鸡新城疫耐热糖玻璃活疫苗制备技术研究

鸡新城疫耐热糖玻璃活疫苗制备技术研究

作者:师大云端图书馆 时间:2018-08-31 分类:硕士论文 喜欢:2151
师大云端图书馆

【摘要】鸡新城疫是一种急性、烈性传染病,严重威胁养禽生产。新城疫活疫苗是现代养禽业用于疫病防治最常用的疫苗之一,长期以来沿用传统的冻干技术和冷链系统进行疫苗生产与保存。由于冻干疫苗的生产、运输及使用过程必须依赖冷链系统,冻干苗对环境温度的要求较高,给实际生产应用造成了诸多不便。本研究从提高我国兽用活疫苗耐热性能出发,以鸡新城疫为研究对象,拟将含糖的鸡新城疫病毒液在真空泡沫干燥下,通过脱水升华技术,模拟自然界发生的天然脱水过程,使鸡新城疫病毒完全脱水而不发生冰晶损伤,仅在溶水后恢复生物学活性。通过37℃耐老化试验筛选出适用的耐热保护剂及优化的干燥工艺,以期获得可室温(25℃)稳定保存12个月以上的疫苗产品,为我国兽用耐热糖玻璃疫苗制备技术的研制奠定基础。1.耐热保护剂配方筛选耐热保护剂筛选试验主要选取蔗糖、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等,采用正交试验以不同浓度进行配方设计,在相同的真空干燥程序下,进行鸡新城疫活疫苗真空泡沫干燥试验。通过将干燥制品进行37℃耐老化试验(初筛采用37℃保存10d测定NDVEID50)、产品外观形态、测定病毒含量和残余水分,综合筛选耐热保护剂配方,证明25%海藻糖对病毒疫苗的保护效果最好。初步筛选出配方T5A、T5B、T5、T7A、T7B、T7在室温(25℃)保存活疫苗检测EID50,其中T7A、T7B在保存3个月时病毒滴度损失差值已超过101.0EID50、T5A、T5B在保存5个月时病毒滴度损失差值已超过101.0EID50。2.泡沫干燥工艺的优化在筛选出优化配方的基础上,调整工艺曲线,通过手动调整隔板温度和二次干燥时间,以残余水分和样品EID50为衡量标准,最终筛选出较为理想的配方T5和T7,并分别泡沫干燥3个批次的样品,对其进行EID50值监测。3.样品温度耐受性保存期试验所筛选配方T5和T7用于研究温度耐受性、不同隔板位置对样品干燥的影响,及与同类制品的比较。结果发现,以15℃和25℃为基础温度保存的样品短时间放置4℃和37℃下滴度损失差值在1010EIDso以内,说明T5、T7在短时间内能够抵制极端温度变化对病毒效价的影响;隔板的不同位置对于样品的干燥并无明显的影响,整个干燥过程较为稳定。试验表明,与同类制品的耐老化试验相比,虽然冻干制品的起始效价较高,但在37℃存放10d后泡沫干燥样品滴度损失差值仍在10’。EID50以内,而冻干制品的效价却跌至近乎为0。在对T5和T7室温保存一年的EID50数值监测中,发现T5的3个批次在保存12个月时滴度损失平均差值为10075EID50,T7的3个批次则在保存9个月时滴度损失已超过1010EID50。T5组的残余水分在保存期9个月内一直处于2%以内,在保存期12个月时残余水分达到3.5%;而T7组在保存期9个月时残余水分为5%,当保存期12个月时,残余水分达到约7%。
【作者】王佳佳;
【导师】芮荣;侯继波;
【作者基本信息】南京农业大学,兽医,2013,硕士
【关键词】鸡;新城疫;泡沫干燥;海藻糖;耐热糖玻璃活疫苗;

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