外生菌根真菌菌株耐盐碱性筛选以及黑松（Pinus thunbergii Parl.）菌根苗合成、耐盐碱性研究

【摘要】黑松(PinusthunbergiiParl.)是暖温带海岸防护林的建设中的先锋树种,我国将其从日本引种到盐碱地区进行生态修复。利用外生菌根菌与黑松合成菌根化苗,是提高黑松耐盐碱性和在盐渍土壤造林成活率的一项重要措施。目前关于黑松的菌根合成研究较少。本文研究了实验室分离保存的18种菌根真菌菌株在盐碱胁迫条件下的培养特性,筛选、优化了黑松菌根化苗合成基质,成功合成了14种黑松菌根化苗,并研究了黑松菌根苗对盐碱胁迫的生理响应,结果如下：1、所选用的18种外生菌根真菌菌株为：土生空团菌(Cenococcumgeophilum,编号CG)、红汁乳菇(Lactariushatsudake,编号LH)、紫晶蜡蘑(Laccariaamethystea,编号LA)、彩色豆马勃(Pisolithustinctorius,编号PT)、须腹菌(Rhizopogonsuperiorensis,编号RS)、马勃状硬皮马勃(Sclerodermaareolatum,编号SA)、褐环粘盖牛肝菌(Suillusluteus)的两个菌株分别编号SL1和SL2,Melanogasterintermedius编号MI,及待鉴定9种菌株分别编号为LAC、UJ、U1、U9、U10、U11、U12、U14、U15。在供试菌株中只有CG菌同时具有耐盐性和耐碱性。CG、LAC、U10、UJ、MI、SL2、U9、U1、RS、SA、LAJ菌有耐盐胁迫能力,根据其相对生长率判断其耐盐胁迫能力大小依次为CG、LAC>U10>UJ》MI、SL2、U9>U1、RS、SA》LAJ(“》”表示在P<0.05条件下其左侧显著大于右侧,“>”表示在P<0.05条件下其左侧大于右侧但是差异不显著,下文同)。MI、U14、CG、SL2、LAJ、LH、UJ、U9菌有耐碱胁迫能力,其耐碱性依次为MI、U14》CG》SL2、LAJ、LH》UJ》U9。CG、MI、SL2、LH、LAJ、U14菌在碱处理条件下液体培养基pH值都有显著下降(P<0.05)。2、以火山灰、水草、椰壳、树皮、兰花石、陶粒、珍珠岩、蛭石、石英砂为材料,根据不同配比配成26种不同基质。通过菌根苗合成试验筛选发现在实验室条件下火山灰最适宜用来做接菌基质,其理化性质为：pH:5.7-6.5,EC:0.02-0.03dS·m-1,容重：0.28-0.54kg·m-3,持水能力：190%-305%,总孔隙度：72%-108%,气水比：0.27-1.40。3、利用本实验设计的菌根合成基质成功合成14种菌根化苗,其侵染时间在2个月左右。除SLl侵染率为15.4%外,其余菌根化苗侵染率达到60%以上。除CG、LA、RS、SL1、SL2外,其余菌尚未在野外调查中发现与黑松共生,同时也是第一次在实验室条件下人工合成菌根化苗。与非接种相比,接种外生菌根真菌对黑松有明显的促生效果,接菌后植株的生物量、地径、株高、茎长、根长有不同程度的增长,其中PT、U9、LAJ、TM、LAC、SL1、U11、RS、CG、U10、UZ菌根化苗与对照相比生物量显著增加(p<0.05),分别增加了20.5%、30.1%、34.4%、45.1%、51.9%、60.3%、66.1%、94.7%、126.9%、241.2%。LAJ、U10、CG、UZ菌的菌根化苗地径比对照分别提高了64.5%、64.8%,77.2%、82.1%达到极显著水平(p<0.01)。接LAJ、CG、Ull、SL1、TM后植株的茎长与不接菌相比有显著增长(p<0.05),分别增加了29.2%、26.9%、27.7%、29.4%、29.3%。根系空间吸收面积大大增加,菌根形态各异,其菌丝体颜色,分支方式及根毛有无等菌根根尖形态方面存在不同或相似特征。4、通过土培试验,研究了LAJ、PT、CG三种菌根化黑松幼苗的耐盐碱性。结果表明,盐渍土培2个月对CG、LAJ菌根化苗的正常生长几乎无影响,而PT菌根化苗与非菌根化苗则出现叶片萎黄甚至死亡等现象。与非菌根化苗相比,菌根化苗的叶绿素a和叶绿素b和类胡萝卜素的含量显著高于与非菌根化苗,地下部的K/Na含量均有显著提高。CG、LAJ菌根化苗的叶绿素a、b含量和体内脯氨酸的含量均显著高于PT菌根化苗(P<0.05)。LAJ、PT菌根化苗具有一定的耐盐碱能力,有望用于滨海盐渍土的造林实践。
【作者】李小利；
【导师】陈亚华；
【作者基本信息】南京农业大学，植物学，2013，硕士
【关键词】黑松；外生菌根真菌；盐碱；菌根合成基质；菌根效应；

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