常用渔药有效含量、杀菌效果比较及抗生素耐药性初步研究

【摘要】药物防治是当前水产养殖病害防控的重要手段之一。由于当前渔药市场上产品质量良莠不齐，养殖户难以对药物准确用量形成统一标准，从而造成渔药乱用、滥用，不仅导致部分致病菌耐药性增强、影响病害防控效果，同时也威胁到养殖环境和产品的质量安全。为了解现有渔药产品的有效含量、杀菌效果以及常见致病菌的耐药情况，本研究采用碘量法、高效液相色谱法（HPLC）、超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法（UPLC-ESI-MS/MS）依次测定了34种卤素消毒剂、8种喹诺酮类及5种氟氯霉素药物的有效含量；同时对11种消毒剂、13种抗生素对嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）和溶藻弧菌（Vibrioalginolyticus）的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)作了检测；并结合已知的14种耐药基因，对32株致病菌携带耐药基因的情况作了排查。研究结果如下：（1）渔药产品有效含量检测结果：34种消毒剂中，6种实测含量达到产品标示含量，占19.35%；10种实测含量达到标示含量80%～100%，占29.41%；11种产品实测含量为标示含量的50%~80%，占32.35%，4种产品的实测含量低于包装含量的50%，占11.76%。8种氟喹诺酮类药物中，只有4种药物的有效成分含量与标示含量基本一致，含量最低的只有包装所示的59.2%。5种氟苯尼考类药物中，3种药物的有效成分含量与标示含量基本一致，其余2种有效含量仅为标示值25%。结论：市面销售渔药存在实际含量与包装含量不符的现象，其中消毒剂类药物有效含量不足的问题尤为突出。（2）不同渔药对受试菌的MBC/MIC介于1～2之间，其中：卤素消毒剂对嗜水气单胞菌和溶藻弧菌的MIC和MBC值分别介于0.11～5.29mg/L和1.06～40.3mg/L；喹诺酮类和氟苯尼考类渔药对溶藻弧菌的MIC和MBC值分别介于2.28～18.94mg/L和0.022～4.48mg/L。结论：试验消毒剂、喹诺酮和氟苯尼考药物均表现出优良的抑菌和杀菌效果。喹诺酮类与氟苯尼考类渔药对嗜水气单胞菌杀灭效果明显优于溶藻弧菌；可溶性氟苯尼考杀菌效果优于粉剂型。（3）32株致病菌携带耐药基因情况检测结果：（a）氟喹诺酮类耐药基因携带情况：PMQR基因阳性的有12株,检出率为37.5%，其中：qnrA阳性的有3株，检出率为9.4%；qnrD阳性的有5株，检出率为15.6%；qnrS阳性的只有1株，检出率为3.1%；qnrB、qnrC和aac(6’)-Ⅰb-Cr基因均未有检出；外排泵相关基因oqxA阳性的有3株，检出率为9.4%，qepA和mdfA两个外排泵基因未有检出；有15株携带gyrA基因，占46.9%；parC基因只从1株菌中检测到。结论：浙江地区海水养殖病原菌已在基因水平对喹诺酮类药物产生耐药性。（b）氟苯尼考类药物耐药基因携带情况：32株受检菌中，4株floR呈阳性，检出率为12.5%；13株呈fexA基因阳性，检出率为40.6%；fexB和cfrR基因未检出。结论：所测致病菌中已有接近一半携带了氟苯尼考类耐药基因。
【作者】张文文；
【导师】许文军；施慧；
【作者基本信息】浙江海洋学院，养殖（专业学位），2014，硕士
【关键词】水产药物；有效含量；最小抑菌浓度；最小杀菌浓度；耐药基因；

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