Apelin-13通过激活PKCα上调THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达

【摘要】目的：Apelin家族（包括apelin-13）是孤儿G蛋白偶连受体APJ的配体，是新近发现的一种脂肪因子，具有血管保护及抗炎的作用。有研究发现PKC可能参与apelin细胞内信号的传导。三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）作为一种重要的胆固醇转运体，能通过促进细胞内胆固醇流出，减少泡沫细胞形成，起到抗动脉粥样硬化的作用。但是apelin对ABCA1是否具有调节作用尚不清楚。本研究选取THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞作为研究对象，探讨apelin-13对胞内ABCA1表达及其介导的胆固醇流出的影响及其机制。方法：选取ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为主要研究对象，观察不同浓度apelin-13(0,1,10,100,1000nM)及其处理细胞不同时间（0,6,12,24,48h）后，细胞内ABCA1表达情况。油红O染色及高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量，液体闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出情况。实时定量PCR检测ABCA1mRNA水平。Westernblot检测ABCA1、PKC及磷酸化PKC蛋白水平。Calpain活性检测试剂盒检测calpain的活性。用apelin活性抑制剂PTX、PKC抑制剂或用转染PKCαsiRNA对apelin-13作用下的细胞共处理24h，检测细胞内ABCA1、磷酸化ABCA1水平及calpain活性，并观察对胆固醇流出的影响。结果：Apelin-13以时间及剂量依赖性上调ABCA1的蛋白表达，但对其mRNA水平无显著影响。进一步研究发现apelin-13通过磷酸化ABCA1及抑制calpain的活性，减少ABCA1蛋白降解，从而增加细胞内胆固醇流出；用PKC抑制剂预处理或转染PKCα的小干扰RNA，apelin-13对细胞内ABCA1蛋白、ABCA1磷酸化水平及calpain活性等的影响随即取消。结论：在THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中，apelin-13通过激活PKCα抑制calpain活性，并磷酸化ABCA1，从而提高ABCA1的稳定性，减少其蛋白降解，起到上调ABCA1表达及促进细胞内胆固醇流出的作用。
【作者】刘晓艳；
【导师】唐朝克；
【作者基本信息】南华大学，病理学与病理生理学，2012，硕士
【关键词】动脉粥样硬化；apelin-13；三磷酸腺苷结合盒转运体A1；蛋白激酶Cα；calpain；

【参考文献】
[1]周晋华.我国金属矿山井巷掘进技术的进步和发展方向[J].长沙矿山研究院季刊.1982(01)
[2]鲍亮亮.内蒙古禾谷孢囊线虫的发生及生物防治[D].内蒙古农业大学,植物病理学,2012,硕士.
[3]耿刚.行政执法与刑事司法衔接机制研究[D].扬州大学,宪法学与行政法学,2012,硕士.
[4]王宏伟.矢量分解法压噪[J].石油地球物理勘探,1989,01:16-29+118.
[5]陈黎.NAT2基因多态性与子宫内膜异位症遗传易感性的相关性研究[D].浙江大学,妇产科学,2003,硕士.
[6]王超夫.客户关系管理及其在电信企业中的应用[D].吉林大学,2005.
[7]王成.新型农村社会养老保险的现实理性选择[D].天津商业大学,行政管理,2013,硕士.
[8]张彬.基于粒子群算法的群体机器人围捕行为的研究[D].兰州理工大学,机械制造及自动化,2013,硕士.
[9]鲁保云,岳红.针对生物振荡网络分析的周期系统目标敏感性方法研究(英文)[J].自动化学报,2012,07:1065-1073.
[10]骆向兵.我国医疗卫生行业政府投入管理制度研究[D].财政部财政科学研究所,财政学,2014,博士.
[11]刘贞报.空中格斗作战三维数字模拟系统设计[D].西北工业大学,电力电子与电力传动,2004,硕士.
[12]王蕊.捷联式导引头稳定方法研究[D].哈尔滨工业大学,控制科学与工程,2014,硕士.
[13]张婷婷.小麦蛋白质二硫键异构酶的表达与性质研究及其对面粉品质的影响[D].华南理工大学,制糖工程,2014,硕士.
[14]霍威.风电齿轮箱在线油液磨粒检测系统研究[D].北京交通大学,2014.
[15]本报记者孟晶.橡胶前沿技术，目光瞄向何方[N].中国化工报,2014-10-09002.
[16]邱玲玲.子宫内膜异体移植建立小鼠子宫内膜异位症模型的研究[D].福建医科大学,妇产科学,2014,硕士.
[17]王芳.几类非线性泛函微分方程的振动性研究[D].中北大学,应用数学,2014,硕士.
[18]杨志.科技创新与加快转变经济发展方式的研究[D].江南大学,马克思主义基本原理,2012,硕士.
[19]尹文丽.精神分析视野中的方方小说[D].华侨大学,中国语言文学,2013,硕士.
[20]冯旭梅.第三方手机支付的风险控制研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[21]秦永超.新建电气化铁路负荷预测及其有效性评估[D].西南交通大学,电力系统及其自动化,2014,硕士.
[22]张忠星.未成年人侵权的监护人责任[D].吉林大学,法律,2013,硕士.
[23]张天阳.电子政务信息资源整合问题分析与策略研究[D].东北师范大学,政治学理论,2012,硕士.
[24]MALLICKMahendra,LASCALABarbara.利用位置测量的单点和两点差分跟踪起始算法的比较研究(英文)[J].自动化学报,2008,03:258-265.
[25]吴何来,周劲松,许沧粟,陈文,杨义,骆仲泱.超临界乙醇提质生物油的汽油机试验研究[J].浙江大学学报(工学版),2015,01:136-141+149.
[26]南雪.Ⅰ 脐带血巨核系祖细胞注射液有效性临床试验研究 Ⅱ 人造血转录因子GATA-1的功能初探[D].中国人民解放军军事医学科学院,再生医学,2013,硕士.
[27]解冲锋,王和宇,史凡.IPv6技术若干问题的探讨[J].信息网络.2003(09)
[28]黄启萍.传感器网络密钥管理及路由协议研究[D].西安电子科技大学,2005.
[29]马雪晴.中韩影视剧跨文化传播研究[D].兰州大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[30]刘玲玲.小麦品质近红外光谱分析系统关键技术研究[D].中国农业机械化科学研究院,机械设计及理论,2013,硕士.
[31]马逢清.冻融循环条件下府谷地区砂岩、泥岩物理性质及细观结构研究[D].西安科技大学,地质工程,2014,硕士.
[32]林鲲.A银行债券业务风险管理的研究[D].厦门大学,工商管理,2014,硕士.
[33]焦芳芳.川江及三峡库区干散货船标准船型技术方案评估与优化[D].大连海事大学,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[34]朱伟.伸缩臂架再制造准入寿命与经济性评估方法研究[D].太原科技大学,机械设计及理论,2014,硕士.
[35]刘钊.铁路高架候车厅地面风口引风的自然通风研究[D].哈尔滨工业大学,建筑与土木工程,2014,硕士.
[36]王中晔.超声清洗电源控制技术研究[D].哈尔滨工业大学,电气工程,2013,硕士.
[37]李峻夫.基于机器视觉的BOD在线检测方法研究[D].哈尔滨理工大学,信号与信息处理,2012,硕士.
[38]陈勇.基于获取核心技术的海外并购项目风险管理实践[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[39]韩志刚.多层递阶辨识方法[J].自动化学报,1988,05:383-386.
[40]陈洁.方形孔径平面微透镜阵列的折射率分布研究[D].西南大学,光学,2013,硕士.
[41]丁红枫.论控辩平等及我国刑事诉讼中辩护律师的诉讼地位和诉讼权利及其保障[D].苏州大学,法律,2003,硕士.
[42]张弦.无线通信的信道建模与仿真技术研究[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[43]毛天怡.辽宁移动于洪分公司计费管理系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[44]谢东,李为民,宣科,何多慧.应用数据挖掘的束流状态描述建模[J].高能物理与核物理,2005,04:424-429.
[45]李保英.多菌种酱油制曲工艺及其对酱油风味影响的研究[D].浙江工商大学,食品科学与工程,2013,硕士.
[46]牛银银.磷胁迫下油菜子叶、茎及其根系分泌蛋白的双向电泳分析[D].郑州大学,细胞生物学,2013,硕士.
[47]彭志生.供港澳食用动物检验检疫管理模式研究[D].中国农业大学,预防兽医,2004,硕士.
[48]赵振宇.求解第一类算子方程的多重网格算法[D].河北工业大学,应用数学,2004,硕士.
[49]司顺文.贫困村互助资金运作机制创新研究[D].华中师范大学,社会学,2013,硕士.
[50]邓京津.荆州城市基础设施建设研究[D].华中师范大学,人文地理学,2013,硕士.