控藏作用研究[D].东北石油大学,矿产普查与勘探,2014,博士.
[32]邓贤兰,刘玉成,吴杨.井冈山自然保护区栲属群落优势种群的种间联结关系研究[J].植物生态学报,2003,04:531-536.
[33]刘娜.土壤的可持续利用与发展生物菌肥的战略研究[D].天津大学,工商管理,2004,硕士.
[34]王亮.地方高校硕士研究生就业竞争力分析[D].山西财经大学,教育经济与管理,2013,硕士.
[35]吴仁军.自然垄断的规制研究——基于政府信誉的重新理解[D].华南师范大学,政治经济学,2004,硕士.
[36]张默.中药治疗非糜烂性胃食管反流病的meta分析[D].北京中医药大学,中医内科学,2014,硕士.
[37]欧海英,张为华,李晓斌,刘春梅.平行坐标可视化技术在固体火箭发动机优化设计中的应用[J].固体火箭技术,2004,04:255-259.
[38]周恒.以保护旅游者权益为视角对我国旅游法存在问题的分析[D].新疆财经大学,经济法,2013,硕士.
[39]鞠伟伟.基于中介语语料库的韩国留学生兼语句偏误分析[D].鲁东大学,汉语国际教育（专业学位）,2014,硕士.
[40]肖毓华.FK1706促进周围神经再生作用的实验研究[D].福建医科大学,骨外科学,2014,硕士.
[41]张瑾.MG53敲除小鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的修复机营养补充的作用[D].北京体育大学,运动人体科学,2013,硕士.
[42]张健.石墨烯负载金属氧化物材料的制备及其催化臭氧化苯酚性能研究[D].华南理工大学,2013.
[43]史林启,孙平川.序言[J].高分子通报,2013,01:2-3.
[44]徐东芳.不确定性雇用情境下的工作幸福感影响因素研究[D].华侨大学,企业管理,2013,硕士.
[45]于晓晗,袁保宗.方向测度及其在纹理识别中的应用[J].自动化学报,1990,04:347-351.
[46]牛丽芳.基于时滞惯性流形的几类非线性弹性杆整体动力学行为的研究[D].太原理工大学,固体力学,2014,博士.
[47]邓威进.基于模态分析的织机打纬系统动力学性能研究[D].浙江理工大学,机械电子工程,2014,硕士.
[48]李语轩.腐败犯罪违法所得没收程序研究[D].浙江工商大学,诉讼法学,2013,硕士.
[49]邵卫.基于蓝牙传输的太阳能电池测试系统[D].华中科技大学,集成电路工程,2013,硕士.
[50]傅小钊.附加视频材料对于外语学习中听力理解的作用[D].西安外国语大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.